袁曉林

湖北省荊州市第五人民醫(yī)院 434020

重癥肌無力(Myasthenia gravis，MG)是一種自身免疫性疾病，它主要由神經(jīng)—肌肉接頭處傳遞功能障礙所引起[1]。目前，MG的致病原因尚不明確，但較多研究指出，MG可能與遺傳、感染、環(huán)境等因素有關(guān)。臨床上MG常伴有骨骼肌無力、易乏易疲勞等癥狀，在活動(dòng)后其癥狀更加明顯，但可隨休息后有所減輕。資料顯示，重癥肌無力患者中有65%～80%患者合并有胸腺增生，有10%～20%合并有胸腺瘤，嚴(yán)重影響患者的生命安全[2]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，抗皮動(dòng)蛋白(cortactin)、乙酰膽堿受體(Acetycholine receptors，AChR-Ab)及肌肉特異性酪氨酸激酶(Muscle specific tyrosine kinase，MuSK-Ab)抗體與MG均存在一定關(guān)系[3-4]?；诖?，本文探討血清cortactin、AChR-Ab及MuSK-Ab在不同病理中的表達(dá)情況，并分析其對MG的診斷價(jià)值，以期為臨床防治提供參考。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年8月—2018年12月本院收治的MG患者78例為MG組，其中胸腺病變的52例(胸腺組)，非胸腺病變者的26例(非胸腺組)；同期體檢健康者50例為健康對照組。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《重癥肌無力診斷和治療中國專家共識》[5](2012)診斷標(biāo)準(zhǔn)者，且經(jīng)MRI或CT檢查確診、病理學(xué)檢查等確定為MG者；(2)疲憊勞累表現(xiàn)明顯，但休息后可緩解；(3)新斯的明實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽性；(4)合并有胸腺病變者；(5)患者及其家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)嚴(yán)重心、肝、腎等功能障礙；(2)有智力或精神障礙不能配合本研究者。MG組中，男、女各為30、48例；年齡15～75歲，平均年齡(42.35±7.12)歲；病程1～3個(gè)月，平均病程2個(gè)月；體質(zhì)量指數(shù)(BMI)20～28，平均BMI 23.32±4.18。健康對照組中男、女各為18、32例，年齡17～74歲，平均年齡(42.13±7.25)歲；BMI 19～28，平均BMI 23.26±4.02。其中MG組中經(jīng)MRI檢查確定胸腺瘤有32例、胸腺增生32例、胸腺囊腫14例；根據(jù)Osserman分型，得出Ⅰ型有24例、ⅡA型有18例、ⅡB型有26例、Ⅲ+Ⅳ型有10例。各組基礎(chǔ)資料比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。本研究征得院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者均知情同意。

1.2 方法 采集受試者空腹肘靜脈血5ml進(jìn)行離心(3 000 r/min，10min)，分離血清，取上層血清-80℃保存?zhèn)錅y。cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab水平采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測(試劑盒供自Santa Cruz生物有限公司，美國)。AChR-Ab、MuSK-Ab分別以AChR、MuSK為抗原，在波長為490nm下進(jìn)行吸光度值測定。Cortactin抗體采用Western印跡法檢測。上述操作均遵循試劑說明嚴(yán)格進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 兩組cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab表達(dá)比較 MG組cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab的陽性表達(dá)均高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

2.2 MG組中cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab表達(dá)比較 胸腺組cortactin、AChR-Ab的陽性表達(dá)均高于非胸腺組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表1 兩組cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab表達(dá)比較[n(%)]

表2 MG組中cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab表達(dá)比較[n(%)]

2.3 cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab與MG病理參數(shù)的關(guān)系 cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab的陽性表達(dá)與MG的病理類型及Osserman分型有關(guān)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與MG患者的年齡、性別等無關(guān)(P>0.05)。見表3。

表3 cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab與MG病理參數(shù)的關(guān)系[n(%)]

3 討論

MG在臨床上已較常見，其致病原因尚不明確。近年來，關(guān)于MG的研究已經(jīng)日漸進(jìn)步，且已有較多研究發(fā)現(xiàn)，血清cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab與MG均存在一定關(guān)系。cortactin是位于細(xì)胞皮層的一種單體蛋白，它能夠與肌動(dòng)蛋白進(jìn)行結(jié)合，并促進(jìn)其聚合[6]。目前關(guān)于cortactin抗體的報(bào)道很少，但國外已有研究發(fā)現(xiàn)，MG患者中發(fā)現(xiàn)cortactin存在一定的陽性。且陳美秋等[7]報(bào)道指出，cortactin可通過干擾信號通路使運(yùn)動(dòng)終板上的AChR數(shù)量減少，從而導(dǎo)致患者肌無力。而AChR-Ab已被證實(shí)為MG的主要致病抗體，其作用機(jī)制主要表現(xiàn)為：AChR-Ab能與AChR進(jìn)行結(jié)合，促進(jìn)AChR的降解、破壞，從而減少AChR的數(shù)量，阻礙信號通路的傳導(dǎo)，進(jìn)而發(fā)生肌無力現(xiàn)象[8]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，AChR-Ab在MG患者中的陽性率較高，且在不同胸腺病理中，胸腺瘤的陽性率最高[9]。提示AChR-Ab對MG患者的臨床診斷均有一定價(jià)值。另外，MuSK為肌肉神經(jīng)源性蛋白受體的組成部分，其對神經(jīng)突觸具有重要意義。已有相關(guān)報(bào)道指出，MuSK-Ab的陽性患者多為正常，且在胸腺瘤中較為少見[10]。本文中，cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab在MG組患者中的陽性率均明顯高于健康者中，胸腺組患者中的陽性表達(dá)均高于非胸腺組。該結(jié)果說明，cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab在MG有陽性表達(dá)，均能作為MG的致病抗體。進(jìn)一步對cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab與MG病理參數(shù)的關(guān)系進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab的陽性表達(dá)與病理類型、Osserman分型有關(guān)，與年齡、性別無關(guān)。且cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab在胸腺瘤中均有較高表達(dá)。該結(jié)果中cortactin、AChR-Ab與上述結(jié)論相符，MuSK-Ab與上述結(jié)論不一致。分析原因可能與樣本數(shù)及檢測方法有關(guān)。另外MuSK-Ab在Osserman分型中Ⅲ+Ⅳ型具有較高表達(dá)，說明MuSK-Ab主要存在于MG臨床癥狀較重的患者中。

綜上所述，血清cortactin、AChR-Ab、MuSK-Ab抗體血清與MG具有一定關(guān)系，且AChR-Ab對MG患者具有較高的診斷價(jià)值，MuSK-Ab主要存在于MG臨床癥狀較重的患者中。本研究不足為樣本量偏小，仍有待進(jìn)一步行大樣本研究檢驗(yàn)。