孫永杰

骨髓增生異常綜合征（MDS）為臨床克隆性造血干細(xì)胞疾病，其特征為髓系細(xì)胞一系或多系病態(tài)造血或無效造血、血細(xì)胞減少以及高風(fēng)險(xiǎn)向白血病轉(zhuǎn)化［1］。該病是臨床常見血液系統(tǒng)疾病，好發(fā)于老年群體，病因尚不清晰，部分人群因長期接觸電離輻射、強(qiáng)電磁場、有機(jī)溶劑等導(dǎo)致 MDS［2］。 MDS 患者的臨床表現(xiàn)主要取決于血細(xì)胞異常，通常以貧血為臨床征象，但不少其他疾病如巨幼細(xì)胞貧血（MA）、再生障礙性貧血（AA）、溶血性貧血等均患有相似征象。血清胸苷激酶1（TK1）與細(xì)胞增殖密切相關(guān)，其濃度可反映正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的增殖特性［3-4］。乳酸脫氫酶（LDH）為造血細(xì)胞中的重要糖酵解酶，正常人群機(jī)體內(nèi)僅含有少量的LDH，當(dāng)人體細(xì)胞受到破壞時(shí)，LDH含量增加，臨床可見于急性心肌梗、急性白血病、惡性腫瘤、溶血性貧血等疾病中［5］。該研究選取MDS患者52例和AA患者60例，旨在探討TK1對骨髓增生異常綜合征的診斷與鑒別價(jià)值。現(xiàn)內(nèi)容報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料通過倫理委員會(huì)審批，選取2018年2月—2019年7月筆者所在醫(yī)院收治的MDS患者52例（MSD組）、再生障礙性貧血（AA）患者 60例（MA組）。其MDS組中男42例，女10例；年齡18～72 歲，平均（43.21±4.52）歲；MDS 分型：難治性貧血 （RA）19例，難治性貧血伴多系統(tǒng)病態(tài)造血（RCDM）10例，難治性貧血伴原始細(xì)胞增多-1（RAEB-1）12例，難治性貧血伴原始細(xì)胞增多-2（RAEB-2）11例。AA組中男32例，女28例；年齡18～70 歲，平均（43.12±4.34）歲。對比兩組性別、年齡資料，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可對比分析。

1.2 MDS診斷標(biāo)準(zhǔn)參照 《骨髓增生異常綜合征（MDS）最低診斷標(biāo)準(zhǔn)》［6］。 （1）必要條件（兩者均滿足）：一系或多系血細(xì)胞如紅細(xì)胞、粒細(xì)胞、血小板，持續(xù)減少至少4月或存在原始細(xì)胞增多及MDS相關(guān)的細(xì)胞遺傳學(xué)異常，可直接診斷；排除其他類似血液病。（2）主要標(biāo)準(zhǔn)：一系或多系如紅細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞，骨髓細(xì)胞≥10%發(fā)育異常，環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞≥15%突變或環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞≥5%伴SF3B1突變；骨髓涂片顯示骨髓原始細(xì)胞5%～19%或外周血涂片原始細(xì)胞2%-19%，排除存在急性白血病特異性基因重排；典型染色體異常。（3）輔助標(biāo)準(zhǔn)：骨髓病理/和免疫組化支持MDS，如幼稚前體細(xì)胞異常定位 （ALIP）、CD34原始細(xì)胞成簇分布和采用免疫組化方法監(jiān)檢測微小巨核細(xì)胞≥10%發(fā)育異常；骨髓細(xì)胞免疫表型存在多個(gè)MDS相關(guān)異常，支持單克隆髓系細(xì)胞；分子學(xué)方法（測序）發(fā)現(xiàn)髓系細(xì)胞存在MDS相關(guān)突變，支持克隆造血。

1.3入選標(biāo)準(zhǔn)（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①貧血患者在檢查前均未經(jīng)過輸血或服用影響造血功能藥物；②MDS患者經(jīng)骨髓活檢病理和骨髓涂片檢查確診；③所有患者對研究知情同意，配合研究內(nèi)容。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并臟器功能障礙或感染者；②合并其他惡性腫瘤者；③存在精神疾病或認(rèn)知障礙者。

1.4方法采集兩組患者清晨空腹靜脈血4 ml，靜置30 min后于3000 r/min離心處理5 min，取上層清液備用。采用酶免疫點(diǎn)印跡化學(xué)發(fā)光法，并利用LAS4000型化學(xué)發(fā)光成像分析儀（美國GE公司）檢測胸苷激酶1（TK1）水平。采用ARCHITECT i2000型自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫檢測儀（美國雅培公司）檢測血清乳酸脫氫酶（LDH）水平。

