辜正策 劉曉未 鄧小婧 劉欣 李璐池

【摘 ?要】目的：討論HE染色在病理診斷中的應(yīng)用，更好的支撐臨床診治。方法：選取2019年1月-2019年12月在我院進(jìn)行病理檢查的組織標(biāo)本268例作為研究對(duì)象，根據(jù)染色方法的不同將其分為HE染色普通組和HE染色改進(jìn)組，對(duì)兩組標(biāo)本的優(yōu)片率和病理檢查結(jié)果的準(zhǔn)確率進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果：HE染色改進(jìn)組的優(yōu)片率（97.02%）和病理診斷結(jié)果準(zhǔn)確率（97.02%）均大于HE染色普通組的優(yōu)片率（89.96%）和病理診斷結(jié)果準(zhǔn)確率（90.29%）（P<0.05）。結(jié)論：病理診斷是臨床輔助診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，改進(jìn)HE染色技術(shù)能有效提高切片質(zhì)量，保證檢查結(jié)果準(zhǔn)確性，更好的服務(wù)于臨床。

【關(guān)鍵詞】HE 染色;病理診斷;技術(shù)改進(jìn)

【中圖分類號(hào)】R361??????【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A??????【文章編號(hào)】1672-3783（2020）03-0272-02

臨床上，病理診斷以準(zhǔn)確性高而被臨床醫(yī)生所信賴。研究與實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，病理診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性與送檢組織所制成的切片的染色技術(shù)具有密切聯(lián)系^[1]。而實(shí)際操作過(guò)程中，HE染色技術(shù)的影響因素有很多，如標(biāo)本固定時(shí)間不夠，大標(biāo)本沒(méi)有切開(kāi)固定，取材過(guò)厚導(dǎo)致組織脫水不徹底，試劑濃度差異以及溫度的改變等，任何一個(gè)細(xì)小環(huán)節(jié)都會(huì)對(duì)切片質(zhì)量產(chǎn)生嚴(yán)重影響，進(jìn)而增加后期病理醫(yī)師的診斷難度，因此HE染色是病理檢查的關(guān)鍵步驟。本次研究對(duì)我院的268例組織標(biāo)本進(jìn)行回顧性分析以探討HE染色技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 ?參與研究的268例標(biāo)本從我院2019年1月-2019年12月接收的組織標(biāo)本中選取，將其分為A組（HE染色普通組）和B組（HE染色改進(jìn)組），每組134例。兩組均包含胃腸鏡活檢組織58例，膽囊闌尾組織25例，骨髓組織9例，脂肪組織18例，子宮內(nèi)膜組織24例。分別對(duì)兩組標(biāo)本進(jìn)行普通HE染色和改進(jìn)后HE染色，對(duì)兩組標(biāo)本的不同組織優(yōu)片率和總體優(yōu)片率以及不同組織病理診斷結(jié)果準(zhǔn)確率和總體病理檢查結(jié)果準(zhǔn)確率進(jìn)行對(duì)比分析。

1.2方法

1.2.1研究方法 ?選取2019年1月-2019年12月我科室接收的268例病理組織為研究對(duì)象，按照染色方法的不同將其分為A組（HE染色普通組）和B組（HE染色改進(jìn)組），比較兩組標(biāo)本的優(yōu)片率和病理檢查結(jié)果的準(zhǔn)確率。

1.2.2實(shí)驗(yàn)方法

A組（HE染色普通組）：（1）使用TO透明液（主要成分為二甲苯）三缸進(jìn)行脫蠟，每缸5min。（2）用一定濃度梯度的乙醇（依次為無(wú)水酒精、95%酒精、85%酒精、75%酒精）脫二甲苯，每缸約15s，隨后熱水燙片后自來(lái)水沖洗。（3）在蘇木素中染色5-10min后流水沖洗。（4）經(jīng)1%鹽酸酒精分化1-5s后充分水洗。（5）伊紅染色10-20s后流水沖洗。（6）依次經(jīng)85%酒精、95%酒精、無(wú)水酒精脫水后吹干，用中性樹膠封片，貼好標(biāo)簽。

