陳美紅，何雯娟，丘麗萍

（福建省立金山醫(yī)院 福建省立醫(yī)院南院檢驗(yàn)科，福建 福州 350028）

精液常規(guī)分析是一項(xiàng)評(píng)估男性生育能力、提供不育癥診斷和療效觀察的重要依據(jù),在臨床中越來(lái)越被重視[1-3]。人工顯微鏡分析方法是傳統(tǒng)的檢測(cè)方法，但手工分析檢測(cè)項(xiàng)目有限，不能很好地滿足臨床需求，且由于檢驗(yàn)人員的主觀性，缺少量化的判斷指標(biāo)，重復(fù)性較差，差異較大[4]。隨著標(biāo)本量的增加，工作量大，效率低，不宜大批量作業(yè)，給臨床男性不育癥的診治和科研工作帶來(lái)一定的困難。隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷提高，計(jì)算機(jī)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用,計(jì)算機(jī)輔助分析精液質(zhì)量逐步應(yīng)用于男性不育癥的檢測(cè)中[5]。目前，我院引進(jìn)了一臺(tái)上海BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀，通過(guò)對(duì)精子圖像的分析，記錄精子的運(yùn)動(dòng)軌跡，獲得標(biāo)本的精子濃度、精子存活率和精子總活力等數(shù)據(jù)，并輔助檢驗(yàn)人員進(jìn)行精子形態(tài)學(xué)統(tǒng)計(jì)，具有準(zhǔn)確、客觀、快速等優(yōu)點(diǎn)[6]。本文通過(guò)對(duì)BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀與人工顯微鏡法檢測(cè)的主要參數(shù)進(jìn)行比較分析，探討B(tài)EION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀的臨床實(shí)用性[7]。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 取自2017年1月至2017年10月本院泌尿外科門診患者的精液，年齡25～45歲，平均年齡(33±5)歲，除去無(wú)精癥患者和無(wú)活動(dòng)精子標(biāo)本，隨機(jī)抽取210例精液標(biāo)本分別同時(shí)用BEION S 3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀和人工顯微鏡進(jìn)行檢測(cè)。

1.2 儀器與試劑 上海BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀；儀器配套一次性精子計(jì)數(shù)板；日本奧林巴斯CKX53倒置相差顯微鏡；人工檢測(cè)用Makler精子計(jì)數(shù)板。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本的采集 患者禁欲3～7d后，用手淫法（不能使用避孕套）將一次性射出的精液直接排入廣口有刻度的精液容器內(nèi)，立即送檢，置于37℃溫箱內(nèi)溫育 30～60min，待精液液化后檢測(cè)[8，9]。

1.3.2 人工顯微鏡分析 待精液液化后嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的標(biāo)準(zhǔn)和方法進(jìn)行分析[10]。

1.3.3 BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀分析 同一份標(biāo)本同步嚴(yán)格按照BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀操作手冊(cè)進(jìn)行分析。

1.3.4 重復(fù)性分析 以顯微鏡測(cè)定的精子濃度為標(biāo)準(zhǔn)，選取檢測(cè)結(jié)果從低到高的4份標(biāo)本，在BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀上分別重復(fù)計(jì)數(shù)5次，計(jì)算均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。

1.3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各檢測(cè)指標(biāo)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。兩種方法檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性用散點(diǎn)圖和回歸方程表示。采用wilcoxon秩和檢驗(yàn)對(duì)兩種方法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。以α＝0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種方法測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性分析 分別以人工顯微鏡法檢測(cè)的精子濃度、精子存活率和精子總活力的結(jié)果為X軸，以BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀的結(jié)果為Y值，將所有結(jié)果作散點(diǎn)圖，進(jìn)行相關(guān)性分析[11]。得出相關(guān)系數(shù)r分別為0.996，0.967，0.983，P 值均<0.05，見圖 1、圖 2、圖 3，結(jié)果表明二者相關(guān)性良好。

圖1 BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀與顯微鏡精子濃度相關(guān)性分析

圖2 BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀與顯微鏡精子存活率相關(guān)性分析

2.2 兩種方法測(cè)定結(jié)果的比較分析 兩者測(cè)定結(jié)果比較P值均>0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

2.3 重復(fù)性

2.3.1 標(biāo)本分組 按照顯微鏡檢測(cè)得出的精子濃度對(duì)標(biāo)本進(jìn)行分組。其中，精子濃度在分組(20～100)×106/ml之間標(biāo)本例數(shù)最多。見表2。

圖3 BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀與顯微鏡精子總活力相關(guān)性分析

表1 BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀與人工顯微鏡檢測(cè)結(jié)果的比較

表2 精子濃度分組

2.3.2 重復(fù)性分析 在各濃度分組內(nèi)分別隨機(jī)選取一份標(biāo)本在BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀上重復(fù)測(cè)定5次，精子濃度、精子存活率和精子總活力的重復(fù)性均良好,CV均小于15%,見表3。

3 討論

目前,男性不育診斷、治療和研究的一項(xiàng)基本檢查是精液分析,而計(jì)算機(jī)精液分析儀正逐步廣泛地應(yīng)用于臨床。評(píng)估男性生育能力的重要參考指標(biāo)是精子濃度、精子存活率和A+B級(jí)精子總活力，其檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量保證與臨床效果息息相關(guān)[12]。傳統(tǒng)的人工顯微鏡分析方法因檢測(cè)者的經(jīng)驗(yàn)不同及技術(shù)水平差異等人為因素，難以標(biāo)準(zhǔn)化，給臨床和研究帶來(lái)不利影響[13]。如今，隨著臨床標(biāo)本量的增多，操作繁瑣，工作量大，人工顯微鏡法逐步被計(jì)算機(jī)精液分析儀代替。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外研制的采用電-光學(xué)設(shè)計(jì)且可定量評(píng)估男性精液的計(jì)算機(jī)精液質(zhì)量分析儀，能更好地服務(wù)于臨床[14]。

表3 BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀的重復(fù)性分析

本文結(jié)果表明,BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀檢測(cè)的主要參考指標(biāo)精子濃度、精子存活率、精子總活力的結(jié)果CV均小于15%，有較好的重復(fù)性,避免了精液常規(guī)分析因技術(shù)人員水平和實(shí)驗(yàn)室條件等原因造成的誤差。通過(guò)對(duì)比分析BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀與人工顯微鏡分析法的結(jié)果，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說(shuō)明兩者具有良好的一致性[15]。但是，計(jì)算機(jī)精液分析儀測(cè)定精子濃度的準(zhǔn)確性和精子總活力受精液中細(xì)胞成分和非精子顆粒物質(zhì)的影響。而且計(jì)算機(jī)精液分析儀分析精子形態(tài)特征，只能按精子頭部大小來(lái)定，導(dǎo)致計(jì)算機(jī)精液分析儀精子濃度計(jì)數(shù)偏高、畸形率偏低的不足[16]。然而，BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀具有人工修正的功能，可降低該誤差。且在精子濃度大于200×106/ml時(shí),可進(jìn)行手工稀釋上機(jī)檢測(cè)，按稀釋比例換算檢測(cè)結(jié)果，使檢測(cè)結(jié)果具有更好的準(zhǔn)確性和客觀性,為臨床和研究提供了更為科學(xué)的依據(jù)。

綜上所述，BEION S3全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀能客觀反映精液質(zhì)量與生育能力的情況,且能實(shí)現(xiàn)分析過(guò)程的自動(dòng)化控制,操作簡(jiǎn)便快速、直觀實(shí)用，提高了實(shí)驗(yàn)室的診斷水平，是值得在臨床上推廣使用的。