甘玉晶

摘要? ? 本文采用QuEChERS方法凈化，建立了氣相色譜法/電子捕獲檢測器（GC/ECD）檢測平菇中蟲螨腈殘留的分析方法。樣品用乙腈提取，提取液經(jīng)含50 mg PSA、50 mg C18EC、50 mg GCB、150 mg MgSO4的2 mL凈化管凈化，GC/ECD檢測，標準溶液外標法定量。蟲螨腈在0.01～0.50 μg/mL范圍內(nèi)，線性關系良好，相關系數(shù)為0.999 32，方法檢出限為0.001 mg/kg，方法定量限為0.003 mg/kg。0.02、0.05、0.10、0.20 mg/kg 4個含量水平的添標回收率在88.5%～105.4%之間，相對標準偏差（RSD）在3.11%～5.22%之間，本方法簡便、快速、準確，能夠滿足平菇中蟲螨腈殘留檢測的需要。采用該方法測定了蟲螨腈在平菇中的殘留量，結果滿意。

關鍵詞? ? QuEChERS;GC/ECD;平菇;蟲螨腈

蟲螨腈（Chlorfenapyr，CAS號122453-73-0），又名溴蟲腈，分子式C15H11BrClF3N2O，分子量437.2，是新型吡咯類殺蟲殺螨劑，具有觸殺、胃毒作用，同時有一定的內(nèi)吸作用。蟲螨腈具有殺蟲譜廣、防效高及持效長的特點，被廣泛應用于蔬菜、茶葉、水果、食用菌等農(nóng)產(chǎn)品上。

蟲螨腈持效長，在農(nóng)產(chǎn)品中的半衰期較長，容易造成殘留，危害農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全，在《食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2019）中規(guī)定了蔬菜、水果、茶葉中的最大殘留限量[1]，因而開展農(nóng)產(chǎn)品中蟲螨腈殘留檢測研究具有重要意義。目前，蟲螨腈殘留的檢測方法主要有氣相色譜法[2-5]、高效液相色譜法[6-9]、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法[10-14]等。

食用菌含有豐富的蛋白質(zhì)和氨基酸，是一類有機、營養(yǎng)、保健的綠色食品。平菇作為食用菌中的主要種植品種，物美價廉，口感好，深受人們的喜愛。由于平菇生產(chǎn)中采收期較長，單朵菇生長快，生長分散不集中，在栽培生產(chǎn)過程中易受病蟲害危害，需使用農(nóng)藥進行病蟲害防治。這樣以來，容易造成農(nóng)藥殘留?；赒uEChERS-氣相色譜法測定平菇中蟲螨腈殘留方法的研究未見報道。本文研究建立QuEChERS測定平菇中蟲螨腈殘留的方法，該方法操作簡單、快速、準確可靠、靈敏度高、實用性強，可為控制平菇中蟲螨腈的殘留危害和保護人民食品安全提供可靠的檢測手段。

1? ? 材料與方法

1.1? ? 試驗材料

1.1.1? ? 供試樣品。供試樣品為平菇，購自廈門市農(nóng)貿(mào)市場。

1.1.2? ? 主要儀器設備。Agilent 7890A氣相色譜儀帶微池電子捕獲檢測器（μECD）及工作站（美國Agilent公司），HITACHI CF16RXⅡ離心機（日本日立公司），ZZDCH16水浴氮吹儀（廣州智真公司），VORTEX GENIUS 3渦旋混合器（德國IKA公司），SCDEALL VX-Ⅲ多管渦旋振蕩器，PL602-S電子天平（梅特勒-托利多公司）。

1.1.3? ? 試劑、材料。QuEChERS萃取鹽包（Part No.5982-7555，內(nèi)含1.5 g NaCl、6.0 g MgSO4，美國Agilent公司）;QuEChERS凈化管A（Part No.5982-5122CH，2 mL，內(nèi)含50 mg PSA、50 mg C18EC、50 mg GCB、150 mg MgSO4）;QuEChERS凈化管B（Part No.5982-5421CH，2 mL，內(nèi)含50 mg PSA、50 mg C18EC、150 mg MgSO4）;乙腈、丙酮、正己烷、甲醇，均為色譜純試劑，美國TEDIA公司生產(chǎn);氯化鈉，為優(yōu)級純上海國藥集團化學試劑有限公司生產(chǎn)。

1.1.4? ? 農(nóng)藥標準溶液。蟲螨腈農(nóng)藥標準溶液，購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所（天津），質(zhì)量濃度為1 000.0 mg/L。首先以丙酮+正已烷（10+90）配制成100.0 mg/L的標準溶液儲備液，再用丙酮+正已烷（10+90）將標準儲備液稀釋分別配制成濃度為0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 μg/mL系列標準溶液。

1.2? ? 試驗方法

1.2.1? ? 樣品制備。平菇樣品取樣按《食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2019）附錄A[1]執(zhí)行，將整朵菇切碎，放入組織搗碎機攪碎充分混勻，制成待測樣，裝入潔凈密封的塑料袋中備用。

1.2.2? ? 提取。準確稱取待測樣10.00 g（精確到0.01 g）于50 mL塑料離心管中，加入10.0 mL乙腈，在渦旋混合器上渦旋振蕩2 min后，再加入2 g萃取鹽包，混勻后在多管渦旋振蕩器劇烈振蕩2 min，以9 000 r/min離心5 min，取出上清液待凈化。

1.2.3? ? 凈化。準確吸取1.0 mL上清液至凈化管，充分混勻，在多管渦旋振蕩器劇烈振蕩5 min，以15 000 r/min離心5 min，準確吸取0.5 mL上清液至10 mL試管中，50 ℃水浴中氮氣吹至近干，準確加入0.5 mL丙酮+正已烷（10+90）復溶，待測。

