歐陽貴平，謝香萍，陳有華

（江西省贛州市南康區(qū)第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 贛州 341400）

依據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》要求實(shí)驗(yàn)室內(nèi)采用不同方法或儀器檢驗(yàn)的同一項(xiàng)目，應(yīng)進(jìn)行一致性比較，定期實(shí)施比對(duì)（至少每年一次）[1]。我科嘗試采用兩臺(tái)血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行直接比對(duì)及兩臺(tái)儀器白細(xì)胞分類結(jié)果分別與人工鏡檢分類結(jié)果比對(duì),對(duì)兩種方法的比對(duì)結(jié)果進(jìn)行比較,分析采用兩臺(tái)血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行直接比對(duì)的可行性,并對(duì)兩臺(tái)儀器的白細(xì)胞分類結(jié)果數(shù)據(jù)的一致性進(jìn)行分析，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 日本Sysmex公司生產(chǎn)的Sysmex XN-10全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀和邁瑞公司生產(chǎn)的BC-5390全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀,兩臺(tái)儀器均使用原裝配套試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品；Sysmex XN-10全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀采用血涂片人工分類計(jì)數(shù)驗(yàn)證白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性,作為比對(duì)試驗(yàn)的參比儀器；CH31奧林巴斯顯微鏡、BASO瑞氏－姬姆薩染色液。

1.2 實(shí)驗(yàn)條件 兩臺(tái)儀器按各自廠家要求做好維護(hù)、保養(yǎng),開機(jī)后空白測(cè)試,均在校準(zhǔn)有效期內(nèi),測(cè)試結(jié)果符合廠家要求，確認(rèn)儀器正常工作狀態(tài)，使用單項(xiàng)中值室內(nèi)質(zhì)控品在控的條件下進(jìn)行檢測(cè)工作。

1.3 方法

1.3.1 儀器5種白細(xì)胞分類重復(fù)性（CV%）測(cè)定 將2份無脂濁、無黃疸、無溶血、兩臺(tái)儀器檢測(cè)沒有觸及我科人工復(fù)檢規(guī)則的新鮮EDTA-K2抗凝血(兩份血白細(xì)胞分類檢測(cè)結(jié)果相近)分別在兩臺(tái)儀器重復(fù)檢測(cè)11次，記錄2至11次結(jié)果，用于觀察儀器白細(xì)胞分類檢測(cè)結(jié)果的精密度。

1.3.2 比對(duì)試驗(yàn) 選取無脂濁、無黃疸、無溶血、沒有觸及本科室人工分類規(guī)則的本院門診、住院、體檢新鮮血液分析標(biāo)本30份(包含中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞分類百分比高、中、低值)在參比儀器Sysmex XN-10全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀全自動(dòng)進(jìn)樣模式重復(fù)3次檢測(cè),在比對(duì)儀器BC-5390全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀上重復(fù)3次檢測(cè)，檢測(cè)試驗(yàn)在2h內(nèi)完成，記錄各參數(shù)檢測(cè)結(jié)果。將上述30份標(biāo)本每份制作3張末梢血涂片，瑞氏－姬姆薩染色后由有經(jīng)驗(yàn)工作人員人工鏡檢白細(xì)胞分類計(jì)數(shù),取3張涂片白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)均值為靶值。

1.3.3 數(shù)據(jù)處理 采用Excel 2016軟件和SPSS 16.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，30份血標(biāo)本3次白細(xì)胞人工分類結(jié)果平均值作為參比儀器的準(zhǔn)確度驗(yàn)證值和兩臺(tái)儀器比對(duì)的靶值、3次Sysmex XN-10全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀分類結(jié)果平均值作為參比儀器驗(yàn)證測(cè)定值及兩臺(tái)儀器直接比對(duì)的靶值、3次BC-5390全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀分類結(jié)果平均值作為比對(duì)測(cè)定值。各分類結(jié)果依據(jù)靶值計(jì)算偏差（偏差＝測(cè)定值－靶值），計(jì)量資料用（x±s）表示，組間比較采用方差分析（ANOVA）、P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，檢驗(yàn)結(jié)果的一致性采用線性回歸分析和回歸系數(shù)t檢驗(yàn)，P＜0.05認(rèn)為兩種結(jié)果存在線性回歸關(guān)系。

