超聲溫度>超聲功率>超聲時(shí)間;用超聲波輔助提取芒果苷的最優(yōu)組合為:樣品量1.0 g,乙醇用量20 mL,超聲時(shí)間40 min,超聲溫度50 ℃,超聲功率1"/>

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        超聲輔助萃取芒果葉中芒果苷提取條件優(yōu)化

        2020-05-29 09:04:45趙東興李春張建春趙志昆
        南方農(nóng)業(yè)·上旬 2020年4期
        關(guān)鍵詞:單因素試驗(yàn)正交試驗(yàn)

        趙東興 李春 張建春 趙志昆

        摘 ? 要 ? 為優(yōu)化芒果葉中芒果苷的提取條件,以溶劑用量、超聲時(shí)間、超聲溫度和超聲功率為考察因素,采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)提取條件進(jìn)行優(yōu)化;在優(yōu)選出的超聲萃取條件下測(cè)定了6個(gè)品種芒果葉中芒果苷的含量,并與常規(guī)浸漬提取法進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果表明,超聲波輔助提取芒果葉中芒果苷時(shí),影響提取效果大小的順序依次為溶劑用量>超聲溫度>超聲功率>超聲時(shí)間;用超聲波輔助提取芒果苷的最優(yōu)組合為:樣品量1.0 g,乙醇用量20 mL,超聲時(shí)間40 min,超聲溫度50 ℃,超聲功率160 W;超聲萃取法不但縮短了提取時(shí)間,還提高了提取效率,與浸漬提取法相比,超聲萃取提取芒果苷量增加了21.60%~26.69%。

        關(guān)鍵詞 ? ?超聲萃取;芒果葉;芒果苷;單因素試驗(yàn);正交試驗(yàn)

        中圖分類號(hào):R284.2 ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A ? ?DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.10.003

        芒果葉為漆樹科植物芒果(Mangifera indica L.)的樹葉,在我國(guó)主要分布在廣東、廣西、云南、海南、臺(tái)灣等熱帶、亞熱帶地區(qū),具有分布地域廣、價(jià)格低廉、原料易得等優(yōu)點(diǎn)。芒果葉含有抗壞血酸、鞣質(zhì)、芒果苷、黃酮類等物質(zhì),葉提取物能抑制化膿球菌、大腸桿菌,治熱滯腹痛、氣脹、小兒疳積,并洗爛瘡[1]。芒果苷(Mangiferin)又名知母寧(Chinonin),是芒果葉的主要活性成分。目前,對(duì)芒果葉中芒果苷含量的測(cè)定方法主要有高效液相色譜法[2-3]、UPLC-MS/MS[4]、紫外-可見(jiàn)分光光度法[5-6]等,但現(xiàn)有的研究多只涉及檢測(cè)方法,對(duì)其提取條件的研究較少。謝黎崖等用正交試驗(yàn)優(yōu)化了芒果苷的微波提取工藝[7],張青等用響應(yīng)面法優(yōu)化了超聲萃取提取條件[8]。本試驗(yàn)基于超聲萃取法,采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)比較溶劑用量、超聲時(shí)間、超聲溫度和超聲功率對(duì)芒果葉中芒果苷提取量的影響,以期找到提取芒果苷較好的條件。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        芒果葉:采自云南省紅河熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所基地,為金鳳凰、澳芒、臺(tái)農(nóng)1號(hào)、金煌芒、四季芒、景東晚芒6個(gè)品種的成熟葉片。

        儀器:UV1260紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(島津),數(shù)控超聲波清洗器(寧波新芝生物科技股份有限公司),電子分析天平,移液槍(吉爾森),F(xiàn)Z102微型植物粉碎機(jī)(天津市泰斯特儀器有限公司),電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海博訊實(shí)業(yè)有限公司)。

        試劑:芒果苷對(duì)照品(購(gòu)于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心,含量為98%),乙醇為分析純。

