喬 謙 ，王 雪 ，王江勇 *，陶吉寒

（1.山東省果樹研究所，山東 泰安 271000；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院，山東 泰安 271018）

鐵線蓮 （Clematisflorida） 為毛茛科（Ranunculacrae）鐵線蓮屬（Clematis）植物，多為木質(zhì)藤本，自然花期在6-9月[1]，其花朵碩大、花色鮮艷、花型豐富、花期長(zhǎng)，享有“攀援植物皇后”的美稱，是優(yōu)秀的墻體綠化材料，廣泛應(yīng)用于園林與園藝中[2-4]。歐美等國(guó)家的造園師十分癡迷于鐵線蓮，在庭院美化綠化中必用鐵線蓮，正所謂“無(wú)鐵不成園”[2,5,6]，也帶動(dòng)了國(guó)外鐵線蓮屬植物育種研究工作。目前，國(guó)內(nèi)觀賞用鐵線蓮品種多由日本、歐美等國(guó)引進(jìn)而來(lái)，國(guó)內(nèi)自主培育品種較少，這與我國(guó)豐富的鐵線蓮屬資源不符[1,7,8]。因此，本文以筆者近年鐵線蓮雜交育種經(jīng)驗(yàn)，闡述鐵線蓮人工雜交技術(shù)，并分享部分品種的觀賞特性，希望能夠?yàn)槲覈?guó)鐵線蓮育種工作者提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

以課題組引入的20個(gè)鐵線蓮品種為試材，選取其中能夠結(jié)實(shí)的9個(gè)品種作為雜交親本，試驗(yàn)地點(diǎn)位于山東省果樹研究所金牛山基地。

1.2 人工雜交

（1）親本選配 鐵線蓮品種有單瓣、重瓣、半重瓣等類型，在雜交授粉前要合理選配親本，父本多為能夠自然散粉的單瓣品種，母本要具備結(jié)實(shí)性。

（2）去雄 鐵線蓮屬自交親和性花卉，在雜交前必須對(duì)母本去雄，一般在花朵蓬松未開時(shí)進(jìn)行，如圖1右側(cè)花蕾狀態(tài)，采用消毒的刀片將萼片與雄蕊一同切除，雄蕊盡可能去除干凈，切忌傷到柱頭與子房（圖1左）。

（3）隔離 去雄后為防止鐵線蓮天然雜交，要及時(shí)對(duì)雌蕊進(jìn)行隔離。由于鐵線蓮花枝柔軟易折斷，去雄后采用輕薄的錫箔紙代替牛皮紙袋對(duì)花柱進(jìn)行套袋，注意留足空隙，不要壓彎柱頭（圖2），掛上標(biāo)簽注明去雄時(shí)間。

（4）花粉采集 選取已開放2-3d的花朵，此時(shí)花粉新鮮、粘性高；用干凈的毛筆將花粉掃到培養(yǎng)皿中，標(biāo)記好品種名稱和采粉時(shí)間，注意每采一個(gè)品種要及時(shí)更換毛筆防止花粉污染；花粉一般隨采隨用。

（5）授粉 授粉時(shí)間為去雄1-2d，此時(shí)雌蕊柱頭分泌粘液，外觀濕潤(rùn)發(fā)亮；采用毛筆或棉簽將花粉輕而均勻的涂抹到已去雄花柱柱頭，注意授粉毛筆要專筆專用；授粉完畢再用錫箔紙包好，標(biāo)簽注明父母本、授粉時(shí)間。

（6）去袋與采收 授粉7d后及時(shí)去除錫箔紙，并持續(xù)觀察果實(shí)發(fā)育與成熟情況。一般2到3個(gè)月蒴果由綠變?yōu)辄S褐色時(shí)即成熟，此時(shí)按照不同雜交組合分別進(jìn)行采收，放入種子袋內(nèi)自然陰干，待陰干后放入低溫冰箱冷藏或直接用于播種。

1.3 統(tǒng)計(jì)與分析

雜交15～20d即可看出是否授粉成功，可統(tǒng)計(jì)雜交座果率，并持續(xù)進(jìn)行觀測(cè)直至果實(shí)成熟。對(duì)20個(gè)品種的生物學(xué)特性進(jìn)行觀察與統(tǒng)計(jì)，包括花瓣瓣性、花色、花徑、花期、株高等[9]。

