1.九信中藥有限公司，湖北 武漢 430050；2.九信(武漢)中藥研究院有限公司，湖北 武漢 430050

湯劑是中醫(yī)藥傳統(tǒng)的劑型之一，其質(zhì)量直接影響臨床的藥效，而加水量與煎取量是決定質(zhì)量的重要參數(shù)[1]。其中，加水量是影響藥物有效成分溶出率的關鍵因素[2]，如加水不足，易導致藥材有效成分不易被煎出，加水過多，易導致藥液濃度低，影響服用劑量。

目前，文獻中關于煎藥機加水量的報道較多，王麗等[3]通過對3類不同功效處方的吸水性研究，總結(jié)出按照煎藥機使用說明書中加水量參考公式：加水量(mL)=吸收常量(mL/g)×飲片質(zhì)量+預取藥液量(mL)+損耗量(200 mL)(式中吸收常量 KO=1.5 mL/g)，補益劑 KO值為參考公式中吸收常量的0.9倍，解表劑KO值為參考公式中吸收常量的1.3倍，一般藥劑為 KO值，這樣的加水量為最合適。唐素勤[4]報道煎藥機的加水量一般為計劃所得藥量的1.2倍。張家成等[5]使用煎煮機對旋覆代赭湯進行煎煮，得出最佳加水量為9倍藥材重量。田杰等[6]按照廠家提供的加水公式Q = 1.1×W+F×400+400(Q為加水量，W為劑量，1.1為吸水系數(shù)，F(xiàn)×400∶F代表劑數(shù)，400代表一劑藥煎煮量，分裝為2袋，另一個400為管道失水量)進行加水試驗，得出部分藥方需再加水才能煎出需要的袋數(shù)，此加水公式基本能符合要求。蔣炬輝[7]隨機抽取40組代煎中藥處方,進行藥量和藥渣的稱量,通過計算吸水系數(shù)、水分的蒸發(fā)量,建立剩余量與蒸發(fā)量之間的關系方程，最終得到關系式為：加水量=吸水系數(shù)×藥量+蒸發(fā)量+所需藥水量(吸水系數(shù)=1.1782)。李彬[8]隨機抽取門診處方50張，進行加水及煎煮實驗，得出加水量與吸水系數(shù)、蒸發(fā)量有關，與蓄水系數(shù)無關，加水量可通過公式：加水量=吸水系數(shù)×藥量+蒸發(fā)量+所需量(吸水系數(shù)為1.15)來確定。戴麗莉等[9]通過測量煎藥機的水分蒸發(fā)量、擠壓出液量，并結(jié)合上述參數(shù)建立煎藥機的加液量數(shù)學模型：加液量=每味中藥飲片的吸水率×飲片質(zhì)量+蒸發(fā)量+所需出液量-煎藥機擠壓功能參數(shù)×處方中飲片總質(zhì)量，后采用實際的中藥復方驗證該數(shù)學模型，得出實際出液量與理論出液量之間的百分比在±5%以內(nèi)。

然而，加水量與煎煮液有效成分含量差異方面的研究報道比較少，暫無法獲取準確的加水量，以使藥材的有效成分能充分溶出。為進一步研究加水量與有效成分溶出率之間的關系，我司以補陽還五湯為研究材料，選用多種加水量公式，同時用HPLC測定補陽還五湯中的阿魏酸及黃芪甲苷含量，通過比較不同加水量條件下藥材中有效成分的含量，確定同重量藥材的最適加水量，為提高藥材的煎煮質(zhì)量提供借鑒意義。

1 材料

東華YFY-13型煎藥機、MS204S電子分析天平、Ulti Mate 3000 液相色譜儀、Agilent 1260 高效液相色譜系統(tǒng)(Chemstation Open-Lab工作站)、VWD檢測器。

補陽還五湯藥材購自湖北省中醫(yī)院，均符合《中國藥典》(2015版)[10]各項下規(guī)定。阿魏酸、黃芪甲苷對照品購自中國食品藥品檢定研究院，甲醇、乙腈均為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 試驗設計 選用以下5種加水量公式：①加水量=1.2×所需出液量；②加水量=9×飲片重量；③加水量=吸水系數(shù)×飲片重量+蒸發(fā)量+所需出液量-擠壓功能參數(shù)×飲片重量；④加水量=吸水系數(shù)×飲片重量+蒸發(fā)量+所需出液量-擠壓功能參數(shù)×飲片重量+1000；⑤加水量=吸水系數(shù)×飲片重量+蒸發(fā)量+所需出液量-擠壓功能參數(shù)×飲片重量+2000。