1.3.4 判斷標(biāo)準(zhǔn) 批內(nèi)精密度采用國內(nèi)學(xué)者蔣敘川[2]報(bào)告的白細(xì)胞分類批內(nèi)精密度判斷標(biāo)準(zhǔn)見表1；以《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第四版，對(duì)不同檢測(cè)項(xiàng)目的分析質(zhì)量要求,確認(rèn)參與比對(duì)的各檢測(cè)系統(tǒng)的不精密度均符合要求的前提下,可依據(jù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)醫(yī)師的臨床經(jīng)驗(yàn)提出的建議指標(biāo)確定不同檢測(cè)項(xiàng)目的分析質(zhì)量要求[1]，我科與本院臨床醫(yī)師共同探討,決定采用WS／T246-2005白細(xì)胞人類計(jì)數(shù)參考方法Rumke表95%可信區(qū)間[3]，作為本實(shí)驗(yàn)室白細(xì)胞分類比對(duì)的判斷標(biāo)準(zhǔn),中性粒細(xì)胞（N）、淋巴細(xì)胞（L）符合率≥90%，單核細(xì)胞（M）、嗜酸性粒細(xì)胞（E）符合率≥80%，嗜堿性粒細(xì)胞（B）符合率≥70%作為本實(shí)驗(yàn)室比對(duì)的合格標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 兩臺(tái)儀器白細(xì)胞分類結(jié)果批內(nèi)精密度CV%符合要求，見表1。

2.2 兩臺(tái)儀器白細(xì)胞分類結(jié)果直接比對(duì)及兩臺(tái)儀器分類結(jié)果與人工分類結(jié)果比對(duì) 五類白細(xì)胞在白細(xì)胞分類表對(duì)應(yīng)的觀測(cè)值Rumke表的95%置信區(qū)間的符合率均達(dá)到本實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量目標(biāo)要求,30份新鮮血白細(xì)胞人工分類結(jié)果與兩臺(tái)儀器檢測(cè)結(jié)果符合率,符合率=符合例數(shù)/比對(duì)例數(shù)×100%,見表2。

2.3 30例樣本白細(xì)胞人工分類結(jié)果與兩臺(tái)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類計(jì)數(shù) 三組結(jié)果方差分析差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表 3。

2.4 兩臺(tái)儀器分類結(jié)果的一致性分析 兩種儀器檢測(cè)結(jié)果直線回歸及一致性分析 兩臺(tái)儀器檢測(cè)結(jié)果直接比對(duì)中性粒細(xì)胞（N）、淋巴細(xì)胞（L）、單核細(xì)胞（M）三種細(xì)胞分類結(jié)果相關(guān)系數(shù)（r）均大于0.99，除嗜堿性粒細(xì)胞（B）外，認(rèn)為兩種儀器的檢測(cè)結(jié)果存在相關(guān)關(guān)系（P值均<0.05）；兩臺(tái)儀器與人工分類結(jié)果比對(duì)只有中性粒細(xì)胞 （N）、淋巴細(xì)胞（L）兩類細(xì)胞r＞0.96，兩種比對(duì)方法嗜堿性粒細(xì)胞（B）分類結(jié)果相關(guān)系數(shù)（r）值很小，三組檢測(cè)結(jié)果無相關(guān)關(guān)系（P<0.05）。 見表 4。

表1 兩臺(tái)血細(xì)胞分析儀各項(xiàng)參數(shù)的CV%

表2 30例樣本人工分類與兩臺(tái)血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)結(jié)果比對(duì)符合率（%）

表3 30例樣本人工分類與兩臺(tái)全自動(dòng)血細(xì)胞分析義白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)結(jié)果（%，x±s）

