向超宗，楊小慶

（1.重慶大學(xué)城市科技學(xué)院，重慶 402167；2.重慶工商職業(yè)學(xué)院智能制造與汽車學(xué)院，重慶 401520）

運(yùn)動(dòng)員在日常訓(xùn)練或重大賽事中，都要進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間高強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)，不可避免地會(huì)引起疲勞，為了防止長(zhǎng)期過度疲勞給運(yùn)動(dòng)員造成不可逆的身體損傷，使其保持良好的運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，緩解或消除疲勞已成為一項(xiàng)重要課題[1]。近年來，人們不斷尋找具有抗疲勞作用的活性物質(zhì)，已經(jīng)研發(fā)出多種相關(guān)的功能性食品、藥品、保健品，探索更加安全、可靠、有效的產(chǎn)品成為這一領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。研究食用菌多糖的抗運(yùn)動(dòng)性疲勞作用，分析其作用機(jī)制，為開發(fā)具有抗疲勞功效的產(chǎn)品提供了理論和試驗(yàn)依據(jù)。

1 概述

1.1 杏鮑菇多糖

杏鮑菇（Pleurotus eryngii），口味鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富，在日常生活中廣受歡迎[2]。杏鮑菇中富含蛋白質(zhì)、糖類、膳食纖維和礦物質(zhì)元素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其中多糖含量較高，顏明娟等[3]測(cè)得其含量為6.3%；范文秀等[4]測(cè)定結(jié)果為5.91%。杏鮑菇多糖具有多種生理活性，如降血脂、抗病毒等，此外還有清除自由基、促進(jìn)腸胃消化的功能[2]。

1.2 運(yùn)動(dòng)性疲勞

運(yùn)動(dòng)性疲勞是指在運(yùn)動(dòng)過程中或運(yùn)動(dòng)后產(chǎn)生的身體疲勞狀況，導(dǎo)致身體機(jī)能不能維持在特定水平或不能維持原本的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度[5-6]。研究發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)性疲勞的發(fā)生機(jī)制有以下4種：疲勞物質(zhì)的大量積累；能源物質(zhì)的過度消耗；相關(guān)物質(zhì)生化狀態(tài)的改變；代謝調(diào)控失調(diào)?？蛊诰褪茄泳彯a(chǎn)生疲勞或加快消除疲勞[5-7]。有效抗疲勞能夠幫助運(yùn)動(dòng)員調(diào)整身體狀況，提升運(yùn)動(dòng)效果和運(yùn)動(dòng)能力，所以，對(duì)抗運(yùn)動(dòng)性疲勞機(jī)制的研究十分必要。

2 材料與方法

2.1 材料試劑及儀器

試劑：杏鮑菇，上海農(nóng)科院食用菌研究所提供。血乳酸含量（LA）、超氧化物歧化酶（SOD）、肝糖原含量（HG） 測(cè)定試劑盒，南京建成生物工程研究所提供。

儀器：DGSY-Ⅲ電熱恒溫水浴鍋，北京市意成科技開發(fā)公司；FA2004分析天平，上海上平儀器有限公司；TGL-16A高速臺(tái)式離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；FD-1A-50冷凍干燥機(jī)，北京博醫(yī)康技術(shù)公司；JD-XSC型小鼠恒溫游泳池，上海繼德教學(xué)實(shí)驗(yàn)器械廠；752型紫外可見光分光光度計(jì)，上海光譜儀器有限公司；DY89-Ⅱ型電動(dòng)玻璃勻漿機(jī)，寧波新芝生物科技股份有限公司。

2.2 方法

2.2.1 多糖的提取

稱取新鮮杏鮑菇3 kg～5 kg，記錄準(zhǔn)確質(zhì)量，預(yù)處理后切成薄片，加入20倍體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇，煮3 h，注意攪拌；擠壓使液體濃縮至2 000 mL，過濾，取濾液加入4倍體積95%乙醇，沉淀；抽濾，取沉淀物溶于1 000 mL蒸餾水中，用Sevage法去蛋白；取上層液加入4倍體積95%乙醇，抽濾后將沉淀物在低溫下干燥，得杏鮑菇多糖[8-9]。

2.2.2 分組與給藥

將32只小鼠隨機(jī)分為4組，每組8只，分別為對(duì)照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組。對(duì)照組以生理鹽水灌胃，其余3組以杏鮑菇的多糖溶液灌胃，劑量分別為 50 mg·kg-1d-1、100 mg·kg-1d-1、200 mg·kg-1d-1，連續(xù)灌胃 15 d[9]。

2.2.3 爬桿試驗(yàn)