        1.2 方法

        1.2.1 芒果苷的測(cè)定

        1)選取無(wú)蟲、無(wú)病害的新鮮葉片,洗凈后置于電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘干后粉碎,備用。

        2)標(biāo)準(zhǔn)品的制備。稱取20 mg芒果苷對(duì)照品,用無(wú)水乙醇溶解并定容至100 mL,得到200 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)液,用移液槍分別準(zhǔn)確移取0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL此液于50 mL容量瓶中,并用無(wú)水乙醇定容,得到濃度為2.0、4.0、8.0、12.0、16.0、20 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)序列。

        3)樣品處理。準(zhǔn)確稱取各品種芒果葉粉末1.0 g于100 mL具塞三角瓶中,加入20 mL無(wú)水乙醇,在溫度為50 ℃、功率為80%的條件下超聲40 min,過(guò)濾,吸取濾液1 mL于50 mL容量瓶中,用無(wú)水乙醇定容,即為樣品待測(cè)液。

        4)最大吸收波長(zhǎng)的確定。取2份不同濃度的芒果苷標(biāo)準(zhǔn)溶液,以無(wú)水乙醇溶液作參比,考察其在200.0~800.0 nm的吸收光譜圖。同時(shí)用澳芒待測(cè)液考察樣品在200.0~800.0 nm的吸收光譜圖。

        1.2.2 單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化芒果苷提取

        以單因素試驗(yàn)優(yōu)化芒果苷的提取條件,并根據(jù)L16(44)正交試驗(yàn)和極差分析考察料液比、超聲時(shí)間、超聲溫度和超聲功率對(duì)芒果苷提取量的影響,正交試驗(yàn)因素水平見(jiàn)表1。

        1.2.3 ?重復(fù)性試驗(yàn)

        以金鳳凰為試驗(yàn)對(duì)象,稱取1.0 g芒果葉5份,按“1.2.1”的方法處理樣品,并在試驗(yàn)條件下測(cè)定其芒果苷含量,通過(guò)計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差考察方法的重復(fù)性。

        1.2.4 ?加標(biāo)回收率試驗(yàn)

        分別稱取1.0 g已知芒果苷含量的樣品于3個(gè)100 mL具塞三角瓶中,分別加入2 mg芒果苷對(duì)照品,按“1.2.1”的方法處理,在試驗(yàn)條件下測(cè)定其芒果苷含量,并計(jì)算回收率,重復(fù)3次。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 芒果苷最大吸收波長(zhǎng)的確定

        以8 μg·mL-1和16 μg·mL-1的芒果苷標(biāo)準(zhǔn)液,在200~800.0 nm進(jìn)行掃描,得到其紫外吸收光譜圖(見(jiàn)圖1)。由圖可見(jiàn),不同濃度芒果苷標(biāo)準(zhǔn)液吸收曲線峰形一致,在200.0~800.0 nm段有3個(gè)吸收峰,分別是276.6 nm、316.8 nm和368.8 nm,考慮到368.8 nm處吸收峰最大且附近沒(méi)有雜峰的影響,試驗(yàn)選取368.8 nm為芒果苷的最大吸收波長(zhǎng)。澳芒樣品的紫外吸收光譜圖見(jiàn)圖2。

        2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

        在波長(zhǎng)368.8 nm下測(cè)定濃度為2.0、4.0、8.0、12.0、16.0、20 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)液吸光值,以濃度為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(見(jiàn)圖3),并擬合得到線性方程:y=0.033x-0.011 5(R2=0.999 1)。表明在濃度為2.0~20 μg·mL-1時(shí),芒果苷標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好,可用于芒果苷的測(cè)定。