查閱文獻確定吸水系數(shù)為1.1[6-8]，擠壓功能參數(shù)為40%[9]，蒸發(fā)量按公式=0.0195×所需出液量+37.92[7]計算。

補陽還五湯組成：黃芪(125 g)、當歸(6 g)、赤芍(5 g)、地龍(3 g)、川芎(3 g)、紅花(3 g)、桃仁(3 g)。遵醫(yī)囑設定每袋包裝量200 mL，1付藥2袋。

分別稱取5付劑量共5份，按以上5種加水量公式加入冷水，浸泡30min，選用同樣的煎藥參數(shù)(溫度105～115℃，壓力0.08～0.1Mpa，時間30分鐘)，分別在煎藥機中煎煮，達到時間后，機器自動擠出藥渣，藥液自動打入打包機并封口。

2.2 阿魏酸含量測定

2.2.1 色譜條件 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.085%磷酸溶液(17∶83)為流動相；檢測波長為316 nm；柱溫35 ℃；進樣量：10 μL。

2.2.2 對照品溶液的制備 精密稱取阿魏酸對照品12.46 mg，加70%甲醇定容至25 mL，即得0.498 4 g·L-1對照品儲備液。

2.2.3 供試品溶液的制備 分別精密量取1～5號補陽還五湯藥液30 mL，置蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，向殘渣中精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，加熱回流30 min，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液濾過，即得。

2.2.4 線性關系考察 精密量取阿魏酸對照品溶液 0.1、0.4、0.8、1.6、3 mL，分別置于10 mL量瓶中，加70%甲醇定容至刻度，搖勻。然后進樣分析，以峰面積值為縱坐標(Y)，進樣量(μg)為橫坐標(X)，進行線性回歸分析，得線性方程Y = 237.48X+ 35.807，r=0.9998，阿魏酸線性關系良好。

2.2.5 精密度試驗 精密吸取用于線性關系考察的對照品溶液5 μL，進樣分析，連續(xù)測定6次，記錄阿魏酸的峰面積，計算RSD，結(jié)果RSD<0.50%。

2.2.6 穩(wěn)定性試驗 取同一份供試品溶液，分別在0、2、4、8、12、24、48 h進樣分析，測定峰面積，計算RSD，結(jié)果RSD(n=6)<2.00%。

2.2.7 重復性試驗 取同一份藥液，按已確定的方法平行制備6份供試品溶液，進樣分析，計算RSD，結(jié)果RSD(n=6)<2.00%。

2.2.8 加樣回收率試驗 取已知組分含量的同一藥液9份，分別加入高、中、低濃度的對照品溶液各3份，按照2.2.3方法制備供試品溶液，進樣測定，計算回收率，結(jié)果9個樣本的平均回收率>98.00%，RSD(n=9)<1.00%。

2.3 黃芪甲苷含量測定

2.3.1 色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(32：68)為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測；進樣量：10 μL。

2.3.2 對照品溶液的制備 取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，即得。

2.3.3 供試品溶液的制備 分別精密量取1～5號補陽還五湯藥液30 mL，加水飽和正丁醇振搖提取3次，每次20 mL，合并3次正丁醇液，水浴蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移定容至5 mL量瓶中，濾膜濾過，即得。

2.3.4 線性關系考察 精密量取黃芪甲苷對照品溶液0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 mL，分別置于10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻。然后進樣分析，以峰面積值為縱坐標(Y)，進樣量(μg)為橫坐標(X)，進行線性回歸分析，得線性方程Y= 9.8756X+ 13.3325，r=0.9999，黃芪甲苷線性關系良好。

2.3.5 精密度試驗 精密吸取用于線性關系考察的對照品溶液5 μL，進樣分析，連續(xù)測定6次，記錄黃芪甲苷的峰面積，計算RSD，結(jié)果RSD<0.50%。

2.3.6 穩(wěn)定性試驗 取同一份供試品溶液，分別在0、2、4、8、12、24、48 h進樣分析，測定峰面積，計算RSD，結(jié)果RSD(n=6)<2.00%。

