武 倩 王 靜 周亞丹 劉天琪 劉喜綱

河北省中藥研究與開發(fā)重點實驗室,承德醫(yī)學院中藥研究所，河北 承德 067000

清火片由大青葉、大黃、石膏、薄荷腦4味藥物組成[1]，具有清熱瀉火、通便之功效，臨床常用于治療咽喉腫痛，牙痛，頭目眩暈，口鼻生瘡，風火目赤，大便不通[2]。部頒標準中的制備工藝為：將大青葉提取得到浸膏，再與大黃、石膏粉混勻，干燥后，粉碎成細粉，制粒、壓片即得。文獻報道按照此工藝制備得到的顆粒較硬，尾料較多，收率較低，制備的片劑片面斑點較多，崩解時限較長[3]，同時存在服用量大，每次6片，影響其臨床療效和患者順應性。將其進行劑型改進滴丸具有起效快，制備工藝簡單，易于控制等優(yōu)點[4-5]。

制備滴丸時，需要將藥物提取精制得到有效成分或有效部位，使制備的滴丸成分明確，質(zhì)量易于控制。清火片處方中量最大的是大青葉，其次是大黃，石膏和薄荷油量較少，本研究擬將清火片中大黃和大青葉提取后，與其余藥物混合加入基質(zhì)，制備清火滴丸后，達到減少服用量，崩解、快速起效的目的。將藥物制備成滴丸后，攜帶方便，穩(wěn)定性提高。文章以聚乙二醇為基質(zhì)，以丸重差異、溶解時限和圓整度為指標，在單因素考察的基礎上，采用正交設計優(yōu)化制備工藝，為清火滴丸的研究提供依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 DWJ-2000S5多功能滴丸實驗機(煙臺百藥泰中藥科技有限公司)；LGL-22D型冷凍干燥機(北京四環(huán)科學儀器廠有限公司)；JA2003電子天平(上海精科天平)；SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵(鞏義市予華儀器有限責任公司)；N-1100型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛郎儀器有限公司)；ZBS-6B智能崩解試驗儀(天津大學無線電廠)；ZDHW調(diào)溫電熱套(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)；LGL-22D型冷凍干燥機(北京四環(huán)科學儀器廠有限公司)

1.2 材料 大青葉、大黃、石膏、薄荷腦購自同仁堂；聚乙二醇-6000(PEG-6000，天津市佳興化工玻璃儀器工貿(mào)有限公司)；DY-201-100硅油(藥用級，山東大易化工有限公司)

2 方法與結(jié)果

2.1 藥物提取物的制備 將大黃藥材用10倍量的30%乙醇浸泡，加熱回流提取3次，第1次1h，第2、3次分別為0.5 h，將提取液合并，減壓回收乙醇，得到濃縮液。將濃縮液用4% NaOH調(diào)pH到10，按照一定的流速過處理好的陰離子交換樹脂柱，用去蒸餾水洗至流出液呈中性，再用2 mol/L的鹽酸酸化，用10倍量體積的95%乙醇洗脫，回收乙醇，將析出的沉淀過濾，50℃以下干燥，得黃棕色粉末[6]。主要含有五種大黃蒽醌，含量為54.3%，出膏率為0.8%。

將大青葉加水煎煮2次，第1次14倍量水提取2 h，第2次12倍量水提取1 h，合并煎液并濃縮。加入約3倍量的95%乙醇，使藥液中的乙醇含量達到70%，放置12～24 h，濾過。濾液減壓回收乙醇，冷藏4～8 h后濾除析出的沉淀。將濾液冷凍干燥得棕褐色粉末。每40 g出膏約6 g，出膏率為15%。

按照處方劑量比例稱取大青葉400 g，大黃100 g，石膏50 g，薄荷腦0.65 g比例混合得到混合提取物。

2.2 清火滴丸的制備工藝[7-8]

2.2.1 主藥與基質(zhì)的配比 實驗選用PEG-6000為基質(zhì)，將藥物與基質(zhì)按照不同的比例混合制備滴丸，其他條件固定(冷凝液8℃，滴距15 cm，油浴溫度80℃，滴速15 d/min)，以滴丸的圓整度、溶散時限作為考察指標，采用5分評分制[9](按圓整度好壞，由不圓至圓整分別記為1～5分)。由表1可知，隨著藥物與基質(zhì)比例的增加，載藥量減少，溶散時限逐漸增加。通過對比圓整度發(fā)現(xiàn)，不同基質(zhì)比的滴丸差異不大。基質(zhì)比為1∶3時圓整度稍差，考慮到載藥量和服用量的問題，選擇藥物與基質(zhì)配比為1∶4。