        2.3 單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化芒果苷提取

        2.3.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

        單因素試驗(yàn)結(jié)果列于表2。

        2.3.1.1料液比選擇

        稱取1.0 g芒果葉5份,分別加入10、15、20、25、30 mL無(wú)水乙醇,在超聲溫度為50 ℃和70%超聲功率下提取30 min,結(jié)果表明,乙醇用量為20 mL和25 mL時(shí)芒果苷提取量基本一致,達(dá)到最大,之后增加乙醇用量芒果苷提取量略有下降。原因可能是芒果葉粉末中的芒果苷多數(shù)已溶解在溶劑中,增加溶劑用量不但沒(méi)有提高芒果苷的溶出量還浪費(fèi)了溶劑,因此試驗(yàn)選擇乙醇用量為20 mL。

        2.3.1.2超聲時(shí)間選擇

        稱取1.0 g芒果葉5份,加入20 mL無(wú)水乙醇,在超聲溫度為50 ℃和70%超聲功率下提取20、30、40、50、60 min,結(jié)果表明,芒果苷提取量在超聲時(shí)間為20~40 min時(shí)上升明顯,超聲時(shí)間為40 min時(shí)和50 min時(shí)的提取量最大。單從超聲時(shí)間考慮,試驗(yàn)選取時(shí)間為40 min。

        2.3.1.3超聲溫度選擇

        稱取1.0 g芒果葉4份,加入20 mL無(wú)水乙醇,在超聲功率為70%,超聲溫度分別為30、40、50、60 ℃條件下超聲萃取40 min,結(jié)果表明,超聲溫度在30~50 ℃時(shí)隨著溫度上升,芒果苷提取量增加明顯,在50 ℃時(shí)芒果苷提取量最大,在60 ℃時(shí)芒果苷提取量略有減少。這可能是溫度過(guò)高破壞了芒果苷的穩(wěn)定性,使芒果苷性質(zhì)發(fā)生改變,導(dǎo)致芒果苷提取量減少,因此試驗(yàn)選擇超聲溫度為50 ℃。

        2.3.1.4超聲功率選擇

        稱取1.0 g芒果葉5份,加入20 mL無(wú)水乙醇,在超聲溫度為50 ℃,超聲功率分別為50%、60%、70%、80%、90%的條件下超聲萃取40 min,結(jié)果表明,超聲功率在50%~80%時(shí)隨著功率上升,芒果苷提取量增加明顯,在90%時(shí)芒果苷提取量減少,因此試驗(yàn)選擇超聲功率為80%。

        2.3.2 正交試驗(yàn)結(jié)果

        采用正交試驗(yàn)考察了溶劑用量(A)、超聲溫度(B)、超聲時(shí)間(C)、超聲功率(D)這4個(gè)因素對(duì)芒果苷提取率的影響,結(jié)果見(jiàn)表3。

        從表中可以看出,極差RA>RC>RD>RB,所以在用無(wú)水乙醇做提取劑,超聲波輔助提取芒果葉中芒果苷時(shí),影響提取效果大小的順序依次為溶劑用量>超聲溫度>超聲功率>超聲時(shí)間。

        由表中K值可以看出,A因素3水平、B因素3水平、C因素3水平、D因素3水平K值最大,因此,超聲波輔助提取芒果苷的最優(yōu)組合為A3B3C3D3,即乙醇用量20 mL、超聲時(shí)間40 min、超聲溫度50 ℃、超聲功率80%。

        2.4 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

        在368.8 nm波長(zhǎng)處測(cè)定5個(gè)樣品中芒果苷含量,結(jié)果分別為26.25、26.54、25.37、26.89、27.12 mg·g-1,平均值為26.43 mg·g-1,并計(jì)算出RSD%為2.30%,說(shuō)明方法的重復(fù)性較好。

        2.5 加標(biāo)回收率試驗(yàn)結(jié)果

        從表4可知,方法的加標(biāo)回收率在92.80%~103.72%,說(shuō)明該法回收率較高,可用于芒果葉中芒果苷含量的測(cè)定。

        2.6 芒果葉中芒果苷含量測(cè)定

        從表5中可以看出,不同品種芒果葉中芒果苷含量不同,超聲萃取6個(gè)品種葉中的芒果苷含量在26.63~37.23 mg·g-1,其中金煌芒芒果苷含量最高,為37.23 mg·g-1,金鳳凰芒果苷含量最低,為26.63 mg·g-1。與浸漬提取法相比,超聲萃取法提取芒果苷含量高出21.60%~26.69%。