2.3.7 重復性試驗 取同一份藥液，按已確定的方法平行制備6份供試品溶液，進樣分析，計算RSD，結(jié)果RSD(n=6)<2.00%。

2.3.8 加樣回收率試驗 取已知組分含量的同一藥液9份，以高、中、低濃度加入對照品溶液，按已確定的方法制備供試品溶液，進樣測定，計算回收率，結(jié)果9個樣本的平均回收率>98.00%，RSD(n=9)<1.00%。

2.4 結(jié)果與分析 煎藥機加水量如表1所示，測定的阿魏酸、黃芪甲苷含量如表2所示，不同加水量所煎煮出的有效成分含量如圖3所示。

表1 煎藥機加水量

表2 阿魏酸、黃芪甲苷含量

由表2可知，水平2的阿魏酸、黃芪甲苷含量最低，水平3的阿魏酸含量最高，水平1的黃芪甲苷含量最高。經(jīng)分析，水平1所得藥液中有效成分阿魏酸、黃芪甲苷濃度都較高，隨著水量的增加，水平3、4所得藥液中阿魏酸、黃芪甲苷濃度沒有顯著增加或減少，說明水量增加后，增加了藥液中有效成分的溶出，向藥材中繼續(xù)加水，水平5中阿魏酸、黃芪甲苷的含量顯著減少(如圖3)，說明水平5中的加水量過多，導致藥液中有效成分濃度降低。水平4的加水量相比1、3至少增加了38%，但藥液中的阿魏酸、黃芪甲苷濃度基本不變，說明水平4中的阿魏酸、黃芪甲苷的溶出持續(xù)維持平衡，并達到最大溶出，結(jié)合實際出液量，水平4的出液量誤差為30 mL，數(shù)值最小，因此公式4加液量的效果最優(yōu)。

進一步的，按已報道的煎藥機加水量公式進行加水，雖然能得到較高濃度的藥液，但藥材中的有效成分沒有完成煎煮出來，造成了藥材的浪費，若一味的增加煎煮的水量，導致煎煮出的藥液體積增大，超出所需藥液量，增加患者服用難度，造成藥液的浪費。考慮在不增加補陽還五湯體積的前提下，可以適當?shù)臏p少藥方中藥材的重量，保持藥液中有效成分的含量一致。根據(jù)以下公式可準確計算藥方中減少的藥材重量：M=原飲片質(zhì)量-(原飲片質(zhì)量×所需藥液)/(所需藥液+1000)。通過計算493 g補陽還五湯藥材即可煎煮出2000 mL的藥液，相比原來需要740 g藥材，減少了33%的藥材消耗。

本試驗僅通過補陽還五湯進行比較分析，存在一定的普適局限性，不一定適用于所有功效類型藥方，僅為同類藥方提供參考和研究基礎。后期，為驗證這個公式的適用性，將對其他藥方進行試驗，進一步驗證公式的通用性。

3 討論

影響湯劑煎煮效果的因素有加水量、浸泡時間、煎煮時間、煎煮溫度、煎煮次數(shù)等，而加水量是一個重要的因素。已報道的加水量公式較多，其中公式3對藥液蒸發(fā)量、煎藥機擠壓的藥液都進行了考慮，比較符合實際情況，該公式可準確的計算出加水量，已有試驗表明在實際操作過程中誤差較小[9]。但該文未對藥材有效成分的煎出率作考察，不清楚藥材的有效成分是否充分溶出。本試驗發(fā)現(xiàn)，按公式3計算出的體積進行加水煎煮時，藥材的有效成分未達到最大溶出。進一步的，為使藥材的有效成分充分溶出，在保證藥液煎出量一致的前提下，可以通過減少藥方中藥材的用量，最大程度的提高藥物有效成分煎出率，一次煎成。目前，減少藥材重量的計算公式還在試驗中，以期能準確計算所需藥材重量，避免造成藥材的浪費，保證湯劑的質(zhì)量。

中藥湯劑的煎煮質(zhì)量受多個因素影響，本研究僅僅針對補陽還五湯煎煮中的加水量進行了探討，更多影響因素以及因素之間的相互關系均沒有涉及，也僅選擇了一種藥方，不一定能反映普遍情況。本文從藥材方面著手，探討促進藥物有效成分溶出的新思路，供中藥湯劑的煎煮人員以參考。