范謀寅，王 渠，洪俊浩，楊仕英，李灝帆，李傳旭，肖 莉

(湖州師范學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院，浙江 湖州 313000)

川芎為植物L(fēng)igusticum chuanxiong hort.的干燥根莖，氣香濃，性溫味苦[1]?，F(xiàn)代藥理研究結(jié)果顯示，川芎富含阿魏酸、藁本內(nèi)酯、川芎嗪等活性成分，臨床上用于治療高血壓、心絞痛、偏頭痛、動(dòng)脈粥樣硬化等各種心腦血管疾病[2-3]?？诒榔侵冈诳谇粌?nèi)唾液作用下即能迅速崩解或溶解的片劑，與普通片劑相比，口崩片具有起效快及生物利用度高等優(yōu)點(diǎn)[4-5]。本課題以自制的川芎提取物固體分散體為原料，采用粉末直接壓片法制備川芎口崩片，并通過HPLC測定阿魏酸的含量，建立川芎口崩片的含量測定方法，為川芎口崩片的工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

DZG-401真空干燥箱(天津天宇)，AL204電子天平(瑞士Mettler-Toledo公司)，DP30單沖壓片機(jī)(北京國藥龍立)，LC-6A高效液相色譜儀(日本島津) ，ZPJ-4智能片劑四用儀(上海精科)。

1.2 試藥

阿魏酸對照品(上海哈靈生物，批號：110671)；川芎提取物固體分散體(自制)；微晶纖維素pH301(MCC)，低取代羥丙基纖維素(L-HPC)，交聯(lián)聚維酮(PVPP)，微粉硅膠，阿司巴甜均購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司，甲醇、冰醋酸均購自阿拉丁公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 川芎口崩片的制備

2.1.1 制備方法

根據(jù)前期實(shí)驗(yàn)篩選，初步確定川芎口崩片基本處方組成：矯味劑為2%阿斯巴甜，潤滑劑為1%微粉硅膠，崩解劑為PVPP和L-HPC，填充劑兼崩解劑為MCC。按處方量稱取過80目篩的川芎提取物固體分散體與輔料，采用等量遞加混合法混合均勻后直接粉末壓片，片劑沖模為10mm。

2.2 處方工藝優(yōu)化

在預(yù)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，以崩解時(shí)間(S)作為指標(biāo)，選擇對口崩片質(zhì)量影響較大的填充劑兼崩解劑MCC(A)、崩解劑PVPP(B)及崩解劑L-HPC(C)為考察因素，采用L9(34)進(jìn)行正交設(shè)計(jì)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)。因素水平表見表1，正交實(shí)驗(yàn)安排及結(jié)果見表2。

表1 正交實(shí)驗(yàn)因素水平表

表2 正交實(shí)驗(yàn)安排與結(jié)果

表2(續(xù))

由表1、表2可知，各因素對川芎口崩片的影響因素大小依次為B>C>A。考慮到口崩片的崩解時(shí)間越短質(zhì)量越好，因此可以確定最優(yōu)處方為A3B3C2，即MCC的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%，PVPP的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%，L-HPC的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%。

2.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

按照最優(yōu)制備工藝，采用粉末直接壓片法制備3批川芎口崩片(20190921，20190923，20190925)進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，所得三批樣品外觀均光潔完整，色澤均勻，口感微甜，在24s內(nèi)均能完全崩解，表明該口崩片制備工藝穩(wěn)定可靠，重現(xiàn)性好。

2.4 川芎口崩片含量測定方法建立

2.4.1 色譜條件

色譜柱：ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm×5μm)；流動(dòng)相：甲醇-0.1%冰醋酸(45∶55)；檢測波長：313nm；流速：1.0mL·min-1；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：20μL。

2.4.2 溶液的配制

2.4.2.1 對照品溶液

精密稱取阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品0.0122g至50mL容量瓶中,加入流動(dòng)相甲醇-0.1 %冰醋酸(45∶55) 超聲使之溶解，放冷，并用流動(dòng)相定容。精密量取標(biāo)準(zhǔn)品溶液1mL置50mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，得濃度為4.88μg/mL對照品溶液。

