姜雯雯，宋雅偉，祁媚姣，李小娟，劉玉梅

(1.蘭州大學(xué)第二醫(yī)院 檢驗醫(yī)學(xué)中心，甘肅 蘭州 730030;2.蘭州市第二人民醫(yī)院 檢驗科，甘肅 蘭州 730030；3.甘肅省腫瘤醫(yī)院 醫(yī)院感染管理科，甘肅 蘭州 730050)

2型糖尿病腎臟疾病(T2DM-DKD)的病情進展較為隱匿，在高血糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷條件下，腎臟基底膜細(xì)胞的凋亡和纖維化，均能夠促進T2DM-DKD的發(fā)生，加劇T2DM-DKD患者遠(yuǎn)期腎功能的惡化[1-2]。通過對于T2DM-DKD的病情評估，能夠在T2DM-DKD的免疫治療過程中發(fā)揮作用。分子標(biāo)志物能夠在T2DM-DKD的診療過程中發(fā)揮作用，特別是炎癥因子的改變，能夠顯著影響到腎臟基底膜組織的損傷過程。中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白(NGAL)是中性粒細(xì)胞調(diào)控相關(guān)因子，其通過誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞酶的激活，加劇其對于腎小球濾過膜的損傷，導(dǎo)致尿蛋白的出現(xiàn)和腎功能的異常[3]；白細(xì)胞介素6(IL-6)或者腫瘤壞死因子α(TNF-α)是炎癥損傷因子，其對于下游炎癥信號通路的激活，能夠加劇腎小管或者腎小球的損傷，導(dǎo)致腎臟濾過功能的異常[4]。為了揭示IL-6、TNF-α及NGAL的表達與T2DM-DKD患者的病情關(guān)系，從而為臨床上T2DM-DKD的病情評估提供參考，本次研究選擇在我院治療的2型糖尿病患者180例，探討IL-6、TNF-α及NGAL的表達及其與T2DM-DKD患者的病情關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 2017年9月至2018年12月在我院治療的2型糖尿病患者180例，根據(jù)尿微量白蛋白排泄量(UAE)分為3組，單純組(UAE<30 mg/24 h)60例，男30例，女30例，年齡40～73歲，平均(53.13±4.89)歲；早期腎病組(UAE在30～300 mg/24 h)60例，男32例、女28例，年齡40～73歲，平均(53.06±4.82)歲。臨床腎病組(UAE>300 mg/24 h)60例，男33例、女27例，年齡40～73歲，平均(52.96±4.85)歲。2型糖尿病患者納入標(biāo)準(zhǔn)：①2型糖尿病診斷符合中華內(nèi)分泌學(xué)分會制定的標(biāo)準(zhǔn)[5]；②檢測前未使用胰島素、胰島素類似物等；③受試者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有惡性腫瘤、自身免疫性疾病、甲狀腺疾病等其他疾病；②患有糖尿病酮癥、糖尿病酸中毒等并發(fā)癥患者；③高血壓腎病，腎結(jié)石。同時選取健康志愿者60例作為對照組，其中男性32例，女性28例，年齡40～73歲，平均年齡(52.79±4.79)歲。各組受試者一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2實驗方法 采用外周靜脈血3～5 ml，室溫下放置5～10 min，3 500 r/min離心15 min，2小時內(nèi)檢測血清。采用羅氏公司Cobas8000全自動生化檢測儀器進行FPC、SCr、BUN水平檢測，全自動生化檢測試劑盒購自羅氏公司；采用ELISA法進行TNF-α的檢測，BioTek酶標(biāo)儀購自美國伯騰儀器有限公司。采用羅氏Cobas 6000電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進行IL-6的檢測，試劑盒購自羅氏公司。采集患者的清晨中段清潔尿液5 ml，自然分層后抽取上層清亮液體待測。采用羅氏Cobas 8000全自動生化檢測分析儀進行尿液NGAL的檢測，試劑盒購自華宇億康生物技術(shù)有限公司。

2 結(jié) 果

2.1血清內(nèi)IL-6、TNF-α水平變化 治療前，糖尿病各組IL-6、TNF-α水平表達明顯高于對照組患者，同時T2DM-DKD越嚴(yán)重，其血清中的IL-6、TNF-α水平越高(P<0.05)，見表1。

表1 各組血清IL-6、TNF-α水平比較

注：與對照組比較，*P<0.05；與單純糖尿病組比較，#P<0.05，與早期腎病組比較，△P<0.05

2.2尿液內(nèi)NGAL水平變化 治療前，糖尿病各組NGAL水平表達明顯高于對照組，同時T2DM-DKD越嚴(yán)重，其尿液中的NGAL水平越高(P<0.05)，見表2。

表2 各組尿液NGAL水平比較

注：與對照組比較，*P<0.05；與單純糖尿病組比較，#P<0.05，與早期腎病組比較，△P<0.05

2.3血糖、腎功能相關(guān)指標(biāo)變化 治療前，糖尿病各組FPC、SCr、BUN水平表達明顯高于對照組，同時T2DM-DKD越嚴(yán)重，其血清中的FPC、SCr、BUN水平越高(P<0.05)，見表3。

