李蓮芳 楊 芬 李云東 王福芝 李 娟

云南工貿(mào)職業(yè)技術(shù)學院，云南 昆明 650300

大棗為鼠李科(Rhamnaceae)棗屬(Ziziphus)植物棗(ZiziphusjujubaMill.)的干燥成熟果實，為常用中藥之一，《神農(nóng)本草經(jīng)》列為上品。其味甘，性溫，歸脾、胃經(jīng)，為補中益氣、養(yǎng)血安神、緩和藥性的常用中藥，用于脾虛食少、乏力便溏、婦人臟躁等，國內(nèi)外應用前景廣闊。大棗歷代炮制方法豐富,主要為凈制、切制、制膏、蒸制、燒制、煨制、藥汁制、酥制、焙制、煮制、酒炙、烘制、炒制等,而今僅沿用了凈制、切制、蒸制、炒制等幾種炮制方法。

大棗最早的炮制方法稱為“擘”，始見于漢代的《金匱玉函經(jīng)》[1]，擘去核。梁代《本草經(jīng)集注》擘破[1]。唐代《備急千金要方》燒灰[1]。唐代《千金翼方》去核蒸之去皮[1]。宋代《太平圣惠方》搗為塊，用紙緊裹，火火燒令赤，候冷取出[1]。明代《普濟方》煮熟，去皮核，研,去核，溫水酒拌勻，焙干[1]。清代《幼幼集成》炒研[1]。大棗炮制方法歷代以來都比較多，隨著時代的進步不斷得到改進和發(fā)展,蒸制和炒制一直沿用至今,《中藥炮制經(jīng)驗集成》的炮制規(guī)范中收載了大棗蒸制和炒制的炮制方法[2]?！吨腥A本草》收載了大棗的炮制方法為取大棗洗凈，置蒸籠內(nèi)，加熱蒸半小時，取出，干燥即可[3]。而2015年版《中國藥典》大棗的炮制只記載了凈制、切制和干燥的炮制方法[4]，沒有其他炮制方法的記載。

近20年來，也有學者對大棗的炮制做了深入的研究，一致認為大棗炮制后入藥煎出率較高，藥效更好，王克周[5]對大棗炮制方法進行了研究，認為在外力破壞大棗皮、炒黃、砂燙等方法炮制以后，有利于大棗的水溶性成分最大限度地進入煎液，從而提高了藥物利用率。但未有文獻報道對大棗至今沿用的凈制、切制、蒸制、炒制等幾種炮制方法進行全面和對比的研究。黃酮類化合物是大棗的化學成分之一，大棗中富含多種黃酮，如蘆丁、槲皮素、當藥黃素等，這些黃酮類化合物有舒張血管、抗氧化等藥理活性。本研究通過測定凈制、炒黃法、炒焦法、炒炭法、砂燙法、蒸法、煮法7種大棗炮制品中大棗總黃酮的含量，確定哪種炮制方法為大棗的最佳炮制方法。

1 儀器與試藥

1.1 材料與試藥 大棗由云南金發(fā)藥業(yè)有限公司提供，經(jīng)該公司質(zhì)量部門鑒定為大棗(Ziziphus jujuba Mill.)的干燥成熟果實；蘆丁對照品(批號：HL-180122，純度≥98%，購自中國食品藥品檢定研究院)；蒸餾水；實驗所用的其它試劑均為分析純，購自昆明市官渡區(qū)卓達儀表儀器經(jīng)營部。

1.2 儀器 紫外可見分光光度計(型號：UV-1800PC-DS，上海美諾達儀器有限公司)；天子分析天平(型號：LAC-224C，常熟市夢蘭百靈天平儀器有限公司)；水浴鍋(型號：DK-98-IIA)；回流提取裝置(天津市天波玻璃儀器有限公司)；集成灶(型號：JCZ-(Y)-M，中山美炊電器有限公司)；電子秤(型號：BWS-30-SX，百仕特)；炒藥鍋、藥鏟、竹編、瓷盤等均購自官渡區(qū)卓達儀表儀器經(jīng)營部。