B組（HE染色改進(jìn)組）：（1）針對(duì)標(biāo)本大小不同，性質(zhì)各異采取不同的固定方式，取材過(guò)程合理合規(guī)，盡量取到病變組織，同時(shí)控制好所取組織厚度，保證充分脫水，骨髓組織要充分脫鈣。（2）包埋，切片過(guò)程中避免污染，所選切片應(yīng)無(wú)皺褶、刀痕、厚薄適宜。（3）合理優(yōu)化染色步驟，如適當(dāng)延長(zhǎng)烤片時(shí)間，把握好鹽酸分化時(shí)間以及根據(jù)溫度，濃度不同調(diào)整蘇木素著色時(shí)間。（4）HE染色法中蘇木精為堿性染液，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染液，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著色。染色后應(yīng)保證細(xì)胞核呈藍(lán)色，粘液為灰藍(lán)色，鈣鹽顆粒、軟骨基質(zhì)為深藍(lán)色，細(xì)胞間質(zhì)染成桃紅色，粉紅色等，胞質(zhì)中嗜酸性顆粒細(xì)胞染成鮮紅色，一般情況下，彈力纖維呈現(xiàn)亮粉紅色，膠原纖維呈現(xiàn)淡粉紅色，紅細(xì)胞呈現(xiàn)橘紅色^[2]。最后在顯微鏡下觀察染色結(jié)果。

1.3觀察指標(biāo) ?對(duì)A、B兩組標(biāo)本的優(yōu)片率及病理診斷結(jié)果的準(zhǔn)確率進(jìn)行對(duì)比分析。

1.4數(shù)據(jù)處理 ?所得結(jié)果用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，當(dāng)P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

研究結(jié)果顯示，B組（HE染色改進(jìn)組）的優(yōu)片率和病理診斷結(jié)果準(zhǔn)確率均顯著高

于A組（HE染色普通組），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），詳見(jiàn)表1、表2。

3 討論

臨床病理診斷為臨床診治的重要輔助手段，可以為醫(yī)生診斷治療提供直觀科學(xué)的依據(jù)，組織染色質(zhì)量的好壞直接決定診斷結(jié)果及治療方案的確定，因此提供優(yōu)質(zhì)的組織切片有著積極意義。一張優(yōu)質(zhì)的組織切片除了需要厚薄均勻完整，無(wú)皺褶及刀痕外，同時(shí)受到染色技術(shù)的影響。 而實(shí)際操作過(guò)程中，影響HE染色結(jié)果的因素有很多，從取材到脫水，包埋，切片，染色，每一環(huán)節(jié)都起到關(guān)鍵作用。最好根據(jù)不同標(biāo)本類型，選擇對(duì)應(yīng)的方法，盡量不改變組織結(jié)構(gòu)，確保組織形態(tài)能在顯微鏡下得到最好體現(xiàn)。染色的質(zhì)量很大程度上是由細(xì)胞核的染色質(zhì)量決定的，這是化學(xué)物理一起作用完成的。大部分是由于組織內(nèi)部有非常多的微小細(xì)孔，在染料逐步滲透以后，與組織結(jié)合緊密，之后發(fā)生溶解擴(kuò)散，使不同的成分呈現(xiàn)不同的顏色^[3]。 在本次研究中，通過(guò)對(duì)HE染色改進(jìn)前和改進(jìn)后的染色結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)通過(guò)優(yōu)化從最初取材到最終封片間的每一個(gè)步驟能有效改進(jìn)染色效果，從而提高病理診斷準(zhǔn)確率。

總而言之，在病理診斷中病理技術(shù)HE染色扮演著至關(guān)重要的角色，為了更好的提升切片質(zhì)量，提高病理診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，我們?nèi)孕枰獙?duì)HE染色進(jìn)行不斷研究和探索，更好的改進(jìn)染色技術(shù)，為后期的臨床診斷和治療提供更有力的支持。

參考文獻(xiàn)

[1] 薛曉偉，王德田，張煜涵，陳龍?jiān)?，王馨梅，李星? Dako Coverstainer全自動(dòng)HE染色封片系統(tǒng)對(duì)提高常規(guī)病理染色均一性的作用[J]. 診斷病理學(xué)雜志，2017，24（01）：70-71.

[2] 王素蓮. 病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用分析[J]. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2019，19（57）：74+76.

[3] 冉志遠(yuǎn)，寧浩勇，康筱玲，劉路錄，孟宇宏. 全自動(dòng)染色膠片封片機(jī)在常規(guī)病理染色中的應(yīng)用體會(huì)[J]. 診斷病理學(xué)雜志，2014，21（02）：121-122.