2.4.2.2 供試品溶液

取15片自制口崩片粉碎，稱取片粉0.5186g至25mL容量瓶中，加入流動(dòng)相超聲溶解， 40min，放冷，流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。高速離心機(jī)10000r/min離心30min，取上清液，過0.45μm微孔濾膜，即得，備用。

2.4.3 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

取處方量輔料，按照2.2.2.1項(xiàng)中方法制備陰性對照溶液。分別將20μL對照品溶液及陰性對照品溶液進(jìn)樣，按2.4.1項(xiàng)下色譜條件，考察系統(tǒng)適應(yīng)性。結(jié)果顯示，川芎提取物中阿魏酸分離良好，理論塔板數(shù)按照阿魏酸計(jì)算達(dá)到3500，且輔料對測定不產(chǎn)生干擾。

2.4.4 線性關(guān)系試驗(yàn)

分別精密量取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0， 6.0，7.0mL 2.4.2.1項(xiàng)下對照品溶液，用流動(dòng)相稀釋定容至10mL。以阿魏酸峰面積作為縱坐標(biāo)(Y)，以阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品濃度作為橫坐標(biāo)(X)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程y=96470x+29544，r=0.9997。表明阿魏酸在0.488～3.416μg/mL范圍內(nèi)具有線性良好。

2.4.5 精密度試驗(yàn)

取對照品溶液20μL，注入液相色譜儀，連續(xù)測定6次，通過記錄阿魏酸峰面積，計(jì)算其RSD為0.89%，表明儀器精密度良好。

2.4.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液，分別在第0，1，2，4，6，8 h注入液相色譜儀，計(jì)算阿魏酸峰面積的RSD為0.91%，表明供試品溶液在8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.4.7 重復(fù)性試驗(yàn)

分別取自制口崩片樣品6份，每份15片，按照2.2.2.2項(xiàng)下制備6份供試品溶液，注入液相色譜儀，記錄液相色譜圖，計(jì)算阿魏酸峰含量為0.88%，RSD為0.73% 。

2.4.8 加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的川芎口崩片粉末9份，分為3組。將片粉置于25mL容量瓶中，加入流動(dòng)相超聲溶解后，分別加入阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.6,1.0,1.4mL，流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。10000r/min高速離心30min后，0.45μm微孔濾膜過濾上清液。取續(xù)濾液20μL注入液相色譜儀，計(jì)算阿魏酸的回收率，結(jié)果顯示高、中、低3個(gè)濃度的平均回收率分別為100.9%，100.5%及100.5%，RSD分別為0.97%，0.53%，0.46%。

2.4.9 含量均勻度的測定

取自制川芎口崩片6批，按照2.4.2.2項(xiàng)下制備供試品溶液，20μL注入液相色譜儀，計(jì)算片劑中阿魏酸含量，結(jié)果見下表，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示采用本制備工藝得到的川芎口崩片質(zhì)量穩(wěn)定，批間差異小。

表3 川芎口崩片中阿魏酸含量

3 結(jié)論

(1) 本研究在預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上初步確定了川芎口崩片的處方，進(jìn)而通過正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化篩選得到最優(yōu)制備工藝為：MCC的用量為40%，PVPP的用量為15%，L-HPC的用量為10%，阿斯巴甜的用量為2%，微粉硅膠的用量為1%。采用10mm沖模粉末直接壓片法制備，最終得到的川芎口崩片表面光潔崩解，崩解時(shí)間為24s以內(nèi)，符合要求。

(2) 以阿魏酸為指標(biāo)，建立了川芎口崩片含量測定方法。方法學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果均顯示本檢測方法重復(fù)性好，專屬性強(qiáng)， 可用于準(zhǔn)確控制川芎口崩片的含量，為進(jìn)一步制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。