賈曉韓，李曉菁，宋立琴，張立彬，楊越冬*

(河北科技師范學(xué)院，河北秦皇島 066004 1.化學(xué)工程學(xué)院；2.園藝科技學(xué)院；3.研究生部；4.河北省天然產(chǎn)物活性成分與功能重點實驗室)

黑果腺肋花楸(Aroniamelanocarpa)為薔薇科腺肋花楸屬落葉灌木。其果實為漿果，球形，果皮紅紫色，果肉暗紅色，單果重1～2g，果徑1.4cm[1,2]，酸甜略帶澀味；營養(yǎng)豐富，含有膳食纖維、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖類、有機酸、酚類和大量微量元素[3]，含有豐富的黃酮類化合物，主要以花色苷、槲皮素及其衍生物為主，有良好的食用和藥用價值[4]；富含黃酮類、有機酸類、三萜類和甾醇類等化學(xué)成分，抗氧化劑含量高、有顯著的保健功能，對心血管疾病具有很好的療效[5]。目前對黑果腺肋花楸的研究主要以種植[6]及果酒釀造[7]等方面較多，其營養(yǎng)成分及功能性成分研究較少。

歐李[Cerasushumilis(Bge.) Sok.]為薔薇科櫻屬多年生落葉小灌木，具有抗寒、耐旱、耐瘠薄、適應(yīng)性強等特性，有較強的生態(tài)價值[8]。果實顏色鮮艷，氣味清新宜人，果肉酸甜可口，風(fēng)味獨特，種仁為傳統(tǒng)藥材郁李仁[9],果肉中鈣含量居水果之首，又稱為“鈣果”。還含有豐富的維生素、微量元素、多酚、黃酮等物質(zhì)[10]。筆者采用凱氏定氮法和全自動氨基酸分析儀測試了黑果腺肋花楸和歐李中的粗蛋白、水解氨基酸含量；采用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀測定了兩種果實中的礦質(zhì)元素含量，為兩種果品的生產(chǎn)加工及營養(yǎng)成分分析提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品處理

黑果腺肋花楸、歐李鮮果，采自于河北科技師范學(xué)院園藝科技學(xué)院科研基地。鮮果多汁不宜保存，故采用烘干樣品進行測定。鮮果處理：鮮果→淋洗→瀝水→55℃烘干→粉碎→過篩(60目)→備用。

1.2 試劑與儀器

17種混合氨基酸標準液、6mol/L鹽酸、濃硝酸、茚三酮溶液(美國通用電氣公司)、超純水、定性濾紙、0.45μm水相濾膜、高純氬氣(≥99.99%)、礦質(zhì)元素標準品溶液。

全自動氨基酸分析儀Biochrom 30型(美國通用電氣公司)，ICP-OES電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀Optima 2100DV型(美國鉑金埃爾默公司)，電熱鼓風(fēng)干燥箱GZX-9240 MBE(上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)，高速多功能粉碎機CS-2000型(永康市天祺盛世工貿(mào)有限公司)，分析天平ME204E型(上海梅特勒-托利多儀器有限公司)。

1.3 儀器參數(shù)設(shè)置

全自動氨基酸分析儀參數(shù)設(shè)置：離子交換柱4.6mm×20cm；柱溫46℃、50℃、97℃；可見光檢測器波長570nm、440nm；檸檬酸和檸檬酸鈉緩沖液流動相流速35mL/h；茚三酮流速25mL/h；分析時間50分鐘。

電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀參數(shù)設(shè)置：射頻功率1300W；等離子體氬氣流量15L/min；輔助氣流量0.2 L/min；霧化器氬氣流量0.8L/min；進樣速率1.5 mL/min；觀測方式為軸向觀測背景校正2點。

1.4 試驗方法

粗蛋白樣品制備。采用國家標準GB5009.5-2016[11]進行樣品制備。采用凱氏定氮法(K-6.25)測粗蛋白含量。精確稱取黑果腺肋花楸和歐李干燥粉末各0.2000g置于消化管中，再加入0.4g硫酸銅，6g硫酸鉀及20mL硫酸于消化爐進行消化。當消化爐溫度達到420℃之后，繼續(xù)消化1小時，此時消化管中的液體呈綠色透明狀，取出冷卻后加入50mL水，于自動凱氏定氮儀上實現(xiàn)自動加液、蒸餾、滴定和記錄滴定數(shù)據(jù)的過程。

