田澍瑤，楊雨，胡玥，武志偉，張子卉，袁艷陽，李富桂

（天津農(nóng)學(xué)院 動物科學(xué)與動物醫(yī)學(xué)學(xué)院，天津 300384）

雞新城疫（Newcastle disease，ND）是由副粘病毒引起、感染率和致死率高、對養(yǎng)雞業(yè)危害嚴(yán)重的高度接觸性、急性、烈性傳染病[1-2]。最常用的預(yù)防方式是接種疫苗，為保證抗體效價達(dá)到期望的水平，疫苗常與免疫增效劑共同使用。免疫增效劑（immuneintensifiers）是一類具有增強(qiáng)疫苗保護(hù)力作用的物質(zhì)，可提高畜禽機(jī)體的特異性和非特異性免疫應(yīng)答能力，并有效控制畜禽疫病，保障畜牧業(yè)的健康發(fā)展[3-5]。應(yīng)用免疫增效劑可以縮短免疫接種后達(dá)到保護(hù)抗體水平的時間或提高疫苗的抗體效價以減少因疾病造成的損失。免疫增效劑在禽類養(yǎng)殖及疾病防治方面顯示出了越來越重要的作用[6-7]。為探究免疫增效劑對雞新城疫免疫效果的影響，本試驗選用常見的15種免疫增效劑進(jìn)行對比性試驗，以方便指導(dǎo)生產(chǎn)實踐中最適宜免疫增效劑的選擇。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物

160只23日齡健康、雄性北京油雞，之前免疫過新城疫凍干苗1次。

1.1.2 試驗試劑及免疫增效劑

雞新城疫（ND）抗原（批號 20180406），購自北京中海生物科技有限公司；雞轉(zhuǎn)移因子（批號180508），天津市瑞普生物技術(shù)有限公司出品；牛轉(zhuǎn)移因子（批號20180305），大連百利天華制藥有限公司出品；豬轉(zhuǎn)移因子（批號180501），天津市樂獅動保有限公司提供；貓干擾素（批號20180810），北京中科拜克生物技術(shù)有限公司出品；犬α干擾素（批號20180830），北京中科拜克生物技術(shù)有限公司出品；犬 γ 干擾素（批號20180709），北京中科拜克生物技術(shù)有限公司出品；康健靈（多糖）（批號20180604），廣西南寧大動保生物科技有限公司生產(chǎn)；枸杞（批號20180411），天津百奧泰科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)；靈芝（批號20180714），天津市東麗靈芝生產(chǎn)基地生產(chǎn)；黃芪注射液（批號20180205），正大青春寶藥業(yè)有限公司出品；靈芝孢子粉（批號20180804），天津市東麗靈芝生產(chǎn)基地生產(chǎn)；脂多糖（批號20180716），購自北京索萊寶科技有限公司；四合一（轉(zhuǎn)移因子＋胸腺肽＋干擾素＋免疫球蛋白）干擾素（批號 20180305）；1%雞紅細(xì)胞懸浮液，自制；ND-IB-EDS滅活油乳劑三聯(lián)苗（批號20180308），黑龍江生藥一廠出品。

1.2 試驗方法

首先對全部試驗雞進(jìn)行釆血，測定 ND抗體效價，然后在每只雞頸部皮下注射ND-IB-EDS滅活油乳劑三聯(lián)疫苗，并將160只試驗雞隨機(jī)分成16組，1-15組為試驗組給予不同的免疫增效劑1 mL，對照組口服等量生理鹽水。在給藥后第2、4、6、8、10、12、14、17、22、28天分別翅靜脈采血，分離血清，采用微量HI試驗檢測ND抗體效價，并用SPSS軟件進(jìn)行差異顯著性分析，與對照組比較其差異是否顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 免疫后各組的新城疫 HI抗體效價檢測結(jié)果及其差異顯著性分析

采用SPSS 20.0軟件對16組試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，比較試驗組與對照組抗體效價的差異性，0.01＜P＜0.05表示差異顯著（肩標(biāo)*），P＜0.01表示差異極顯著（肩標(biāo)**）。具體統(tǒng)計結(jié)果見表1。

表1 16組試驗雞的新城疫HI抗體效價顯著性分析

2.2 免疫后雞新城疫血凝抑制抗體效價變化結(jié)果

15種免疫增效劑在不同時間的 HI抗體效價變化見折線圖1和圖2。

圖1 7種免疫增效劑在不同時間ND HI效價變化折線圖

圖2 8種免疫增效劑在不同時間ND HI效價變化折線圖

2.3 結(jié)果分析

由圖表可知，15種免疫增效劑在早期（4-12 d）時均對雞 ND的免疫效果有增強(qiáng)作用[8-9]，抗體效價均高出1～2個HI抗體滴度。統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果表明：有 2種免疫增效劑在給藥后第四天、有 6種在給藥后第八天時與對照組相比均差異顯著。但從效果、價格及方便使用等方面綜合考慮，在養(yǎng)禽業(yè)生產(chǎn)實踐中建議使用雞轉(zhuǎn)移因子[10]。

3 討論

3.1 15種免疫增效劑的免疫效果比較

本試驗中，脂多糖、康健靈（多糖）＋靈芝孢子粉、雞轉(zhuǎn)移因子、四合一干擾素、豬轉(zhuǎn)移因子、犬γ干擾素和康健靈（多糖）對雞新城疫免疫具有良好的增強(qiáng)作用[11-12]，在第四天和第八天即差異顯著（0.01＜P＜0.05），高出對照組2個滴度左右并持續(xù)在高水平上；但到近第三周時抗體效價與對照組的差距在逐漸縮?。坏降谒闹軙r幾乎無差距。其他免疫增效劑雖然與對照組相比差異不顯著，但卻高于對照組1個效價滴度。說明這15種免疫增效劑均對ND疫苗有不同程度的免疫增效作用[13]。

3.2 免疫增效劑的臨床使用

免疫增效劑的使用既提高了疫苗對動物機(jī)體的保護(hù)率，又可以聯(lián)合抗生素等提高療效，同時減少應(yīng)激，還解決了疫苗和特異抗體應(yīng)用范圍窄的問題[7]。使用免疫增效劑的一系列優(yōu)點讓越來越多的免疫學(xué)家開始加強(qiáng)對免疫增效劑的研究，使其成為當(dāng)代免疫學(xué)研究的熱點之一。實踐證明，免疫增效劑具有快速簡便、經(jīng)濟(jì)實用等特點。目前，免疫增效劑廣泛應(yīng)用于免疫接種、疾病治療和抗應(yīng)激的生產(chǎn)實踐中[14]。通過15種免疫增效劑對新城疫免疫效果影響的對比性研究，了解了各種免疫增效劑的免疫效果。綜合考慮，在養(yǎng)雞業(yè)生產(chǎn)中，使用免疫增效劑可以快速升高抗體效價，建議在家禽養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)實踐中首選雞轉(zhuǎn)移因子，其他珍禽也可選擇脂多糖、康健靈（多糖）＋靈芝孢子粉和四合一干擾素等。研究結(jié)果證明，免疫增效劑與疫苗聯(lián)合應(yīng)用相較于單獨使用疫苗有顯著增強(qiáng)免疫效果的作用[15]。

3.3 試驗條件調(diào)整以減少誤差

為盡量減小試驗誤差，所有試驗雞的外界條件均一致，如飼喂、飲水，每隔1 d在每組內(nèi)采相同數(shù)量的血樣進(jìn)行抗體檢測。在微量 HI試驗過程中，每個凝集板上均設(shè)有矯正抗原和空白對照，以免判定結(jié)果出現(xiàn)誤差。