2 方法與結(jié)果

2.1 大棗炮制品的炮制方法

2.1.1 凈制 除去雜質(zhì)，洗凈，曬干。用時破開或去核[4]。

2.1.2 炒黃法 取凈大棗(去核，分成兩瓣，大小一致)，至于預熱好的炒制容器內(nèi)，用中火加熱，炒至色澤加深，并逸出固有氣味時，取出，攤開，晾涼。篩去碎屑。

2.1.3 炒焦法 取凈大棗(去核，分成兩瓣，大小一致)，置于預熱好的炒制容器內(nèi)，用中火加熱，炒至表面焦褐色，內(nèi)部焦黃色，并有焦香氣逸出時，取出，攤開，晾涼。篩去碎屑。

2.1.4 炒炭法 取凈大棗(去核，分成兩瓣，大小一致)，置于預熱好的炒制容器內(nèi)，用武火炒至表面焦黑色，內(nèi)部焦黃色，取出，攤開，晾涼。篩去碎屑。

2.1.5 砂燙法 取河砂(量以能掩蓋藥物為宜)置于炒制容器內(nèi)，用武火加熱，炒至河砂呈靈活狀態(tài)，投入凈大棗(去核，分成兩瓣，大小一致)，不斷翻炒至鼓起，取出，篩去河砂，晾涼。

2.1.6 蒸法 取凈大棗(去核，分成兩瓣，大小一致)，置于蒸制容器內(nèi)，隔水蒸半小時(火力：先武后文，圓氣后開始計時)，取出，攤開，晾涼，干燥。

2.1.7 煮法 取凈大棗(去核，分成兩瓣，大小一致)，置于煮制容器內(nèi)，加水煮30 min(加水量：剛好沒過藥面為宜；火力：先武后文，水沸騰后開始計時)，至汁液被藥物吸盡，取出，攤開，晾涼，干燥。

2.2 不同炮制方法成品性狀比較 分別取2.1中采用各種炮制方法得到的成品置于瓷盤中，從形狀、大小、色澤、表面特征、質(zhì)地特征等方面對大棗各飲片性狀進行觀察比較。炒黃品、炒焦品、炒炭品、砂燙品、蒸制品、煮制品圖片依次為下列A～F。

通過對各炮制品性狀進行比較，各種炮制品形狀、大小、質(zhì)地特征幾乎沒有區(qū)別，但色澤、表面特征區(qū)別較大，其中以炒焦品和炒炭品改變最為明顯，從外觀上看，炒焦品和炒炭品很有可能在性能上已經(jīng)發(fā)生改變，為了充分驗證哪種炮制方法為大棗的最佳炮制方法，進行以下試驗。

2.3 炮制品UV測定[6]

2.3.1 標準溶液的制備 精密稱取蘆丁標準品10 mg，用甲醇溶解，甲醇定容于50 mL容量瓶中。

2.3.2 標準曲線的建立 分別取0、0.5、0.75、1.0、1.25、1.5、1.75、2.0 mL標準溶液于25 mL容量瓶中，各加2%AlCl3溶液1 mL，搖勻，用甲醇定容，混勻后放置30 min，以不加標準品溶液同法制備空白溶液，測定吸光度值。記錄標準溶液測定項下系列標準溶液的吸光度值，以濃度(C)為橫坐標，吸光度值(A)為縱坐標，繪制標準曲線。得回歸方程為Y=0.0417X+0.0027，r=0.9999。結(jié)果表明，蘆丁檢測濃度在4.96～19.84 μg/mL范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關系。

2.3.3 樣品溶液制備 取各炮制品(60℃條件下干燥7 h)適量，粉碎，取各炮制品粉末約1 g，加60%乙醇20 mL，稱定重量，回流提取2 h，密塞冷卻，用60%乙醇補足減失的重量，水浴鍋上加熱，趁熱過濾，取續(xù)濾液作為樣品溶液。

