盧德鵬,呂艷，王曉弟，佟素梅，李紀順, 扈進冬*

(1.山東泰諾藥業(yè)有限公司,山東 濰坊 262200;2.東阿縣第一中學,山東 聊城 252201;3.郯城農(nóng)業(yè)推廣中心,山東 臨沂 276100;4.濰坊市峽山區(qū)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全管理服務(wù)中心,山東 濰坊 261000;5.齊魯工業(yè)大學(山東省科學院) 山東省科學院生態(tài)研究所,山東 濟南 250014)

番茄(LycopersiconesculentumMill)是全球消費量最多的蔬菜之一，也是我國主要的栽培蔬菜，居于設(shè)施栽培播種面積的首位。2017年我國番茄設(shè)施栽培面積1 114.7萬畝(1畝≈666.67)，占番茄栽培總面積的56.3%。設(shè)施栽培的番茄主要采用連作生產(chǎn)模式，雖然具有高產(chǎn)、高效的優(yōu)勢，但同時也加重了病蟲害的發(fā)生[1-2]。番茄枯萎病是影響番茄生產(chǎn)的主要病害之一，其病原是尖孢鐮孢菌番茄?；?Fusariumoxysporumf. lycopersici(sacc)Snyder et Hansen)。該菌是一種世界廣泛分布的常見土傳病原真菌，能夠通過厚垣孢子或菌絲附著于病殘體或在土壤中長期存活，并通過澆灌進行傳播，引起番茄維管束病變[3]，嚴重影響其產(chǎn)量與品質(zhì)[4-6]。

目前，番茄枯萎病主要通過高溫悶棚和化學農(nóng)藥進行防治，但高溫悶棚效果不佳，而化學農(nóng)藥的大量使用雖然可以發(fā)揮一定的效果，但卻無法從根本上有效控制該病害的發(fā)生，同時化學殺菌劑還具有較高的毒性和殘留，長期施用會產(chǎn)生抗藥性等問題，對土壤生態(tài)環(huán)境和食品安全也產(chǎn)生危害[7]，因此，使用化學農(nóng)藥是一種不可持續(xù)的生產(chǎn)方式，亟需發(fā)展新型殺菌劑改善這一現(xiàn)狀。采用微生物生防菌防治番茄枯萎病是解決上述問題的一種重要方式，如王璐瑤等[8]使用菌株B1619水分散粒劑通過穴施的方式防治番茄枯萎病，在田間使用劑量為32 kg/畝時，防治效果達到65.1%～85.2%，顯著高于化學藥劑百菌清；王靜等[9]報道解淀粉芽孢桿菌B6在室內(nèi)盆栽試驗中能夠較好防治尖孢鐮孢菌引起的番茄枯萎病,防治效果達64.35%；鄭慶偉[10]報道了放線菌NY-20發(fā)酵液對番茄枯萎病具有較好的生防潛力。上述研究顯示了微生物菌劑在防治番茄枯萎病上的巨大潛力。

木霉菌在土壤、根際、腐爛的木材、植物殘體等環(huán)境均有分布，對多種植物病原真菌、細菌及昆蟲具有拮抗作用，是一種重要的生防因子。木霉菌可以分泌細胞壁降解酶類和次級代謝產(chǎn)物，誘導植物抗性，促進植物生長和提高農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量，已被廣泛用作生防制劑、生物肥料及土壤改良劑[11-12]。在世界真菌殺菌劑市場已經(jīng)占據(jù)50%的市場份額，同時有報道顯示木霉菌對草莓枯萎病也有一定的防治效果[13-14]。

針對目前市場缺乏有效防治番茄枯萎病的生防制劑的現(xiàn)狀，本研究擬采用對真菌病害具有較好防治效果的木霉菌可濕性粉劑進行防治。選用的木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)是由山東泰諾藥業(yè)有限公司開發(fā)的生物殺菌劑產(chǎn)品，目前主要用于黃瓜灰霉病的防治，其活性成分木霉菌的水分散粒劑也可用于小麥紋枯病的防治[13]。木霉菌在室內(nèi)抗真菌活性測定中對多種植物病原真菌具有良好的抑制活性，包括多種鐮孢菌[14-16]。因此，用木霉菌防治番茄枯萎病可進一步拓展其防治真菌病害的范圍。為進一步明確該藥劑對番茄枯萎病的的防治效果，2018年采用木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)在河北保定進行了番茄枯萎病藥效試驗，探索利用木霉菌生防制劑替代或減少化學農(nóng)藥使用的綠色防治方案。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗選用的番茄品種是東圣1號。試驗藥劑是木霉菌可濕性粉劑 (2×108cfu/g)粉劑(山東泰諾藥業(yè)有限公司生產(chǎn))，50%多菌靈可濕性粉劑(江蘇藍豐生物化工股份有限公司)。