表1 主藥與基質(zhì)配比對滴丸質(zhì)量的影響

2.2.2 滴速 滴速是影響滴丸成型的因素。因?qū)嶒炛兴幰狠^粘稠，在滴丸劑選擇最大滴速為25d/min時產(chǎn)生粘連現(xiàn)象。因此選擇10，15，20d/min滴速，固定其他條件，以圓整度、溶解時限為評價指標，制備滴丸。由表2可知，滴速在15d/min時滴丸的圓整度最佳；滴速在20d/min時，溶解時限最短，可能是因為直徑較小，崩解較快，但由于圓整度較差，因此選擇15d/min。

表2 滴速對滴丸質(zhì)量的影響

2.2.3 滴距 滴距主要影響滴丸的圓整度。選擇3個水平10、15、20 cm, 固定其他條件，以圓整度為評價指標。由表3可知，滴距在15 cm時，滴丸的圓整度最佳。

表3 滴距對滴丸質(zhì)量的影響

2.2.4 冷凝液溫度 冷凝液溫度會影響滴丸的成型和圓整度。選擇3個水平5、8、10℃,固定其他條件，以圓整度和溶散時限為評價指標。由表4可知，當冷凝溫度為8℃時，溶散時限和圓整度均為最佳。

表4 冷凝液溫度對滴丸質(zhì)量的影響

2.3 滴丸制備工藝的正交試驗優(yōu)化[10-11]

2.3.1 因素水平確定 在單因素考察的基礎上，選取對滴丸成型影響較大的3個因素：主藥與基質(zhì)比(A)、滴距(B)、滴速(C)，每個因素取3個水平，利用L9(34)進行正交設計。見表5。

表5 因素與水平

2.3.2 正交實驗設計 采用正交實驗對滴丸的工藝進一步優(yōu)化，以溶散時限(Y1)、重量差異(Y2)、圓整度(Y3)為評價指標，采用綜合評分法來評價滴丸的質(zhì)量，綜合評分公式如下。

綜合評分=100×Y1min/Y1i×0.6+100×Y2min/Y2i×0.2+100×Y3i/Y3max×0.2

表6 正交設計實驗結(jié)果

注：D為誤差項

表7 方差分析表

由表6、7正交實驗結(jié)果可知，影響清火滴丸成型的主要因素是主藥與基質(zhì)的配比，對滴丸的質(zhì)量有顯著性影響。各因素對滴丸質(zhì)量的影響大小順序為A>B>C，其中A影響最顯著。因此確定其最佳工藝為A2B3C3, 即當藥物與基質(zhì)比例為1∶4，滴距為20 cm，滴速為20 d/min時，制備的滴丸質(zhì)量外觀良好，圓整度、丸重差異、溶散時限最優(yōu)。

2.4 工藝驗證[12]按上述最佳工藝條件制備3批滴丸，對其溶散時限，丸重差異，圓整度進行評價測定，結(jié)果如圖8顯示，各項均符合2015年《中國藥典》第四部的規(guī)定，說明此工藝重現(xiàn)性良好，可行。

表8 滴丸制備工藝驗證實驗

3 討論

針對清火片崩解慢，起效慢等缺點，將清火片改變劑型制備成滴丸。影響滴丸質(zhì)量的因素有主藥、基質(zhì)、藥物與基質(zhì)比例、滴徑、滴速、滴距等因素相互影響，綜合考慮，才可保證滴丸的成型工藝。其中在藥物的提取方面，采用水提取大青葉時所得的提取物較多，出膏率大，提取物與基質(zhì)混合不均勻，影響滴丸的質(zhì)量。為了減少出膏率，采用水提醇沉法對大青葉精制，減少出膏率，提高載藥量。干燥方面，干燥提取物時采用熱烘干法，但由于提取液中含糖量較高，易造成干燥時間長，脫水不完全等問題。且將干燥物研磨成細粉時，與空氣接觸時間長，粉末易吸收空氣中水分結(jié)塊，使其不能均勻的分散在基質(zhì)中，影響下一步滴丸的制備。故將藥材提取物冷凍干燥，并放置于干燥器內(nèi)，防止結(jié)塊。

本實驗以溶散時限，丸重差異，圓整度為評價指標，單因素考察滴速、滴距、冷凝液的溫度、藥物與基質(zhì)配比等影響滴丸成型的因素，并采用正交設計實驗和綜合評分法，全面評價滴丸的成型情況。以PEG-6000為基質(zhì)，藥物與基質(zhì)比例為1∶4，滴距為20 cm，滴速為20 d/min，冷凝溫度為8℃。滴丸溶散時限，丸重差異，圓整度均符合《中國藥典》(2015版)的要求。該制備工藝簡單、穩(wěn)定、有效，可以用于清火滴丸的制備。實驗通過將清火片改為清火滴丸，解決了清火片存在的崩解慢等問題，并提高了藥物的溶出速度和生物利用度。