2.4 炮制品中總黃酮和蘆丁的吸收光譜比較 取8個25 mL容量瓶，1號加入1 mL凈制品樣品溶液，2、3、4、5號分別加0.5 mL炒黃、砂燙、蒸制、煮制品樣品溶液，6、7號分別加入0.2 mL炒焦、炒炭品樣品溶液，8號加入1 mL蘆丁標準溶液(0.248 mg/mL)，在各容量瓶中分別加入1 mL2%AlCl3溶液，搖勻，8個容量瓶都用甲醇定容，混勻后放置30 min，分別置于1 cm石英比色皿中，以1 mL2%AlCl3溶液同法制備空白溶液，用紫外-可見分光光度計在200～800 nm波長范圍內(nèi)進行全程掃描。各炮制品最大吸收波長見表1，吸收峰圖譜見圖1。

表1 各炮制品最大吸收波長

從表1和圖1可見，在紫外區(qū)，蘆丁對照品的最大吸收波長為275 nm，凈制品和蒸制品總黃酮的最大吸收波長分別為275 nm和274 nm，與蘆丁對照品的最大吸收波長幾乎一致，最大吸收峰幾乎重合。炒黃品、砂燙品、煮制品總黃酮的最大吸收波長分別為282 nm、280 nm、280 nm，吸收峰圖譜都稍微的發(fā)生了紅移，我們將各炮制品總黃酮波峰附近的吸收度進行對比，在275～282 nm區(qū)間的吸光度差別不大，差別在0.005～0.001之間。炒焦品和炒炭品總黃酮的最大吸收波長無法顯示，從圖譜上看，二者總黃酮的波峰無。因此，根據(jù)各炮制品總黃酮的吸收峰圖譜，我們可以分析得出，凈制法、蒸制法、炒黃法、砂燙法、煮制法都適用于炮制大棗，而炒焦法、炒炭法不適用于炮制大棗，這可能跟炮制時大棗的受熱程度有關系，大棗受熱程度越高，對大棗總黃酮的破壞越嚴重。

2.5 炮制品中總黃酮的測定 精密吸取2.2.3項下凈制品樣品溶液1 mL，炒黃品、砂燙品、蒸制品、煮制品樣品溶液各0.5 mL，炒焦品、炒炭品樣品溶液各0.2mL，于25mL容量瓶中，按照標準曲線項下方法操作制備樣品測定液，取靜置30 min的上清液測定吸光度，由回歸方程求出稀釋液中總黃酮濃度，然后計算各炮制品中總黃酮的百分含量，測定結(jié)果見表2。

由表2可以看出，炮制品受熱程度越深，總黃酮含量越高，即：炒炭品>炒焦品>砂燙品>炒黃品>煮制品>蒸制品>凈制品，但由RSD值可以看出，炒焦品和炒炭品RSD值較大，測定結(jié)果準確度較低，分析原因可能跟炮制時火力越大、炮制程度越深，通過肉眼判斷火候的一致性越難有關。砂燙品總黃酮含量為1.552%，總黃酮含量較高，且RSD值為0.74%，測定結(jié)果準確度較高，是較理想的大棗炮制方法。

表2 各炮制品總黃酮含量

3 結(jié)論

由以上對炮制品總黃酮紫外區(qū)最大吸收波長及吸收峰圖譜分析得出，凈制、蒸法、炒黃法、砂燙法、煮法均比較適用于炮制大棗，而炒焦法、炒炭法不適用于炮制大棗，這可能跟炮制時大棗的受熱程度有關系，大棗受熱程度越高，對大棗總黃酮的破壞越嚴重。

由對炮制品總黃酮含量測定的結(jié)果分析得出，炮制品受熱程度越深，總黃酮含量越高，即：炒炭品>炒焦品>砂燙品>炒黃品>煮制品>蒸制品>凈制品，但炒焦品和炒炭品測定結(jié)果準確度較低，分析原因可能跟炮制時火力越大、炮制程度越深，通過肉眼判斷火候的一致性越難有關。砂燙品總黃酮含量及測定結(jié)果準確度均較高。

通過以上分析可以得出，砂燙法是較理想的大棗炮制方法。本研究結(jié)果為中醫(yī)臨床應用大棗炮制品提供了重要的理論依據(jù)，同時對大棗即食飲片的研究開發(fā)具有重要意義。