李國華 羅敏 楊蕊珊 邵秀敏 黃錦華 劉麗婷 袁慧珍（通訊作者）

（1 廣東省東莞市清溪醫(yī)院 廣東 東莞 523660）

（2 廣東省東莞市人民醫(yī)院 廣東 東莞 523059）

維生素K 是凝血因子活化的關(guān)鍵酶，它通過胎盤的轉(zhuǎn)運(yùn)少，母乳含量低，新生兒生后易發(fā)生出血癥（VKBD）而導(dǎo)致臟器出血，目前新生兒生后常規(guī)注射維生素K1 預(yù)防VKDB，但因國內(nèi)缺乏新生兒血中維生素K 含量的參考值范圍，所有新生兒均注射維生素K 是否合適？加上各醫(yī)院注射劑量各有不同，有待于進(jìn)一步規(guī)范和統(tǒng)一[1]。采用流行病學(xué)調(diào)查方法，收集東莞市清溪醫(yī)院新生兒臍帶血1000 例，檢測(cè)血中維生素K 濃度，計(jì)算正常新生兒臍帶血維生素K 參考值范圍，分析與胎齡、BMI 及血脂等因素的相關(guān)性，探討臍帶血維生素K 濃度的影響因素。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年1 月—2020 年1 月東莞市清溪醫(yī)院兒科新生兒1000 例，其中男性560 例（56.0%），女性440 例（44.0%），胎齡34 ～40 周，平均（37.9±2.1）周；出生體重1.5 ～4.9kg，平均（3.2±1.0）kg。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①無外觀可見的畸形；②孕母為單胎妊娠；③監(jiān)護(hù)人同意隨訪方案，并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①隨訪期間診斷有遺傳代謝性疾?。虎谛律鷥浩诖嬖邳S疸以外的病理情況；③觀察期間出現(xiàn)慢性腹瀉，肝膽系統(tǒng)疾病等影響脂溶性維生素吸收的疾??；④其他醫(yī)生認(rèn)為不適合繼續(xù)進(jìn)行研究的情況。

1.3 方法

維生素K 采用高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行檢測(cè)，檢驗(yàn)標(biāo)本為臍帶血，血液樣本采集于含有鋰肝素作為抗凝血?jiǎng)┑恼婵展苤?，離心后分離血漿，儲(chǔ)存在-80℃冰箱。試驗(yàn)當(dāng)天，樣品在室溫下解凍，取血漿250μl 和750μl 乙醇混合30s 后，在10000轉(zhuǎn)/min的室溫下離心5min，取上清液，加入環(huán)己烷進(jìn)行液液萃取，通過使用Synergl 4u Fusion-RP C18（2.1mm×100mm2.5μm）分離樣品，流動(dòng)相為蒸餾水和0.5%甲酸-甲醇，流速0.3ml/min，然后采用HPLC 方法檢測(cè)，對(duì)照高低限分別為0.2 和5.0μg/L，此方法檢測(cè)低限是0.2μg/L。

1.4 觀察指標(biāo)

（1）足月情況。分為早產(chǎn)、足月；（2）出生體重、孕母年齡及工作性質(zhì)、文化程度、居住現(xiàn)狀；（3）孕母綠色蔬菜食用量。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS24.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析處理，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，行t 檢驗(yàn)，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 臍帶血維生素K 濃度的影響因素分析

城鎮(zhèn)新生兒的VK1 水平顯著高于農(nóng)村新生兒（P ＜0.05），孕母綠色蔬菜食用量＜150g/d、150 ～250g/d、＞250g/d 新生兒的維生素K1 水平逐漸升高（P ＜0.05），但不同足月情況、出生體重、孕母年齡及文化程度、工作性質(zhì)的維生素K1 水平之間的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。見表1。