        3 小結(jié)與討論

        本試驗(yàn)采用超聲萃取法,通過(guò)在200.0~800.0 nm進(jìn)行掃描,確定出368.8 nm為芒果葉中芒果苷的測(cè)定波長(zhǎng),芒果苷樣品在該波長(zhǎng)附近的波形一致,無(wú)干擾雜峰。該結(jié)果與謝宇奇等[5]和謝梅冬等[6]選取的測(cè)定波長(zhǎng)(分別為258.5 nm和319.0 nm)有差異,具體原因有待進(jìn)一步研究分析。試驗(yàn)以368.8 nm為測(cè)定波長(zhǎng),在濃度為2.0~20 μg·mL-1,芒果苷標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好;RSD%為2.30%,加標(biāo)回收率在95.20%~102.18%,說(shuō)明方法的重復(fù)性和回收率較高,可用于芒果葉中芒果苷含量的測(cè)定。

        本試驗(yàn)以單因素試驗(yàn),分別研究了溶劑用量、超聲溫度、超聲功率和超聲時(shí)間對(duì)芒果苷提取量的影響,結(jié)果表明,當(dāng)乙醇用量為20~25 mL、超聲時(shí)間為40~50 min、超聲溫度為50 ℃、超聲功率為80%時(shí)芒果苷提取量最大。為進(jìn)一步驗(yàn)證試驗(yàn)組合的可靠性和合理性,采用L16(44)正交試驗(yàn),優(yōu)化超聲波提取芒果葉中芒果苷的提取條件,結(jié)果表明,在用無(wú)水乙醇做提取劑,超聲波輔助提取芒果葉中芒果苷時(shí),影響提取效果大小的順序依次為溶劑用量>超聲溫度>超聲功率>超聲時(shí)間,用超聲波輔助提取芒果苷的最優(yōu)組合為A3B3C3D3,即乙醇用量20 mL、超聲時(shí)間40 min、超聲溫度50 ℃、超聲功率80%。超聲萃取法不但縮短了提取時(shí)間,還提高了提取效率,與浸漬提取法相比,超聲萃取提取芒果苷量增加了21.60%~26.69%。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(上冊(cè))[M].上海:上海人民出版社,1977:1040.

        [2] 郭伶伶,張祎,劉二偉,等.芒果葉中芒果苷含量的測(cè)定[J].天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2013,32(1):43-45.

        [3] 韋會(huì)平,趙牧,田金鳳,等.四川攀西干熱河谷區(qū)芒果葉中芒果苷含量變化規(guī)律研究[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2016,47(12):2134-2138.

        [4] 熊耀坤,劉霞,萬(wàn)彥婷,等.UPLC-ESI/MS測(cè)定藏藥藏茵陳膠囊中5種活性成分的含量[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索,2017,36(12):40-42.

        [5] 謝宇奇,林翠梧,賴清華,等.紫外-可見(jiàn)吸收光譜法測(cè)定芒果葉中的芒果苷和葉綠素[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2014,45(3):463-468.

        [6] 謝梅冬,鄒步珍,鄒煜,等.紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定芒果葉葉提取物中芒果苷的含量[J].廣西農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,41(9):968-970.

        [7] 謝黎崖,任寬,黃鑫.正交設(shè)計(jì)優(yōu)選芒果苷的微波提取工藝[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志,2010,30(15):1331-1333.

        [8] 張青,王志祥,宋立丹,等.響應(yīng)曲面法優(yōu)化超聲萃取芒果葉中芒果苷的工藝研究[J].西北藥學(xué)雜志,2014,29(3):237-241.

        (責(zé)任編輯:丁志祥)

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