周 和 王世俊 楊 蘭 譚翔勻 馮 華

貴州省遵義市食品藥品檢驗(yàn)所，貴州 遵義 563002

見血青為蘭科植物見血青Liparisnervosa(Thunb.Ex A.Murray)Lindl.的干燥全草[1]，在夏、秋季節(jié)采收，除去雜質(zhì)，曬干。見血青在《全國(guó)中草藥匯編》第3版和《中國(guó)植物志》第十八卷均有記載[1-2]。文獻(xiàn)報(bào)道該植物中含有含脈羊耳蘭堿、原兒茶酸等成分[3-5]，具有涼血止血、清熱解毒的作用，主要用于胃熱吐血、肺熱咯血、熱毒瘡瘍、蛇咬傷。見血青同時(shí)作為貴州省少數(shù)民族藥材品種，民間中醫(yī)、民族地區(qū)使用廣泛，被譽(yù)為苗醫(yī)“止血圣藥”，苗族地區(qū)常用于治療刀傷、跌打損傷。作為貴州省民族藥材，現(xiàn)無質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制其質(zhì)量，且目前中國(guó)食品藥品檢定研究院無脈羊耳蘭堿對(duì)照品和見血青對(duì)照藥材。因此，本研究以貴州省藥檢所相關(guān)專家鑒定為正品的見血青藥材作為見血青對(duì)照藥材，對(duì)黔產(chǎn)苗藥見血青藥材的性狀、顯微、薄層、水分、總灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物進(jìn)行測(cè)定，并對(duì)水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物項(xiàng)目確定了檢查限度，初步建立了黔產(chǎn)見血青藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為該藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)提供一定的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 DM2500光學(xué)生物顯微鏡(德國(guó)徠卡儀器公司)；DFC500圖像分析系統(tǒng)(德國(guó)徠卡儀器公司)；AB265-S梅特勒電子天平(梅特勒有限公司)；FW80高速萬能粉碎機(jī)(天津市泰斯特儀器有限公司)。

1.2 藥物與試劑 見血青藥材分別采集于貴州各地(詳見表1)，經(jīng)貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥實(shí)驗(yàn)室江維克教授鑒定為蘭科植物見血青Liparisnervosa(Thunb.Ex A.Murray)Lindl.的干燥全草，憑證標(biāo)本存放于遵義市食品藥品檢驗(yàn)所。見血青對(duì)照藥材(批號(hào)：201710-06，貴州省食品藥品檢驗(yàn)所提供)。石油醚(批號(hào)：20170509，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)、乙酸乙酯(批號(hào)：20170509，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)、乙醚(批號(hào)：20180202，成都金山化學(xué)試劑有限公司)、無水乙醇(批號(hào)：20180312，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)均為分析純，硅膠G板(批號(hào)：20170818，青島海洋化工廠有限公司)。

表1 供試樣品來源表

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀鑒別 依據(jù)《藥用植物學(xué)》[6]對(duì)植物根莖葉花果的分類鑒別和《中國(guó)藥典》[7]2015版對(duì)其它藥材性狀的規(guī)范描述，觀察12個(gè)見血青樣品，其性狀特征總結(jié)如下：根狀莖上著生細(xì)長(zhǎng)的須根數(shù)條。假鱗莖圓柱形，長(zhǎng)2.5～7.0 cm，具節(jié)，基部有灰白色膜質(zhì)葉柄殘基。單葉互生，2～5片，黃綠色，質(zhì)薄，略皺縮；展開后呈卵形或卵橢圓形，長(zhǎng)5～16 cm，寬2.5～6 cm，先端尖，基部成鞘狀抱莖，脈3～8條?？偁罨ㄐ蝽斏仙?，?？梢娝薮娴妮艄?；蒴果紡錘形，長(zhǎng)0.8～1.5 cm，寬0.4～0.6 cm。氣微，味苦。