1.2 試驗地情況

試驗地設(shè)在保定市南市區(qū)西馬池蔬菜種植基地，土質(zhì)沙壤土，番茄連年種植，番茄枯萎病歷年發(fā)生。該試驗地塊平整，具有良好的灌溉設(shè)施，各處理栽培條件和田間管理一致。

1.3 試驗設(shè)計

試驗地點選擇番茄枯萎病常年發(fā)生，并且病害較為嚴重的地塊。番茄于2018年2月27日移栽定植，株間距30 cm，行間距60 cm。試驗設(shè)5個處理，分別為15 000、7500、5000 g/hm2的木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)，50%多菌靈可濕性粉劑300 g/hm2以及空白對照，每處理4次重復。在定植前，各處理用藥量按試驗設(shè)計劑量折算后分別與75 kg/hm2干細土拌勻，然后將拌有藥劑的細土撒于土壤表面，翻地2次，使藥劑在小區(qū)土壤中均勻分布，空白對照不施藥。試驗采用完全隨機區(qū)組設(shè)計，小區(qū)面積33 m2，共20個。記錄番茄生長期植株的發(fā)育狀況以及從番茄開始采收直至拔秧的產(chǎn)量，同時調(diào)查小區(qū)內(nèi)發(fā)病株數(shù)，計算病株率及防治效果。

1.4 調(diào)查方法

1.4.1 調(diào)查時間和次數(shù)

藥劑處理土壤后14 d和90 d分別進行第1次、第2次調(diào)查，調(diào)查各小區(qū)內(nèi)發(fā)生番茄枯萎病的病株數(shù)，計算試驗藥劑對番茄枯萎病的防治效果，同時調(diào)查番茄植株的株高、鮮重等生長指標。本試驗共調(diào)查2次。

1.4.2 番茄枯萎病調(diào)查方法

根據(jù)番茄枯萎病的典型癥狀，記錄各小區(qū)內(nèi)番茄枯萎病發(fā)病株數(shù)及番茄總株數(shù)。番茄枯萎病藥效計算方法如式(1)、(2)所示。

(1)

(2)

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用DPS 7.05軟件對調(diào)查數(shù)據(jù)進行處理，采用鄧肯式(Duncan’s)新復極差檢驗法對完全隨機試驗單因素方差進行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 木霉菌可濕性粉劑 (2×108 cfu/g)對番茄枯萎病的防治結(jié)果

藥劑處理土壤后14 d，5種處理的防治效果如表1所示。試驗藥劑木霉菌可濕性粉劑 (2×108cfu/g)對番茄枯萎病的平均防效隨著有效成分劑量的增大而增大，且在15 000 g/hm2劑量處理下的平均防效顯著高于5000 g/hm2的平均防效(P<0.05)，但在P<0.01水平兩者差異不顯著，其他處理劑量之間防效無顯著差異(P<0.05)。在300 g/hm2有效成分劑量下，對照藥劑50%多菌靈可濕性粉劑處理土壤14 d后病株率為(1.50±0.26)%，平均防效77.94%。對照藥劑的平均防效與木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)在15 000 g/hm2和7500 g/hm2處理組間無顯著差異，但高于木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)在5000 g/hm2處理組，對照組的平均防效與各木霉菌各處理組之間無顯著差異。