1.5觀察指標(biāo)對比兩組患者TK1、LDH水平，并以骨髓活檢病理結(jié)果為“金標(biāo)準(zhǔn)”判斷血清TK1與LDH 檢測 MDS 的診斷價(jià)值。TK1 參考值［7］：＜2 pmol/L為陰性，＞2 pmol/L為陽性；LDH正常值為109～245 U/L。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 20.0分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以（x±s）表示，組間用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)用配對樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組TK1和LDH水平比較MDS組血清TK1、LDH水平高于AA組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表 1。

表1 兩組TK1和 LDH水平對比（x±s，mmol/L）

2.2 TK1與LDH診斷結(jié)果TK1診斷MDS 49例，AA50例，與骨髓活檢病理結(jié)果相符率為88.39%；LDH診斷MDS 42例，AA37例，與骨髓活檢病理結(jié)果相符率為70.54%；組間對比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表 2。

2.3 TK1和LDH的診斷價(jià)值TK1診斷靈敏度為94.23%，特異度為83.33%；LDH診斷靈敏度為80.77%，特異度為61.67%；組間對比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表 3。

表2 TK1、LDH的診斷結(jié)果對比（例）

表3 TK1和LDH的診斷價(jià)值對比［%（n/n）］

3 討論

MDS和AA均屬于骨髓衰竭性疾病，患者臨床表現(xiàn)缺乏特異性，一般均患有長期貧血癥狀，藥物治療不明顯，其1～2系血細(xì)胞或3系血細(xì)胞減少，網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)降低，使其鑒別診斷具有一定難度［8］。

LDH在正常人體中含量較低，當(dāng)機(jī)體細(xì)胞遭受破壞時(shí)可迅速增高。有研究報(bào)道，LDH有助于診斷和鑒別診斷貧血性疾病，MDS主要是因基因突變、酶蛋白基因表達(dá)紊亂引發(fā)血細(xì)胞生化代謝改變，從而引起幼紅細(xì)胞原位溶血、骨髓病態(tài)造血，導(dǎo)致患者生存周期縮短，血清LDH濃度升高［9］。而AA患者主要是因造血干細(xì)胞或微環(huán)境受損，體內(nèi)紅髓被脂肪髓所代替，造成全血細(xì)胞減少，與MDS發(fā)病機(jī)制完全不同，血清LDH濃度與正常人群無明顯差異，因此，血清LDH可作為鑒別診斷貧血性疾病的指標(biāo)之一。胸腺嘧啶核苷激酶（TK）主要分為2種不同的TK同工酶：TK1、TK2，其中TK1主要在人體增殖細(xì)胞中出現(xiàn)，如骨髓、脾臟、胸前積液以及脂肪組織等，主要由細(xì)胞質(zhì)表達(dá)，其濃度可表現(xiàn)細(xì)胞的增殖狀態(tài)，同時(shí)TK1與細(xì)胞內(nèi)DNA的作用機(jī)制有關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，TK1作為異常增殖動(dòng)力學(xué)標(biāo)志物，在惡性腫瘤患者體內(nèi)的濃度是健康者的2倍，其陽性表達(dá)與消化道腫瘤與肺癌細(xì)胞增殖能力以及惡性淋巴瘤對化療不敏感有關(guān)［10］。隨著惡性腫瘤中DNA的合成，腫瘤細(xì)胞大量分化、增殖，導(dǎo)致TK1水平也隨之增高，因此可將TK1作為監(jiān)測腫瘤疾病的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后的重要指標(biāo)。同時(shí)相關(guān)研究表明，腫瘤患者血清TK1濃度隨著患者病情的緩解而降低，故可將其作為腫瘤患者臨床療效的監(jiān)視指標(biāo)［11］。近期研究發(fā)現(xiàn)，在血液系統(tǒng)惡性腫瘤中，血清TK1濃度檢測可作為判斷淋巴瘤和白血病的預(yù)后因子，MDS為造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病，患有該疾病的患者的骨髓和其他造血組織大量惡性增生骨髓造血干細(xì)胞，導(dǎo)致TK1濃度升高，因此可將血清TK1用于MDS的鑒別診斷［12］。該研究發(fā)現(xiàn)，血清TK1檢測在MDS診斷中的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度均高于LDH，表明血清TK1在MDS中診斷價(jià)值比血清LDH更高，可將血清TK1作為鑒別診斷MDS的重要觀察指標(biāo)，與LDH聯(lián)合用共同鑒別診斷貧血性疾病。

綜上所述，MDS患者血清TK1濃度較高，相較于LDH鑒別診斷其靈敏度和特異度更高，可作為MDS的篩選、輔助診斷以及疾病進(jìn)展的監(jiān)測，與LDH聯(lián)合用共同鑒別診斷貧血性疾病。