李淑平 張偉 張煥春 王新語 李晶,2

（1山東省煙臺市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，煙臺 265500；2煙臺大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，煙臺264005)

櫻桃根頸腐爛病是櫻桃生產(chǎn)中的一種重要的病害，輕者造成樹體衰弱，果實品質(zhì)下降，重者可造成大樹整株死亡。煙臺市農(nóng)科院大櫻桃研究所分離鑒定出撕裂蠟孔菌可引起根頸腐爛。本實驗利用90%磷酸鋁WP、80%大生M-45WP、80%多菌靈 WP、430 g/L 戊唑醇 SC、21%過氧乙酸水劑和2.12%腐殖酸銅對大櫻桃根頸腐爛病菌進(jìn)行了室內(nèi)毒力測定，以期明確其離體活性，為田間防治提供可靠的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

90%磷酸鋁WP（四川諾富爾作物科技有限公司），80%大生M-45WP（陶氏益農(nóng)中國有限公司），80%多菌靈WP（江蘇三山農(nóng)藥有限公司），430 g/L戊唑醇SC （德國拜耳公司），21%過氧乙酸水劑 （石家莊寶豐化工有限公司），2.12%腐殖酸銅 （山西省陽泉市曙光化工有限責(zé)任公司）。

1.2 供試菌株

大櫻桃根頸腐爛病菌Ceriporia lacerata為大櫻桃研究所研究人員自田間病株上分離純化獲得，冰箱內(nèi)4℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 試驗方法

采用菌體生長速率法和平板對峙培養(yǎng)法。

1.3.1 梯度濃度的設(shè)定 將90%磷酸鋁WP、80%大生 M-45WP、80%多菌靈 WP、430 g/L戊唑醇SC預(yù)溶于滅菌水中配成1 000 μg/mL母液備用；將90%磷酸鋁WP分設(shè)成不同梯度濃度，分別為 200 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、12.5 μg/mL；80%大生M-45WP 分設(shè)成不同梯度濃度，分別為 400 μg/mL、100 μg/mL、25 μg/mL、6.25 μg/mL、1.562 5 μg/mL；80%多菌靈WP分設(shè)成不同梯度濃度，分別為100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、12.5 μg/mL、6.25 μg/mL；430 g/L戊唑醇SC分設(shè)成不同梯度濃度，分別為0.125 μg/mL、0.031 25 μg/mL、0.007 812 5 μg/mL、0.001 953 125 μg/mL、0.000 488 281 μg/mL。 21%過氧乙酸水劑1倍和2.12%腐殖酸銅原液。

1.3.2 含藥平板的制備 根據(jù)上述濃度，按2倍和4倍稀釋法將藥劑加入到定量熔化的PDA培養(yǎng)基中，制成含藥平板，以不含藥平板為對照，每濃度重復(fù)3次。

1.3.3 接菌培養(yǎng) 用直徑0.6 cm打孔器沿培養(yǎng)好的菌落邊緣切下菌盤，用消毒接種針將菌盤反轉(zhuǎn)移植到平板上，置于25℃條件下恒溫培養(yǎng)4 d后，檢查結(jié)果。

1.3.4 結(jié)果檢查 以直尺交叉測量法測定菌盤擴(kuò)展直徑，與不施藥對照菌盤擴(kuò)展直徑相比，求出藥劑抑制生長率。

1.3.5 統(tǒng)計分析 將各處理濃度的抑制生長率轉(zhuǎn)換成機率值，濃度轉(zhuǎn)成對數(shù)值。利用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)分別計算出90%磷酸鋁WP、80%大生M-45WP、80%多菌靈WP、430 g/L戊唑醇SC的毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)（r）、EC50和EC95值。

2 試驗結(jié)果

表1結(jié)果表明，90%磷酸鋁WP對大櫻桃根頸腐爛病菌菌絲生長具有一定的抑制作用，其200 μg/mL（4 500倍）實測抑制生長率達(dá)65%以上；最小二乘法統(tǒng)計結(jié)果表明，90%磷酸鋁WP對大櫻桃根頸腐爛病菌毒力回歸方程為y=3.732 5+0.729 0x，EC50 和 EC95 值分別為54.7915μg·mL （約16000倍）、9889.8548μg·mL（約 90 倍）。

表1 90%磷酸鋁WP對大櫻桃根頸腐爛病原菌菌絲生長毒力

表2結(jié)果表明，80%大生M-45WP對大櫻桃根頸腐爛病菌菌絲生長具有一定的抑制作用，其 400.0 μg/mL（2 000 倍）實測抑制生長率達(dá)67%以上；最小二乘法統(tǒng)計結(jié)果表明，80%大生M-45WP對大櫻桃根頸腐爛病菌毒力回歸方程為 y=3.239 2+0.935 1x，EC50和 EC95值分別為 76.384 1 μg/mL（約 106 00 倍）、4 386.920 7 μg/mL（約 180 倍）。

表2 80%大生M-45WP對大櫻桃根頸腐爛病原菌菌絲生長毒力

表3結(jié)果表明，80%多菌靈WP對大櫻桃根頸腐爛病菌菌絲生長具有顯著的抑制作用，其 100.0 μg/mL（8 000倍）實測抑制生長率達(dá)97%以上；最小二乘法統(tǒng)計結(jié)果表明，80%大生M-45WP對大櫻桃根頸腐爛病菌毒力回歸方程為 y=3.202 8+1.853 9x，EC50和 EC95值分別為 9.318 5 μg/mL（約 80 000 倍）、71.900 9 μg/mL（約 11 000 倍）。

表3 80%多菌靈WP對大櫻桃根頸腐爛病原菌菌絲生長毒力

表4結(jié)果表明，430 g/L戊唑醇SC對大櫻桃根頸腐爛病菌菌絲生長具有極顯著的抑制作用，其 0.125 μg/mL（3 440 000 倍）實測抑制生長率達(dá)97%以上；最小二乘法統(tǒng)計結(jié)果表明，430 g/L戊唑醇SC對大櫻桃根頸腐爛病菌毒力回歸方程為 y=7.672 9+1.163 4 x，EC50和EC95值分別為0.005 0 μg/mL （約430 000 000倍）、0.130 7 μg/mL(約 6 950 000 倍）。

表4 430 g/L戊唑醇SC對大櫻桃根頸腐爛病原菌菌絲生長毒力

表5 21%過氧乙酸和2.12%腐殖酸銅對大櫻桃根頸腐爛病原菌菌絲抑菌試驗

表5結(jié)果表明，21%過氧乙酸水劑2倍和2.12%腐殖酸銅1倍對大櫻桃根頸腐爛病菌菌絲生長沒有抑制效果。

3 小結(jié)

430 g/L戊唑醇SC、80%多菌靈WP對大櫻桃根頸腐爛病菌菌絲生長具有很高的離體抗菌活性，90%磷酸鋁WP和80%大生M-45WP對大櫻桃根頸腐爛病菌菌絲生長具有一定的離體抗菌活性，21%過氧乙酸水劑和2.12%腐殖酸銅對大櫻桃根頸腐爛病菌菌絲生長沒有抑制作用。