表1 不同試劑處理14 d的番茄枯萎病的防治結(jié)果

注：表中病株率為4次重復平均值;大小寫字母分別表示1%和5%顯著水平

施藥90 d，5種處理的調(diào)查結(jié)果如表2所示。由表2可知，供試藥劑木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)施藥90 d后仍然對枯萎病具有較高的防治效果，在15 000、7500、5000 g/hm2有效成分劑量下，平均防效均高于60%，且防治效果與劑量成正相關(guān)，但無顯著差異(P<0.05)；在300 g/hm2有效成分劑量下，對照藥劑50%多菌靈可濕性粉劑處理土壤90 d后病株率為(5.70±1.26)%，平均防治效果為56.65%，其平均防效顯著低于施用15 000 g/hm2劑量處理下木霉菌菌劑處理組(P<0.05)，但在P<0.01水平差異不顯著。

表2 不同試劑處理90 d的番茄枯萎病的防治結(jié)果

注：表中病株率為4次重復平均值;大小寫字母分別表示1%和5%顯著水平

以上結(jié)果顯示，雖然隨施藥期的延長各處理藥劑的平均防治效果均有所降低，但相比而言，木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)對番茄枯萎病具有較好的防治效果，與對照藥劑50%多菌靈可濕性粉劑相比具有更長的持效期。木霉菌可濕性粉劑活性成分為木霉菌活孢子，可以定植于番茄根部，在植株發(fā)育過程中通過重寄生、競爭作用、產(chǎn)生抗生物質(zhì)等作用拮抗鐮孢菌，防止其侵染番茄，由于木霉菌防病作用機制多樣，因此可以有效地降低植株的發(fā)病率，這也是木霉菌具有比化學藥劑更長持效期的原因之一。

2.2 木霉菌可濕性粉劑(2×108 cfu/g)對番茄的促生效果

施藥14 d時測量各處理小區(qū)的植株鮮重和干重，結(jié)果如表3所示, 木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)不同劑量處理之間對番茄植株的鮮重、干重的影響均無顯著性差異(P<0.05)。與對照藥劑50%多菌靈可濕性相比，木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)處理組的植株鮮重增加56.47%～63.43%，干重增加43.53%～67.05%；與清水對照處理相比，木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)處理的植株鮮重增加28.42%～49.47%，干重增加29.79%～51.06%。50%多菌靈可濕性粉劑處理組的植株鮮重和干重與清水對照相比無顯著性差異(P<0.05)。

表3 不同試劑處理14 d對番茄的促生效果

注：表中病株率為4次重復平均值，小寫字母表示5%顯著水平

施藥90 d后，從田間植株看(圖1)，試驗藥劑木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)各處理區(qū)番茄植株葉色綠而發(fā)亮、葉片舒展、長勢旺盛，具有明顯的促生長作用，說明木霉菌具有壯苗健苗的功能，這也間接增強了植株對病害的抵抗能力，提高了防治效果。

以上試驗結(jié)果表明，木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)作為一種生物殺菌劑，在用量15 000 g/hm2時對番茄枯萎病具有較好的防治效果，同時可以促進植株生長，為番茄枯萎病的綠色防控提供了一種新的選擇。

圖1 木霉菌處理組和對照組番茄長勢對比Fig.1 Comparison of tomato growth between Trichoderma treatment and control groups

3 結(jié)論

從結(jié)果來看，木霉菌可濕性粉劑(2×108cfu/g)在15 000 g/hm2劑量下平均防效高于70%。比對照藥劑防效略有提高，同時持效期更長,具有替代化學殺菌劑防治番茄枯萎病的潛力。由于番茄枯萎病是土傳維管束病害，建議使用劑量為7500～15 000 g/hm2，于作物定植移栽前均勻撒施。

目前的木霉菌制劑類型多為可濕性粉劑，主要用于葉面噴施使用，生產(chǎn)成本和價格相對較高，而針對番茄枯萎病這類型的維管束病害，葉面噴施防治效果不如灌根或撒施理想[17]，所以實際生產(chǎn)應用過程中使用普通粒劑或粉劑即可。普通粒劑或粉劑生產(chǎn)成本和價格低，且更易發(fā)揮效果，因此，更利于實際生產(chǎn)中的推廣使用。此外，由于木霉菌是環(huán)境友好型的生物農(nóng)藥產(chǎn)品，可以在番茄生長期內(nèi)多次施用，進一步提高防治效果，例如種植前的土壤處理、拌種處理等，具體施用方法和劑量以及施用效果還需后續(xù)試驗驗證。