2.2 顯微鑒別[8]通過對(duì)12個(gè)藥材樣品的粉末進(jìn)行觀察和測(cè)量，其顯微鑒別特征總結(jié)如下：本品粉末棕黃色或棕褐色；厚壁細(xì)胞呈不規(guī)則形；單細(xì)胞非腺毛，壁厚或螺紋狀紋理；導(dǎo)管為梯紋導(dǎo)管或網(wǎng)紋導(dǎo)管，直徑5～30 μm；草酸鈣針晶較細(xì)，長(zhǎng)25～80 μm ，多成束存在。如圖1所示。

2.3 薄層鑒別[9]分別取貴州12個(gè)產(chǎn)地見血青藥材粉末約1.0 g，加石油醚(60～90℃)10 mL，超聲處理30分鐘，濾過，水浴蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴? mL溶解，作為供試品溶液。另取見血青對(duì)照藥材1.0 g，同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法(2015年版《中國(guó)藥典》四部通則0502)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-乙醚 (3∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。詳見圖2。

2.4 檢查

2.4.1 水分測(cè)定水分測(cè)定 按2015年版《中國(guó)藥典》通則0832第二法測(cè)定，12批見血青藥材水分測(cè)定結(jié)果為11.03～13.62%，平均值12.51%，暫定水分不得過15.0%。結(jié)果詳見表2。

2.4.2 總灰測(cè)定分灰分測(cè)定 按2015年版《中國(guó)藥典》通則2302測(cè)定，12批見血青藥材測(cè)定結(jié)果為8.62～9.66%，平均值9.16%，暫定總灰分不得過11.0%。結(jié)果詳見表2。

2.4.3 酸不溶性灰分灰分測(cè)定 按2015年版《中國(guó)藥典》通則2302測(cè)定， 12批樣品測(cè)定結(jié)果為4.71～5.54%，平均值5.14%，暫定酸不溶性灰分不得過6.0%。結(jié)果詳見表2。

2.5 水溶性浸出物含量測(cè)定浸出物測(cè)定 按2015版《中國(guó)藥典》通則2201冷浸法測(cè)定，測(cè)定12批樣品的結(jié)果為12.02～13.56%，平均值12.67%，測(cè)定結(jié)果詳見表2。根據(jù)測(cè)定結(jié)果，暫定浸出物標(biāo)準(zhǔn)不得少于10.0%。

表2 水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物測(cè)定結(jié)果 (n=2，%)

3 討論

黔產(chǎn)見血青為貴州常用民族藥材，本研究對(duì)不同產(chǎn)地的黔產(chǎn)見血青藥材性狀特征、顯微特征進(jìn)行了歸納總結(jié)。摸索了TLC條件，分別以石油醚(60～90℃)-乙醚(5∶1)、石油醚(60～90℃)-乙醚-乙酸乙酯 (5∶2∶0.1)、石油醚(60～90℃)-乙醚 (3∶2)為展開劑，展開，作為展開劑，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。其中以石油醚(60～90℃)-乙醚 (3∶2)為展開劑的薄層色譜圖斑點(diǎn)明顯、熒光斑點(diǎn)清晰、專屬性強(qiáng)，并按照國(guó)家藥典委員會(huì)《中藥分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則實(shí)施細(xì)則》的相關(guān)要求進(jìn)行方法學(xué)耐用性考察，重現(xiàn)性好。分別用無水乙醇、80%乙醇、70%乙醇、水作溶劑，采用冷浸法和熱浸法依次測(cè)定黔產(chǎn)見血青浸出物含量。根據(jù)測(cè)定結(jié)果，以水為溶劑，冷浸法效果最佳，初步確定浸出物限量。按2015年版《中國(guó)藥典》通則方法對(duì)水分、總灰分和酸不溶性灰分進(jìn)行測(cè)定，初步確定各限量標(biāo)準(zhǔn)。

綜上所述，本研究能夠?yàn)榍a(chǎn)苗藥見血青藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)提供一定的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。筆者將繼續(xù)對(duì)該藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)深入研究，以規(guī)范苗藥見血青的生產(chǎn)，促進(jìn)苗藥現(xiàn)代化發(fā)展。