易立，楊伊姝，張婷婷，陳彬，湯劼

腦血管病的致殘率和死亡率在全世界范圍內呈現逐年上升的趨勢。人群研究發(fā)現，約15%的缺血性腦血管病是由大血管病變所致[1]。頸動脈狹窄（carotid artery stenosis，CAS）不僅是缺血性卒中和TIA最主要的病因之一，而且在缺血性腦血管病中的發(fā)病率遠較椎基底動脈和顱內動脈高[2]。頸動脈狹窄最主要的病理基礎是動脈粥樣硬化，近年來炎癥因素在動脈粥樣硬化中的作用逐漸受到重視。

正五聚蛋白3（pentraxin 3，PTX3）是1992年發(fā)現的一類炎癥因子，為五聚體結構蛋白，與CRP屬同一個超家族，PTX3對動脈粥樣硬化進展的預測比CRP更具特異性[3]。凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體-1（lectinlike oxidized low density lipoprotein receptor-1，LOX-1）作為氧化型低密度脂蛋白的特異性受體，在各種促炎和促動脈粥樣硬化因子的刺激下高度表達[4]，是早期診斷動脈粥樣硬化的新型生物標志物[5]。

本研究旨在通過檢測缺血性卒中患者PTX3和LOX-1的表達，及其與頸動脈狹窄程度的關系，探索PTX3在頸動脈狹窄形成過程中的作用。

1 研究對象與方法

1．2 方法

1．2．1 基線資料收集 收集患者的臨床資料，包括性別、年齡、身高、體重、血壓，計算患者BMI。收集既往病史，包括高血壓、糖尿病、高脂血癥、吸煙史（定義為連續(xù)或累積吸煙≥6個月，每日≥1支）、他汀類藥物應用史及缺血性腦血管病家族史。

1．2．2 頭頸CTA檢測及圖像分析 入組患者均行頭頸CTA檢查以評價雙側頸總及頸內動脈的狹窄程度。采用美國GE公司的GE revolution CT，雙筒高壓注射器（STELLANT，MEDRAD Inc．，USA），非離子對比劑選用碘普羅胺（370 mgI/mL，GE Inc．，USA）。掃描范圍自主動脈弓至顱底，自下而上。將采集到的頭頸CTA圖像傳至advantage workstation 4．6工作站上，利用單層MPR重組圖像。由2名具有5年以上頭頸CTA診斷經驗的醫(yī)師采用盲法、獨立完成圖像分析，最后匯總結果。采用北美癥狀性頸動脈內膜切除術試驗（North American Symptomatic Carotid Endarterectomy Trial，NASCET）[6]公布的方法測量計算動脈狹窄百分比，分析的血管包括頸總動脈、頸動脈球部、頸內動脈C1～C7段。選取最嚴重的狹窄程度納入研究。由神經放射醫(yī)師在每位患者的血管造影上測量最大狹窄點和頸動脈球部以外的正常動脈部分的管腔直徑，通過計算這兩個測量值的比率來確定狹窄的百分比，由兩位經驗豐富的神經放射科醫(yī)師分別進行評估，匯總結果。

1．2．3 血脂水平及PTX3、LOX-1濃度的檢測空腹12 h以上采集靜脈血檢測TC、LDL-C、HDL-C、TG。乙二胺四乙酸抗凝3500 rpm離心10 min，收集血漿-80℃凍存?zhèn)溆?。采用ELISA方法檢測PTX3（Quantakine DPTX 30，R&D system）和LOX-1（Humen LOX-1/OLR1 DuoSet ELISA，R&D Systems）的濃度。

1．2．4 研究分組 根據CTA檢查結果按照有無狹窄將患者分為頸動脈狹窄組和無頸動脈狹窄組。在頸動脈狹窄組中，以狹窄程度作為分組標準，≥50%的狹窄定義為嚴重狹窄組，＜50%定義為輕度狹窄組。根據PTX3濃度的中位數將所有患者分為高濃度PTX3（≥PTX3濃度中位數）組和低濃度PTX3（＜PTX3濃度中位數）組。

比較各組患者在性別、年齡、缺血性腦血管病家族史、吸煙、高血壓、糖尿病、他汀類藥物應用史、BMI、TC、HDL-C、TG、PTX3等方面的差異。

1．3 統計學方法 采用SPSS 23．0軟件進行數據采用獨立樣本t檢驗，計數資料用率表示，兩組間比較采用卡方檢驗。以頸動脈狹窄為因變量，以PTX3、LOX-1、血脂水平、性別、年齡、高血壓，糖尿病、吸煙、缺血性腦血管病家族史、他汀類藥物應用史、BMI等為自變量，采用多因素Logistic回歸分析頸動脈狹窄的獨立危險因素。P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

這以后，曼尼托巴、阿爾伯塔和卑詩省均有學生家長分別向本省教育廳請愿，要求恢復數學基礎知識和技能的教學.[5]

表1 頸動脈狹窄組和無頸動脈狹窄組的比較結果

2．1 不同程度頸動脈狹窄的分組比較結果 本研究共入組102例急性缺血性卒中患者，平均年齡63．7±8．3歲，男性67例（65．7%）。其中無頸動脈狹窄組45例（44．1%），頸動脈狹窄組57例（55．9%）。頸動脈狹窄組與無頸動脈狹窄組相比較，在性別、年齡、吸煙、高血壓、糖尿病、他汀類藥物應用史、BMI、TC、HDL-C、TG等方面差異無統計學意義。頸動脈狹窄組的LDL-C、LOX-1和PTX3濃度均較無頸動脈狹窄組增高，差異有統計學意義。頸動脈狹窄組的缺血性腦血管家族史的比例較無狹窄組更高（表1）。