②強(qiáng)化管理機(jī)制，實(shí)施精細(xì)化管理。編制《北京市生態(tài)清潔小流域建設(shè)管理辦法》，規(guī)范全過程管理；編制《生態(tài)清潔小流域制圖手冊(cè)》《水土保持概估算編制規(guī)定》，規(guī)范前期工作；編制《北京市生態(tài)清潔小流域施工質(zhì)量評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)》，規(guī)范施工管理；編制《北京村鎮(zhèn)治污設(shè)施運(yùn)行管理指導(dǎo)意見》，規(guī)范后期管護(hù)。強(qiáng)化農(nóng)民參與機(jī)制，制訂《生態(tài)清潔小流域建設(shè)農(nóng)民參與指導(dǎo)意見》，明確農(nóng)民是生態(tài)清潔小流域建設(shè)主體、管理主體、受益主體，促進(jìn)農(nóng)民從“項(xiàng)目前期、工程實(shí)施、后期管護(hù)”三個(gè)環(huán)節(jié)全過程參與生態(tài)清潔小流域建設(shè)工作，實(shí)現(xiàn)了水土保持工作“零距離”服務(wù)農(nóng)民。

各組末次灌胃30 min后，將小鼠放在有機(jī)玻璃棒上，使其處于肌肉靜力緊張狀態(tài)，記錄小鼠從放上玻璃棒開始至滑落的時(shí)間，第3次滑落后終止計(jì)時(shí)，以3次累計(jì)時(shí)間記為爬桿時(shí)間。

2.2.4 負(fù)重游泳試驗(yàn)

各組末次灌胃30 min后，在小鼠尾部系上5%體重的鉛墜，游泳箱中進(jìn)行負(fù)重游泳，水深35 cm，水溫（25±1.0）℃[10]，以人工驅(qū)趕小鼠不停游泳直至小鼠頭部完全沒入水中，且8 s～10 s不出水面為體力耗竭的判斷標(biāo)準(zhǔn)[11]。記錄小鼠從開始游泳至力竭的時(shí)間。

2.2.5 血清生化指標(biāo)測(cè)定

迅速撈出游泳力竭的小鼠，眼球取血，分離血清，分別按試劑盒法結(jié)合比色法測(cè)LA含量、SOD活性。

2.2.6 肝糖原含量測(cè)定

取血后，取出小鼠的肝臟，用生理鹽水漂洗3次，濾紙拭干后準(zhǔn)確稱量100 mg，加入5%三氯醋酸 （TCA）8 mL，制備成組織勻漿，3 500 r·min-1離心15 min，取上清液加入95%的乙醇4 mL，混勻后放置過夜使沉淀完全。然后3 500 r·min-1離心15 min，棄上清，放置10 min，溶于2 mL蒸餾水，蒽酮-比色法測(cè)HG含量。

2.2.7 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SPSS 16.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，多組間數(shù)據(jù)比較方差分析，2組間數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05時(shí)有顯著性差異。

3 結(jié)果

3.1 杏鮑菇多糖對(duì)小鼠爬桿時(shí)間的影響

杏鮑菇多糖對(duì)小鼠爬桿時(shí)間的影響見表1。

表1 杏鮑菇多糖對(duì)小鼠爬桿時(shí)間的影響Tab.1 Effect of Pleurotus eryngii polysaccharide on the time of mouse climbing stick

由表1可知，灌胃杏鮑菇多糖的3個(gè)試驗(yàn)組均比灌胃生理鹽水的對(duì)照組小鼠的爬桿時(shí)間長(zhǎng)，且有顯著性差異（P＜0.05），杏鮑菇多糖劑量越大，小鼠的爬桿時(shí)間的增加越明顯，高劑量對(duì)小鼠爬桿時(shí)間的增長(zhǎng)最大，延長(zhǎng)率為324.5%。由此可見，杏鮑菇多糖能夠延長(zhǎng)小鼠爬桿時(shí)間，緩解疲勞。

3.2 杏鮑菇多糖對(duì)小鼠力竭時(shí)間的影響

杏鮑菇多糖對(duì)小鼠力竭時(shí)間的影響見表2。

表2 杏鮑菇多糖對(duì)小鼠力竭時(shí)間的影響Tab.2 Effect of Pleurotus eryngii polysaccharide on the time of exhaustion in mice

由表2可知，相較于對(duì)照組而言，灌胃杏鮑菇多糖的試驗(yàn)組小鼠的力竭游泳時(shí)間均有所延長(zhǎng)，隨著杏鮑菇多糖劑量的增加，小鼠的游泳時(shí)間也依次增加，低劑量對(duì)游泳時(shí)間的增加效果不明顯，延長(zhǎng)了33.2%，高劑量能顯著增加小鼠游泳時(shí)間，延長(zhǎng)率達(dá)120.6%（P＜0.01）。由此可見，杏鮑菇多糖能夠延長(zhǎng)小鼠游泳時(shí)間，有一定的抗疲勞效果。