表3 各組血糖、腎功能相關(guān)水平比較

注：與對照組比較，*P<0.05；與單純糖尿病組比較，#P<0.05，與早期腎病組比較，△P<0.05

3 討 論

2型糖尿病患者長期的高胰島素抵抗、高血糖或者葡萄糖的代謝利用障礙，均能夠促進T2DM-DKD的發(fā)生。長期的T2DM-DKD病情進展，能夠顯著促進腎臟基底膜組織的損傷，加劇腎小球濾過膜電荷屏障的損害，導(dǎo)致大分子物質(zhì)的漏出[6]。在臨床觀察過程中，可以發(fā)現(xiàn)T2DM-DKD導(dǎo)致的終末期腎功能衰竭或者臟器微血管病變的風(fēng)險明顯上升，遠(yuǎn)期T2DM-DKD患者致殘率或者病死率可超過5%以上[7-8]。通過早期的臨床干預(yù)，能夠顯著抑制腎小球濾過膜的纖維化，改善濾過膜的通透性，抑制濾過膜足細(xì)胞的凋亡和萎縮。但現(xiàn)階段臨床上缺乏對于T2DM-DKD病情評估的可靠性分子標(biāo)志物，雖然已有的相關(guān)綜述研究探討了不同分子標(biāo)志物對于T2DM-DKD病情的標(biāo)志作用。但包括尿蛋白、半胱氨酸或者胱抑素C等指標(biāo)在內(nèi)，其對于T2DM-DKD患者臨床病情評估的穩(wěn)定性較差，對于T2DM-DKD患者遠(yuǎn)期腎損害臨床結(jié)局評估的靈敏度較低[9-10]。趨化或者炎癥因子的改變，能夠在泌尿系統(tǒng)內(nèi)皮損傷過程中發(fā)揮作用。本次研究通過對于T2DM-DKD患者體內(nèi)IL-6、TNF-α及NGAL的表達分析，其現(xiàn)實臨床意義在于能夠為臨床上T2DM-DKD病情嚴(yán)重程度的評估提供參考。

IL-6、TNF-α是炎癥性相關(guān)因子，其對于腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的直接性損傷，能夠?qū)е聝?nèi)皮細(xì)胞的凋亡和內(nèi)皮間質(zhì)組織纖維化。IL-6、TNF-α還能夠影響到中性粒細(xì)胞酶的激活，影響到中性粒細(xì)胞的活化程度，最終導(dǎo)致腎功能結(jié)局的惡化[11]；NGAL是粒細(xì)胞趨化載脂蛋白，其對于循環(huán)血中粒細(xì)胞數(shù)量的影響，能夠?qū)е逻^氧化物酶的激活，加劇自由基對于基底膜組織的浸潤[12]。

在不同病情的糖尿病患者中，可以發(fā)現(xiàn)IL-6、TNF-α的表達濃度可隨著T2DM-DKD病情的加重而上升，特別是在臨床腎病患者中，血清中IL-6、TNF-α的表達濃度的上升更為顯著。IL-6、TNF-α的上升對于T2DM-DKD病情的影響，主要在于其能夠加劇下游NF-KB信號通路的激活，影響到下游生物活性酶如顆粒酶或者穿孔酶的激活，促進其對于腎臟足細(xì)胞的溶解和損傷。在病情加重的T2DM-DKD患者中，相關(guān)炎癥性因子指標(biāo)的上升更為顯著，主要由于臨床型腎病患者尿蛋白的漏出、腎功能的損害、體內(nèi)代謝毒素的蓄積，均能夠?qū)е麦w內(nèi)炎癥因子的進一步激活和釋放[13]。在其他的相關(guān)研究過程中，均可以發(fā)現(xiàn)IL-6表達顯著上升，在腎功能失代償或者合并有其他臟器損傷的T2DM-DKD患者中，IL-6的表達上升更為顯著[14]。NGAL是評估患者體內(nèi)中性粒細(xì)胞激活程度的指標(biāo)，在T2DM-DKD患者中，其尿液中NGAL的表達明顯的上升，特別是在病情較為嚴(yán)重的糖尿病腎病患者中，尿液中NGAL的表達上升更為顯著。尿液中NGAL對于T2DM-DKD患者的病情影響，主要在于其能夠影響到游離氧自由基的富集，加劇腎間質(zhì)組織或者腎臟集合管側(cè)壁膜細(xì)胞的損傷，影響到腎臟重吸收的功能障礙[15]。臨床上可以通過檢測IL-6、TNF-α或者NGAL，進而評估糖尿病腎病的發(fā)生風(fēng)險。FPC、SCr、BUN水平是評估腎功能損傷程度的指標(biāo)，T2DM-DKD病情約為嚴(yán)重，體內(nèi)FPC、SCr、BUN的上升越為顯著，這主要由于高血壓誘導(dǎo)的腎臟微血管病變，從而導(dǎo)致肌酐濾過水平的下降。

T2DM-DKD患者患病程度越高，其體內(nèi)NGAL、炎癥細(xì)胞因子的表達就越高。希望后來的研究能夠揭露NGAL、炎癥細(xì)胞因子診斷T2DM-DKD臨床結(jié)局的價值。