水解氨基酸樣品制備。根據(jù)文獻[12]修改如下：準確稱取0.1000g黑果腺肋花楸和歐李粉末置于消化管中，加入6mol/L的HCl溶液10mL，然后充氮氣，蓋緊管蓋；置于105℃電熱鼓風(fēng)干燥箱中水解24小時；取出用超純水定容至50mL；將待測樣品與10%磺基水楊酸按體積比4∶1比例混合，于2～8℃下放置6分鐘，以8000r/min轉(zhuǎn)速離心10分鐘，取上清液過0.45μm水膜，采用全自動氨基酸分析儀測試。

礦質(zhì)元素樣品制備。精確稱取處理好的黑果腺肋花楸和歐李干燥粉末各0.2000g，加入消化管中(注：加樣品時直接送入管底，避免沾到管口或管頸上)，然后各加5mL濃硝酸，蓋好管蓋放到微波消解儀中進行消解，取出用超純水定容至25mL容量瓶中，過濾到接樣瓶中，最后用ICP-OES電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀進行測定。做2組空白對照，每組實驗平行測定3次。測定鈣(Ca)、鎂(Mg)、鐵(Fe)、鋅(Zn)、錳(Mn)、銅(Cu)、鉛(Pb)、鎘(Cd)、鎳(Ni)、砷(As)、鉻(Cr)元素含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 粗蛋白/水解氨基酸含量分析

黑果腺肋花楸和歐李中的粗蛋白含量分別5.20%和4.82%，黑果腺肋花楸中粗蛋白含量高于歐李。兩種果實中均存在16種水解氨基酸，其中有6種必需氨基酸，均未檢測到色氨酸(表1)。

注：“*”為必需氨基酸。

水解氨基酸總量分別為6.95g/100g和2.61g/100g；必需氨基酸總量分別為2.75g/100g和1.19g/100g，分別占總水解氨基酸的39.57%和45.59%。

黑果腺肋花楸的賴氨酸含量最高(0.81g/100g)，占總水解氨基酸的11.65%；歐李的組氨酸含量最高，為0.32g/100g，占總水解氨基酸的12.26%。歐李果實必需氨基酸中纈氨酸、異亮氨酸和亮氨酸的含量都是0.25g/100g，均占總水解氨基酸的9.58%；蘇氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸的含量相差不大。

2.2 礦質(zhì)元素含量分析

由表2可見，黑果腺肋花楸和歐李中總礦質(zhì)元素含量分別為5353.09mg/kg、3536.23mg/kg。黑果腺肋花楸和歐李中常量元素Ca、Mg的含量較高。Ca元素含量，歐李為2686.11mg/kg，黑果腺肋花楸為3935.19mg/kg，約是歐李鈣元素含量的1.5倍。Mg元素含量也較為豐富，黑果腺肋花楸和歐李中Mg的含量分別為1271.83mg/kg和759.64mg/kg。

表2 黑果腺肋花楸和歐李礦質(zhì)元素含量

注：“-”表示未檢測到。

黑果腺肋花楸和歐李中微量元素種類較為豐富，分別占總礦質(zhì)元素含量的2.73%和2.56%。其中Fe、Zn、Mn、Cu的含量較高，黑果腺肋花楸中未檢測到Pb和Cd的存在。

3 小結(jié)

黑果腺肋花楸的粗蛋白含量高于歐李的粗蛋白含量。兩種果實中均存在16種水解氨基酸，均含有6種必需氨基酸，未檢測出色氨酸；黑果腺肋花楸中賴氨酸的含量高，歐李中組氨酸的含量高。兩種果實中礦質(zhì)元素含量豐富，Ca含量均為最高，黑果腺肋花楸的Ca含量高于歐李的。Mg、Fe、Zn、Mn、Cu的含量相對較高，歐李中Pb、Cd、Ni、As、Cr的含量比黑果腺肋花楸高。