3.3 杏鮑菇多糖對(duì)血清生化指標(biāo)的影響

杏鮑菇多糖對(duì)血清生化指標(biāo)的影響見表3。

表3 杏鮑菇多糖對(duì)血清生化指標(biāo)的影響Tab.3 Effect of Pleurotus eryngii polysaccharide on serum biochemical indicators

由表3可知，與對(duì)照組相比，灌胃杏鮑菇多糖的3個(gè)試驗(yàn)組小鼠的LA含量降低，SOD活性增高，其中LA含量下降的程度隨杏鮑菇多糖劑量的增加而增大，說明杏鮑菇多糖能有效降低LA含量；SOD活性的升高隨杏鮑菇多糖劑量的增加越來越明顯，說明杏鮑菇多糖對(duì)提高SOD活性有一定效果。

3.4 杏鮑菇多糖對(duì)肝糖原含量的影響

杏鮑菇多糖對(duì)肝糖原含量的影響見表4。

表4 杏鮑菇多糖對(duì)肝糖原含量的影響Tab.4 Effect of Pleurotus eryngii polysaccharides on liver glycogen content

由表4可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組小鼠HG含量均明顯增加，HG含量隨杏鮑菇多糖劑量的增加而升高，高劑量組效果最為顯著。由此可見，杏鮑菇多糖有助于提高體內(nèi)HG含量水平。

4 結(jié)論

運(yùn)動(dòng)耐力的下降是疲勞最主要的表現(xiàn)，通常可以通過爬桿時(shí)間和游泳力竭時(shí)間的長(zhǎng)短表示運(yùn)動(dòng)耐力的強(qiáng)弱[12]。在爬桿試驗(yàn)和游泳試驗(yàn)中，低劑量組、中劑量組、高劑量組均比對(duì)照組小鼠的爬桿和游泳時(shí)間長(zhǎng)，以高劑量組時(shí)間延長(zhǎng)最為明顯。該結(jié)果表明，杏鮑菇多糖能夠增加小鼠的爬桿和力竭時(shí)間，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)耐力。

長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)動(dòng)會(huì)導(dǎo)致機(jī)體缺氧，從而進(jìn)行無氧代謝，產(chǎn)生大量乳酸。乳酸的堆積會(huì)破壞內(nèi)環(huán)境酸堿平衡，引起氫離子濃度升高，pH下降，并對(duì)肌肉收縮力和ATP的生成造成影響，是產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)性疲勞的主要原因之一[11-12]。試驗(yàn)中，試驗(yàn)組小鼠的乳酸含量與對(duì)照組相比降低明顯，表明杏鮑菇多糖能夠減少乳酸的堆積，對(duì)于消除疲勞有積極作用。在運(yùn)動(dòng)過程中，還會(huì)產(chǎn)生大量的氧自由基等代謝產(chǎn)物，氧自由基增多、脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強(qiáng)，造成對(duì)組織細(xì)胞的損傷，引起運(yùn)動(dòng)性疲勞。SOD是一種能夠有效清除自由基的特異性抗氧化酶，其活力的增強(qiáng)能加快自由基的清除，有助于阻斷脂質(zhì)過氧化，修復(fù)細(xì)胞，緩解疲勞[13]。試驗(yàn)組SOD活性高于對(duì)照組，表明杏鮑菇多糖能提高SOD活性，保護(hù)機(jī)體免受運(yùn)動(dòng)性損傷。

糖類是主要能源物質(zhì)，劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)，血糖水平迅速降低，葡萄糖氧化供能過程受阻，此時(shí)主要依靠肌糖原和肝糖原分解產(chǎn)生葡萄糖，釋放入血液中，維持血糖濃度[5]。當(dāng)血糖濃度急劇下降時(shí)，肝糖原和肌糖原被大量消耗，不能滿足能量需求，就會(huì)產(chǎn)生疲勞。高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)時(shí)，肝糖原可以為肌肉和神經(jīng)系統(tǒng)供能，這可能是肝糖原含量增加能夠抗疲勞的原因。試驗(yàn)中試驗(yàn)組小鼠的肝糖原含量明顯比對(duì)照組高，說明杏鮑菇多糖對(duì)于維持運(yùn)動(dòng)力竭后肝糖原水平有一定作用。

綜上所述，杏鮑菇多糖的抗運(yùn)動(dòng)性疲勞機(jī)制可能是通過調(diào)整體內(nèi)激素代謝，清除氧自由基等代謝產(chǎn)物，減少乳酸的積累，增加肝糖原的儲(chǔ)備，將疲勞對(duì)機(jī)體的損傷程度降至最低。故杏鮑菇多糖可以增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)耐力，提升其抗疲勞能力，使其自身素質(zhì)和運(yùn)動(dòng)能力得以提升，發(fā)揮出最佳水平。