2 結(jié)果與分析

2.1 人工雜交結(jié)果

根據(jù)各親本花期和花粉數(shù)量的多少共獲得23個(gè)雜交組合，雜交總量為337個(gè)，能夠結(jié)果數(shù)量為304個(gè)，雜交平均結(jié)實(shí)率達(dá)到90.21%，部分雜交組合結(jié)實(shí)率可達(dá)100%，最低為58.33%（‘倒影’X‘經(jīng)典’）。以其中8個(gè)品種分別作為母本的雜交結(jié)實(shí)率具有一定差異，最高的為‘格倫沃爾德’，結(jié)實(shí)率達(dá)到 97.06%，其次為‘美佐世’（97.01%）、‘胭脂扣’（96.15%），最低的為‘倒影’，僅 75.93%的結(jié)實(shí)率，然而以‘倒影’作為父本的結(jié)實(shí)率可達(dá)100%，表明母本自身的結(jié)實(shí)特性對(duì)于鐵線蓮雜交結(jié)實(shí)具有重要影響。23個(gè)雜交組合中有8個(gè)為正反交組合，‘東方晨曲’與‘瑞貝卡’、‘東方晨曲’與‘美佐世’、‘戴紐特’與‘倒影’正反交結(jié)實(shí)率沒有顯著差別，而‘經(jīng)典’與‘瑞貝卡’正反交具有顯著性差異，以‘瑞貝卡’為母本的結(jié)實(shí)率達(dá)到 91.67%，而以‘經(jīng)典’為母本僅為76%，但‘經(jīng)典’ב東方晨曲’的結(jié)實(shí)率卻達(dá)到100%，進(jìn)一步分析得到：以‘經(jīng)典’為父本的結(jié)實(shí)率為86.67%，而以‘瑞貝卡’為父本的結(jié)實(shí)率為75.23%，表明父本花粉活力也是影響鐵線蓮結(jié)實(shí)率的重要因素。

以不同品種作為母本其果實(shí)形態(tài)也具有較大差異，本次試驗(yàn)雜交果實(shí)形態(tài)大體可分為兩類，即風(fēng)車型（圖3）和鈴鐺型（圖4），這與花瓣風(fēng)車型和鈴鐺型的開展形態(tài)相對(duì)應(yīng)。

表1 鐵線蓮不同雜交組合結(jié)實(shí)率調(diào)查表

2.2 品種特性

按照“類群”分類法[10]可將20個(gè)品種分為早花大花型、晚花大花型、佛羅里達(dá)型、德克薩斯型4個(gè)類型，其中早花大花型開花最早，多在春夏季老枝上開花，較其它3個(gè)類型花期要早1個(gè)月左右；晚花大花型、佛羅里達(dá)型、德克薩斯型在新枝上開花，多為夏秋開花，又以德克薩斯型花期最長(zhǎng)，本試驗(yàn)引種品種‘胭脂扣’花期可延續(xù)到10月份，比其它3個(gè)類型的品種花期要長(zhǎng)1個(gè)月左右。鐵線蓮的開花特性決定了修剪的方式，由于早花大花型多在老枝上開花，修剪方式宜為輕修剪，若強(qiáng)修剪，會(huì)造成花期推遲，重瓣品種開單季花；其它3種類型在新枝開花，修剪類型多為強(qiáng)修剪。

鐵線蓮花型各異，根據(jù)花瓣瓣性可分為單瓣、重瓣、半重瓣，20個(gè)品種中單瓣品種有8個(gè)，重瓣品種有6個(gè)，半重瓣品種有2個(gè)，其余4個(gè)品種中‘帕特麗夏’、‘格倫沃爾德’既存在單瓣花又有重瓣花，‘大河’、‘卡西斯’半重瓣與重瓣花共存；根據(jù)花瓣開展形態(tài)，可分為風(fēng)車型和鈴鐺型，20個(gè)品種中僅‘胭脂扣’為鈴鐺型，其余19個(gè)品種均為風(fēng)車型。