在57例頸動脈狹窄組中，輕度狹窄32例（56．1%），嚴重狹窄25例（43．9%）。嚴重狹窄組的LDL-C、LOX-1和PTX3的濃度均高于輕度狹窄組，差異具有統計學意義，而兩組間缺血性腦血管病家族史差異無統計學意義（表2）。

2．2 不同濃度PTX3的分組比較結果 根據PTX3濃度的中位數（5．90 ng/mL）將所有患者分為兩組，每組各51例。在高濃度PTX3組中，僅LDL-C和LOX-1的水平均較低濃度PTX3組高，差異具有統計學意義。此外，值得關注的是他汀類藥物在PTX3高濃度組中的使用率明顯低于PTX3低濃度組，差異具有統計學意義（表3）。

2．3 多因素回歸分析結果 采用多因素Logistic回歸分析研究頸動脈狹窄的獨立危險因素。PTX3、LDL-C和LOX-1水平升高均是頸動脈狹窄發(fā)生的獨立危險因素（表4）。

3 討論

目前PTX3究竟是動脈粥樣硬化性疾病的保護因子還是危險因素尚存爭議，本研究發(fā)現頸動脈狹窄組PTX3、LOX-1和LDL-C水平高于無頸動脈狹窄組；在頸動脈狹窄組中，重度狹窄組PTX3、LOX-1和LDL-C水平也高于輕度狹窄組。隨著頸動脈狹窄程度的加重和受累血管的增加，PTX3的濃度增高。PTX3、LDL-C和LOX-1水平升高都是頸動脈狹窄發(fā)生的獨立危險因素。

既往的研究發(fā)現PTX3是冠心病的炎癥標志物[7-8]，在腦血管病中，PTX3不僅與卒中的嚴重程度相關，而且可能是缺血性卒中預后的獨立標志物[9]。本研究發(fā)現，PTX3與傳統的腦血管病危險因素（吸煙、高血壓、糖尿病、他汀類藥物和高密度脂蛋白）相比，與缺血性卒中患者頸動脈狹窄的發(fā)生和嚴重程度之間的關系更加密切。

本課題組既往研究發(fā)現，小鼠主動脈平滑肌細胞與不同濃度氧化型低密度脂蛋白共孵育后，細胞中PTX3的表達隨著氧化型低密度脂蛋白濃度的增加而升高。在載脂蛋白E基因敲除的小鼠中，PTX3的表達也與主動脈粥樣硬化的程度呈正相關[10]。在本研究中，PTX3、LOX-1和LDL-C的水平均隨著頸動脈狹窄程度的加重而增高，提示PTX3與動脈粥樣硬化脂質代謝可能存在相關性。

PTX3與脂質代謝的關系近年來受到廣泛關注。有研究報道PTX3、LDL-C與冠狀動脈疾病患者的動脈粥樣硬化程度密切相關[11]。嚴重動脈粥樣硬化和高LDL-C患者的血漿中發(fā)現有高濃度的PTX3，使用他汀類藥物治療可以降低血漿PTX3水平[12]。高LDL-C患者的脂肪組織中PTX3 mRNA水平也顯著升高，多元回歸分析顯示二者之間有顯著相關性，表明PTX3參與了LDL-C引發(fā)血管炎癥的機制[13]。本研究發(fā)現，PTX3和LDL-C升高均是頸動脈狹窄的獨立危險因素。LDL-C、PTX3和頸動脈狹窄之間的關系表明炎癥介質與脂質代謝之間可能存在聯系。

LOX-1作為氧化型低密度脂蛋白的特異性受體，在生理條件下幾乎檢測不到，但在暴露于促炎和促動脈粥樣硬化刺激后表達上調。有研究發(fā)現，內皮細胞LOX-1的過度表達有助于動脈粥樣硬化的形成，抑制其表達后，載脂蛋白E基因敲除小鼠的頸總動脈斑塊覆蓋面積明顯減輕[14]。高脂飲食肥胖小鼠脂肪組織中LOX-1的mRNA水平顯著升高，敲除LOX-1基因后，脂肪細胞的單核細胞趨化蛋白-1、巨噬細胞炎癥蛋白-1α、IL-6等促炎因子的表達較野生小鼠明顯下降，提示LOX-1所致的動脈粥樣硬化病變形成加速與炎癥反應增加有關[15]。

表2 頸動脈不同狹窄程度之間的比較結果

表3 不同濃度PTX3患者的比較結果

表4 頸動脈狹窄的獨立危險因素分析

本研究尚存在一些局限性。如果能增加納入的患者數量，同時對入組病例進行長期隨訪，則研究結果的可信度能進一步提高。盡管本研究提示PTX3與LOX-1均可促進動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展，但是目前有關PTX3和LOX-1在動脈粥樣硬化中的協同機制還未見報道，需要進一步的細胞學和動物學實驗來證實。

【點睛】炎癥介質與脂質代謝之間可能存在聯系，PTX3、LDL-C和LOX-1水平升高是頸動脈狹窄發(fā)生的獨立危險因素。