表1 臍帶血維生素K 濃度的影響因素分析（±s）

表1 臍帶血維生素K 濃度的影響因素分析（±s）

項(xiàng)目 分類 n VK1（ng/ml） t[F] P足月情況 早產(chǎn) 190 0.342±0.108 1.886 ＞0.05足月 810 0.278±0.045出生體重（g） ＜2500 90 0.136±0.023 1.638 ＞0.05 2500 ～3999 870 0.304±0.102≥4000 40 0.340±0.101孕母年齡（歲） ＜28 370 0.227±0.060 [1.533] ＞0.05≥28 630 0.328±0.102文化程度 小學(xué)及以下 10 0.082±0.012 [1.460] ＞0.05初中 250 0.090±0.011高中 30 0.132±0.020大專 320 0.150±0.020本科 140 0.166±0.029碩士及以上 250 0.185±0.125工作性質(zhì) 農(nóng)民 370 0.096±0.012 [1.476] ＞0.05工人 30 0.123±0.024職員 60 0.577±0.125居住現(xiàn)狀 城鎮(zhèn) 660 0.626±0.130 4.541 ＜0.05農(nóng)村 340 0.118±0.018綠色蔬菜（g/d） ＜150 320 0.091±0.013 [4.303] ＜0.05 150 ～250 510 0.281±0.043＞250 170 0.362±0.060

2.2 臍帶血維生素K 濃度的影響因素的多元線性回歸分析

多元線性回歸分析顯示，臍帶血維生素K 濃度的影響因素包括孕母年齡、綠色蔬菜（P ＜0.05），足月情況、文化程度、工作性質(zhì)、居住現(xiàn)狀（P ＞0.05）。見表2。

表2 臍帶血維生素K 濃度的影響因素的多元線性回歸分析

3.討論

維生素K 是一組脂溶性化合物的總稱，其基本結(jié)構(gòu)為一個(gè)2-甲基-14-萘醌環(huán)，因其第3 位的側(cè)鏈不同，可分為維生素K1、K2 和K3 三種主要形式，而沒有側(cè)鏈的K4 則為一種人工合成的形式。維生素K 是γ-谷氨酰羧化酶的輔酶，該酶是凝血因子Ⅱ、V Ⅱ、IX、X 活化的關(guān)鍵酶，對(duì)于維持正常的凝血功能及其重要[2]。此外，流行病學(xué)研究表明[3]，缺乏維生素K 也與骨骼和礦物質(zhì)異常有關(guān)。與維生素A、D、E 等其他脂溶性維生素不同的是，維生素K 在體內(nèi)的消耗及丟失很快，導(dǎo)致其血漿濃度以及體內(nèi)的儲(chǔ)存量比較少。雖然某些腸道細(xì)菌能合成維生素K 供人體需要，但維持維生素K 的正常代謝及生理功能仍在很大程度上依賴于食物中維生素K 的供應(yīng)[4]。由于母親血漿維生素K 濃度本身就比較低，加上維生素K 無特異性的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，導(dǎo)致維生素K 通過胎盤的轉(zhuǎn)運(yùn)受限，因而新生兒出生時(shí)血漿維生素K 濃度較低，而母乳，尤其是初乳中維生素K 的含量極低，不能滿足早期新生兒的需求。如果出生后未能及時(shí)給予維生素K 的補(bǔ)充，則有可能會(huì)出現(xiàn)維生素K 缺乏性出血（VKDB），甚至在部分有維生素K 缺陷和口服吸收不良的早產(chǎn)兒當(dāng)中，出生后很可能立即出現(xiàn)VKDB。

維生素K1 注射液在新生兒中應(yīng)用十分廣泛，但尚未有統(tǒng)一指南明確維生素K1 的用藥途徑及劑量，因而各醫(yī)院基本上都按照自己的常規(guī)劑量使用，臨床上因維生素K 使用不當(dāng)而導(dǎo)致嚴(yán)重過敏反應(yīng)，甚至過敏性休克的病例也時(shí)有發(fā)生。因此，明確新生兒臍帶血維生素K 的濃度，用于指導(dǎo)維生素K 的個(gè)體化應(yīng)用，或?yàn)橹朴喗y(tǒng)一的新生兒維生素K 應(yīng)用指南，具有很高的臨床實(shí)用價(jià)值。國內(nèi)外文獻(xiàn)表明，新生兒，尤其是早產(chǎn)兒發(fā)生維生素K 缺乏性出血的比例仍然比較高，對(duì)兒童的生命健康影響極大[5]。母乳中維生素K 的含量較低，因而國內(nèi)均采用出生后注射的方式補(bǔ)充維生素K，但目前仍缺乏統(tǒng)一的規(guī)范。我們前期的結(jié)果表明，臍帶血維生素K 濃度較低，需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量來驗(yàn)證這一理論。

綜上所述，新生兒臍帶血維生素K 濃度影響因素包括孕母年齡、綠色蔬菜，值得充分重視。