鐵線蓮花的大小差異大，從1～2cm到20cm多不等，根據(jù)花徑大小可分為大花、中花、小花[9，10]。引種的20個(gè)品種中，花徑最大的為‘經(jīng)典’，可達(dá)20cm，其次為‘瑞貝卡’（13～17cm）、‘倒影’（14～16cm），最小的為‘胭脂扣’，僅2～4cm。萼片數(shù)量也具有較大差異，重瓣、半重瓣品種多為雄蕊瓣化而來(lái)，萼片數(shù)量為多數(shù)，其余品種萼片數(shù)由4～15不等，最多的為半重瓣品種‘倒影’多在10個(gè)以上，最少的‘胭脂扣’僅4個(gè)，大部分單瓣品種萼片數(shù)量為5～8片。

2.3 花期觀賞

鐵線蓮的花，最大的特點(diǎn)是沒有花瓣，大家所見到的五顏六色的花瓣都是花萼。有些重瓣花則除了花萼外，還由雄蕊退化而來(lái)。鐵線蓮花（萼片）色豐富，白色、藍(lán)色、紫色、粉色、紅色、以及各種復(fù)色，可以說(shuō)應(yīng)有盡有，花型多樣，有單瓣、重瓣、半重瓣以及介于三者之間的過渡類型，鐵線蓮的花蕊也變化多端，如長(zhǎng)瓣型鐵線蓮，部分雄蕊退化成花瓣。本課題組引進(jìn)的20個(gè)品種花色、花型各異，充分體現(xiàn)了鐵線蓮花的豐富多彩，如圖5所示。

表2 20個(gè)鐵線蓮品種特性

3 討論與結(jié)論

鐵線蓮屬植物為蟲媒花植物，原生種易結(jié)實(shí)，園藝品種結(jié)實(shí)率各異，重瓣、半重瓣品種幾乎不結(jié)實(shí)，單瓣品種間結(jié)實(shí)率也因雜交父母本親和力有所差異[11,12]。采用改進(jìn)的人工雜交方法平均結(jié)實(shí)率達(dá)到90.21%，稍低于孫莉[13]94.5%的平均結(jié)實(shí)率，遠(yuǎn)高于余偉軍[14]的雜交結(jié)果（70.93%），表明此方法合理有效，可以推廣應(yīng)用于今后的鐵線蓮雜交育種工作中；雜交結(jié)果也證明雜交結(jié)實(shí)與親本的選配具有重要關(guān)系，最高可達(dá)100%結(jié)實(shí)率，最低僅58.33%。當(dāng)然，本試驗(yàn)也存在著一些不足之處，由于品種間花期早晚與花粉數(shù)量不足，試驗(yàn)未能做到所有參試品種的正反交，雜交基數(shù)有限，今后也將持續(xù)不斷地進(jìn)行鐵線蓮的雜交工作，完善相關(guān)內(nèi)容，并做好后續(xù)子代新奇特優(yōu)株系選育工作，培育具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新品種。

鐵線蓮的花型、花色豐富多樣，花朵美麗繁茂，花期從早春至晚秋 （也有少數(shù)冬天開花的品種），具有很高的觀賞價(jià)值。就花色來(lái)看，黃色不常見，橙色似乎還未發(fā)現(xiàn)，據(jù)張永勝等[15]介紹野生大花鐵線蓮的花為黃色或黃白色，因此可通過不斷雜交與篩選來(lái)獲取開黃花的特異種質(zhì)。當(dāng)然，除常規(guī)雜交育種外，還需通過細(xì)胞工程、基因工程等高新生物技術(shù)手段快速、高效、有目的的導(dǎo)入優(yōu)良基因，從而豐富鐵線蓮的遺傳背景，創(chuàng)造更多新、奇、特品種。除花色改良外，對(duì)于鐵線蓮植株的整體高矮、花期、開花量、花徑大小、瓣性、抗逆性和適應(yīng)性等方面都需不斷的深入研究與改良；以培育花大、色艷、花期長(zhǎng)、抗逆性強(qiáng)的品種為育種目的，同時(shí)，也要加強(qiáng)鐵線蓮栽培與應(yīng)用技術(shù)研究，比如花期調(diào)控、品種退化、園林應(yīng)用與推廣等方面的研究，真正使鐵線蓮走進(jìn)千家萬(wàn)戶的陽(yáng)臺(tái)與花園。