1.3? ? 氣相色譜條件

色譜柱：Agilent DB-1MS，30.0 mm×250 μm×0.25 μm;進樣口溫度為240 ℃，微池電子捕獲檢測器（μECD）溫度為320 ℃。柱溫為程序升溫，初始溫度80 ℃，保持1.0 min，以15 ℃/min的升溫速率升到230 ℃，保持1.0 min，再以40 ℃/min的升溫速率升到270 ℃，保持2 min。氣體及流量：載氣為高純氮氣（純度>99.999%），恒流模式，流速1.0 mL/min，檢測器尾吹氣氣體為高純度的氮氣，流速60.0 mL/min。進樣方式為不分流進樣，進樣口隔墊吹掃流量3.0 mL/min，0.75 min打開吹掃，吹掃流量60.0 mL/min，進樣量1.0 μL。自動進樣器洗針：進樣前依次用正己烷、樣品洗進樣針3次，進樣后再用丙酮洗進樣針3次。

2? ? 結果與分析

2.1? ? 色譜條件優(yōu)化建立

配制蟲螨腈標準溶液進行上機分析，多次優(yōu)化進樣口溫度、檢測器溫度、柱溫的升溫程序及氣體流量等儀器參數(shù)，使蟲螨腈能夠得到較好的峰型和最好的響應強度，同時縮短分析時間。優(yōu)化色譜條件后得到的蟲螨腈標準溶液（0.1 μg/mL）色譜圖，如圖1（a）所示。

2.2? ? 前處理方法優(yōu)化

本試驗分別采用乙腈、乙酸乙酯、丙酮作為提取溶劑進行添標回收試驗，結果表明，用乙腈提取該農(nóng)藥的添標回收率優(yōu)于乙酸乙酯、丙酮，因而選擇乙腈作為提取溶劑。同時，本試驗進行了2種凈化管的凈化效果對比試驗，結果表明，2種凈化管的添標回收率均在85%以上，但用凈化管A凈化后的樣品色譜圖雜峰明顯比用凈化管B凈化后的樣品色譜圖雜峰少，凈化效果更好，因而選擇含50 mg GCB的凈化管A作為前處理凈化管。

2.3? ? 定性與定量

由自動進樣器吸取1.0 μL蟲螨腈標準溶液和凈化后的待測樣品溶液注入色譜儀中，以保留時間（RT）定性，測得樣品溶液中未知組分的保留時間分別與標準溶液在同一色譜柱上的保留時間相比較，如果樣品溶液中某組分的保留時間與標準溶液中某一農(nóng)藥的保留時間相差在±0.05 min內(nèi)的可認定為該農(nóng)藥。同時，以色譜柱獲得的樣品溶液峰面積與標準溶液峰面積比較定量?？瞻灼焦交|(zhì)色譜圖和空白平菇基質(zhì)添加0.10 μg/mL蟲螨腈標準溶液色譜圖分別如圖1（b）、（c）所示。

2.4? ? 方法的線性關系及檢出限

在優(yōu)化建立的色譜條件下，對不同質(zhì)量濃度的蟲螨腈標準工作溶液進行測定，每個濃度重復進樣測定3次，以質(zhì)量濃度（X，μg/mL）為橫坐標，以峰面積平均值（Y）為縱坐標，獲得蟲螨腈的標準曲線Y=54 834.176 6X+161.936 32，結果表明，在0.01～0.50 μg/mL范圍內(nèi)，線性良好，相關系數(shù)（r）為0.999 32。以信噪比的3倍計算得出方法的檢出限（LOD）為0.001 mg/kg，以信噪比的10倍計算得出方法的定量限（LOQ）為0.003 mg/kg，在《食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2019）中規(guī)定了蔬菜、水果和茶葉中蟲螨腈的殘留限量，而沒有規(guī)定食用菌中殘留限量，參照其中最低的芥藍最大殘留限量0.1 mg/kg[1]，該方法能夠滿足實際檢測要求。

2.5? ? 方法的回收率與精密度

應用建立的方法在空白平菇樣品分別添加0.02、0.05、0.10、0.20 mg/kg 4個含量水平進行加標回收試驗，每個添加水平重復測定5次，計算平均回收率及精密度，蟲螨腈的添標回收率在88.5%～105.4%之間，相對標準偏差（RSD）在3.11%～5.22%之間，結果表明該方法具有良好的回收率和精密度。

2.6? ? 實際樣品檢測

應用本方法對市售的10份平菇樣品進行檢測，9份樣品未檢出，1份樣品檢出蟲螨腈，濃度為0.0281 mg/kg，色譜圖見圖1（d）。在《食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2019）中規(guī)定了蔬菜、水果和茶葉中蟲螨腈的殘留限量，而沒有規(guī)定食用菌中殘留限量[1]，應引起相關部門的重視。將該樣品應用《食品安全國家標準 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018）[15]進行測定，測定的結果與本方法相一致。結果表明，本方法能應用于市場平菇中蟲螨腈殘留實際檢測。

3? ? 結論與討論

本文通過對平菇中蟲螨腈進行氣相色譜法的測定，結果表明，在0.01～0.50 μg/mL范圍內(nèi)，線性關系良好，相關系數(shù)為0.999 32，方法檢出限為0.001 mg/kg，方法定量限為0.003 mg/kg。在0.02、0.05、0.10、0.20 mg/kg 4個含量水平的添標回收率在88.5%～105.4%之間，相對標準偏差（RSD）在3.11%～5.22%之間，本方法簡便、快速、準確，能滿足實際檢測分析要求。

4? ? 參考文獻

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