3 討論

本實(shí)驗(yàn)采用新鮮抗凝血評(píng)價(jià)兩臺(tái)儀器的批內(nèi)精密度，XN-10血細(xì)胞分析儀五種白細(xì)胞分類的CV值均小于BC-5390血細(xì)胞分析儀，說明XN-10血細(xì)胞分析儀五種白細(xì)胞分類精密度較BC-5390高，兩臺(tái)儀器嗜堿性粒細(xì)胞（B）CV值均大于其它四種白細(xì)胞，這與嗜堿性粒細(xì)胞（B）外周血數(shù)量少且分布不均勻有關(guān)[2]。目前，國內(nèi)各級(jí)臨床檢驗(yàn)中心對(duì)白細(xì)胞分類結(jié)果的沒有建立室間質(zhì)量評(píng)價(jià)系統(tǒng),對(duì)于白細(xì)胞分類結(jié)果的比對(duì)大部分學(xué)者采用的是血液分析儀白細(xì)胞分類結(jié)果與作為金標(biāo)準(zhǔn)的傳統(tǒng)人工鏡檢分類結(jié)果比對(duì)[4-8]，也有部分學(xué)者采用血液分析儀白細(xì)胞分類結(jié)果與各種白細(xì)胞直接計(jì)數(shù)結(jié)果比對(duì)[9]，傳統(tǒng)的白細(xì)胞人工鏡檢分類和白細(xì)胞分類直接計(jì)數(shù)要經(jīng)過大量手工操作，如：手工推片、固定染色、人工稀釋、充池、鏡檢等步驟，其操作復(fù)雜耗時(shí)長，工作效率低，常因人為因素造成誤差[10]。本實(shí)驗(yàn)采用白細(xì)胞人工分類結(jié)果驗(yàn)證的血細(xì)胞分析儀作為參比儀器,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同儀器間白細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果直接比對(duì)和一致性分析,因?yàn)檠?xì)胞分析儀只能起到篩查作用,對(duì)異常細(xì)胞的檢測(cè)能力存在缺陷,觸及復(fù)檢規(guī)則的標(biāo)本,要人工復(fù)檢[11,12]。故本次試驗(yàn)樣本只選擇沒有觸及復(fù)檢規(guī)則的標(biāo)本,比對(duì)結(jié)果與兩臺(tái)儀器白細(xì)胞分類結(jié)果直接與人工分類結(jié)果比對(duì)基本一致，儀器間結(jié)果比對(duì)符合率、一致性均高于儀器結(jié)果與人工分類結(jié)果直接比對(duì)，這與儀器檢測(cè)細(xì)胞數(shù)多，分類計(jì)數(shù)原理比較接近,手工分類細(xì)胞計(jì)數(shù)少、精密度較低有關(guān)。此次比對(duì)試驗(yàn)因?yàn)槭葔A性粒細(xì)胞（B）數(shù)量少，符合率較低，統(tǒng)計(jì)顯示三組結(jié)果之間均無線性相關(guān)，有文獻(xiàn)報(bào)道嗜堿性粒細(xì)胞 （B）＜5%不適用儀器與人工分類的比對(duì)試驗(yàn)[13]。

綜上,兩臺(tái)全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類的測(cè)定結(jié)果直接比對(duì)能達(dá)到了解兩臺(tái)儀器間檢測(cè)結(jié)果一致性的要求，有提高比對(duì)效率、減輕檢驗(yàn)人員工作量的優(yōu)點(diǎn),比對(duì)結(jié)果與儀器結(jié)果與人工分類直接比對(duì)基本一致,可以用較少的標(biāo)本驗(yàn)證參比儀器的準(zhǔn)確度，加大兩臺(tái)儀器的直接比對(duì)樣本，可以節(jié)省工作量,比對(duì)結(jié)果能反映兩臺(tái)儀器測(cè)定結(jié)果的可比性，比對(duì)結(jié)果可靠。隨著各個(gè)品牌的全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類室內(nèi)質(zhì)控品[14]以及室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)室間比對(duì)的應(yīng)用[15]，白細(xì)胞分類結(jié)果儀器間直接比對(duì)值得進(jìn)一步研究。

表4 人工分類與兩臺(tái)儀器檢測(cè)白細(xì)胞分類結(jié)果數(shù)據(jù)回歸分析