鮑幼維，潘小莉，潘澍青，潘婕文，李海波

寧波市婦女兒童醫(yī)院出生缺陷綜合防治重點實驗室，浙江寧波市315012

先天性耳聾是高發(fā)的先天性出生缺陷疾病。我國聽力殘疾人2780 萬，約占殘疾人總數(shù)的33.5%[1]。每年約有3.5 萬例先天性耳聾患兒出生[2-3]，其中遺傳因素約占60%左右[4-7]。中國人群中常見的耳聾基因為GJB2、GJB3、mtDNA 和SLC26A4[1，8]。耳聾基因篩查可以發(fā)現(xiàn)聽力學篩查難以發(fā)現(xiàn)的遲發(fā)型耳聾、藥物敏感性耳聾和漸進性耳聾。

1 對象與方法

1.1 對象

2019 年1 月至9 月在本院出生的新生兒1781 例，其中男性937 例，女性844 例。家長自愿接受耳聾基因篩查，告知風險并簽署知情同意書。

本研究已獲得本院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 方法

新生兒出生后3～7 d，由專業(yè)人員按要求采集足跟血，制成干血片標本，晾干后2～8 ℃冷藏保存。按規(guī)定送至杭州甄元健康科技有限公司進行檢測。

采用Blood DNA mini kit(QIAGEN 公司)提取干血斑中基因組DNA，Qubit dsDNA HS Assay Kit(INVITROGEN 公司)測定濃度，-20 ℃保存。采用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜技術(shù)(MSAGENA BIOSCIENCE 公司)進行檢測，使用配套軟件TYPER 4.0 進行分析。共包括4個耳聾基因，22個突變位點。見表1。

對所有耳聾基因檢測陽性的新生兒建立健康檔案，對其父母進行遺傳咨詢。

1.3 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 18.0 進行描述性分析。計數(shù)資料以構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗。顯著性水平α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 耳聾基因攜帶率

共有104 例檢出耳聾基因突變位點，總突變率5.84% (104/1781)。其中男性突變率6.30% (59/937)，女性突變率5.33% (45/844)，男女間無顯著性差異(χ2=0.752，P=0.386)。

2.2 突變位點

在耳聾基因攜帶者中，各基因突變頻率有非常高度顯著性差異(χ2=87.692，P＜0.001)，兩兩比較，GJB2＞SLC26A4＞GJB3=mtDNA。

GJB2基因突變頻率最高的3 個位點分別為GJB2基因235delC 雜合突變(突變率2.53%)、SLC26A4基因919-2A＞G 雜合突變(突變率0.95%)、GJB2基因299-300delAT 雜合突變(突變率0.56%)。未檢出純合突變和復合雜合突變。見表1。

表1 新生兒耳聾基因篩查情況

3 討論

自王秋菊等[9]提出在新生兒聽力篩查的基礎(chǔ)上增加耳聾基因篩查，國內(nèi)學者對新生兒耳聾基因篩查越來越關(guān)注。耳聾基因篩查可以彌補新生兒聽力篩查的不足，對攜帶耳聾突變位點的高危兒可以早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早干預，從而避免發(fā)病以及因聾致啞；還可以對其父母進行再生育指導，并對攜帶者的婚配、生育進行遺傳咨詢。

由于遺傳性耳聾基因有較高的遺傳異質(zhì)性，不同地區(qū)和人群基因突變位點和突變頻率有一定差異。本研究總突變率為5.84%，與王敏等[10]報道的杭州(5.79%)和楊晶群等[11]報道紹興(5.42%)耳聾基因突變率一致；但是高于全國平均突變水平(4.39%)[12]。

我國約50%遺傳性耳聾由GJB2基因突變所致[13]。GJB2為常染色體隱性遺傳基因[14]，正常人攜帶率2%～3%[15]，主要編碼Cx26 蛋白[16]?；蛲蛔兒螽a(chǎn)生無功能Cx26 蛋白，導致耳蝸毛細胞鉀離子循環(huán)障礙，引起Corti 器鉀中毒，從而引起聽力異常。大部分患兒通過植入人工耳蝸可恢復聽力[17-18]。由于GJB2基因突變引起的聽力下降個體差異大，對于攜帶者要做好定期檢測、隨訪工作[19]。本研究共檢出GJB2基因突變59例，均為雜合突變，突變率高于文獻報道[15，20-21]。

GJB3是由夏家輝等[22]首先克隆的耳聾基因，編碼Cx31 蛋白，與Cx26 蛋白、Cx30 蛋白協(xié)同，維持耳蝸電解質(zhì)內(nèi)穩(wěn)態(tài)；基因突變主要引起高頻感音神經(jīng)性聽力障礙[23]。GJB3基因的雜合突變可以隱性方式存在，也可以表現(xiàn)出聽力受損：患兒出生時往往聽力正常，但是到青壯年時期聽力有不同程度下降[24]。本研究共檢出GJB3基因突變10 例，均為雜合突變，攜帶率較低。

mtDNA 基因突變?yōu)槟赶颠z傳，使用氨基糖苷類抗生素可造成聽力障礙[25]。對攜帶有該基因突變的新生兒要禁用耳毒性藥物。該基因篩查對母系所有親屬也有指導作用。父親也有較低概率(1/5000)將mtDNA基因傳給子代[26]。所以該基因攜帶者如果母親未發(fā)現(xiàn)突變位點，應考慮是否為父親遺傳。本研究共檢出mtDNA基因突變7例，均為雜合突變。

SLC26A4基因的不同突變類型都可引起前庭水管擴大[27]，發(fā)生感音神經(jīng)性聽力障礙，可伴有耳鳴和眩暈。其基因突變頻率僅次于GJB2基因。正常人群攜帶率1%～2%[15，19，28]，在劇烈撞擊、感冒或發(fā)燒等誘因作用下，可引起感音神經(jīng)性聽力障礙[29]。攜帶該基因突變的新生兒要避免外力撞擊，避免“一巴掌至聾”的悲劇發(fā)生。本研究共檢出SLC26A4 基因突變28 例，與文獻報道相一致[19，28，30]，均為雜合突變。

90%～95%耳聾患兒出生在聽力正常家庭中[31]。寧波地區(qū)是耳聾基因突變高發(fā)地區(qū)，新生兒聽力篩查聯(lián)合耳聾基因篩查是目前較為理想的篩查模式。