傅 敏 劉旦丹 梁樺才

（羅定市疾病預(yù)防控制中心 廣東羅定 527200）

1 前言

禽流感病毒屬甲型流感病毒，主要發(fā)生于禽類，但人接觸感染了禽流感病毒的禽類及其排泄物也會(huì)感染和傳播禽流感。據(jù)統(tǒng)計(jì)，確診為禽流感的人中超過80%曾經(jīng)接觸過禽類[1]。廣東位于候鳥遷徙路線上，而且人口密集、活禽市場(chǎng)多、禽類種類及數(shù)量多，發(fā)生禽流感疫情風(fēng)險(xiǎn)較大[2]。根據(jù)原廣東省衛(wèi)生計(jì)生委《廣東省禽類市場(chǎng)環(huán)境禽流感病毒污染季節(jié)性監(jiān)測(cè)方案（2015 年版）》（粵衛(wèi)辦函〔2015〕559 號(hào)）和云浮市疾病預(yù)防控制中心《禽類市場(chǎng)環(huán)境禽流感病毒污染應(yīng)急監(jiān)測(cè)工作安排》（云疾控〔2015〕48號(hào)）要求，羅定市疾病預(yù)防控制中心于2016年11月—2019年4月對(duì)活禽市場(chǎng)外環(huán)境禽流感病毒污染狀況進(jìn)行了監(jiān)測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

2 材料與方法

2.1 標(biāo)本采集

選擇羅定市7家市場(chǎng)的活禽檔口作為監(jiān)測(cè)點(diǎn)，于2016年11月—2019年4月采集200份樣本。采集樣本類型包括宰殺或擺放禽肉案板表面的擦拭樣本、籠具表面擦拭樣本、禽類糞便、禽類飲水、清洗禽類的污水等。

2.2 檢測(cè)方法

采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Real-time PCR）技術(shù)檢測(cè)禽流感病毒。提取流感病毒核糖核酸（RNA）后，首先對(duì)流感病毒A型通用引物核酸進(jìn)行檢測(cè)，若為陽性，再對(duì)流感病毒H5、H7、H9亞型進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果及時(shí)登記。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

從“傳染病監(jiān)測(cè)技術(shù)平臺(tái)信息管理系統(tǒng)”下載數(shù)據(jù)，再在Excel軟件中進(jìn)行整理，然后通過SPSS 24.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。A型陽性檢出率比較一般采用皮爾遜卡方檢驗(yàn)；若有單元格期望計(jì)數(shù)小于5，采用費(fèi)希爾精確檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 不同年份活禽市場(chǎng)外環(huán)境禽流感病毒監(jiān)測(cè)結(jié)果

2016—2019年共檢出A型陽性樣本57例，陽性率為28.50%，其中2016年、2017年陽性率較高，分別為57.14%和33.87%，而2018年陽性率最低，只有15.71%，不同年份陽性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=18.473，P=0.000<0.05）。在所有 A 型陽性樣本中檢出H9亞型陽性比例最高（18.5%），其次為H5亞型（10.00%），H7 亞型最低（2.5%），詳見表 1。

表1 羅定市2016—2019年活禽市場(chǎng)外環(huán)境禽流感病毒

3.2 不同采樣點(diǎn)活禽市場(chǎng)外環(huán)境禽流感病毒監(jiān)測(cè)結(jié)果

羅定市平南市場(chǎng)、羅定大新市場(chǎng)和羅定羅城鎮(zhèn)城東市場(chǎng)A型流感病毒陽性率位居前3，陽性率分別為45.65%、40.91%和34.38%；騰筆生力涼亭禽業(yè)有限公司和羅定市孖塘市場(chǎng)陽性率較低，分別只有0.00%和6.67%，不同采樣點(diǎn)陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（檢驗(yàn)值=21.794，P=0.001<0.05），詳見表 2。

表2 羅定市2016—2019年活禽市場(chǎng)外環(huán)境禽流感病毒

3.3 不同樣本活禽市場(chǎng)外環(huán)境禽流感病毒監(jiān)測(cè)結(jié)果

宰殺或擺放禽肉案板表面的擦拭樣本、清洗禽類的污水、籠具表面擦拭樣本A型陽性檢出率位居前三，陽性率分別為46.07%、33.33%和23.21%，而禽類飲水和糞便樣本陽性率只有0.00%和3.92%，不同樣本陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（檢驗(yàn)值=33.339，P=0.000<0.05），詳見表 3。

表3 羅定市2016—2019年活禽市場(chǎng)外環(huán)境禽流感病毒

4 討論

禽流感病毒基因組由可編碼不同蛋白質(zhì)的8節(jié)段單股負(fù)鏈RNA構(gòu)成，基因重組能力非常強(qiáng)。由于活禽市場(chǎng)集中了來自不同區(qū)域的禽類，加上混合圈養(yǎng)，衛(wèi)生與通風(fēng)條件不佳，使禽流感病毒基因重組產(chǎn)生新的亞型風(fēng)險(xiǎn)大大增加，例如，H5N6病毒基因就是由H5N1、H6N6 2種病毒基因重組產(chǎn)生的[3]?？梢?，被禽流感病毒嚴(yán)重污染的活禽市場(chǎng)的影響是人禽流感爆發(fā)的高危因素。

本研究結(jié)果顯示，2016—2019年羅定市活禽市場(chǎng)外環(huán)境禽流感病毒A型陽性檢出率為28.50%，略高于廣東省各地市2012—2015年外環(huán)境禽流感病毒A型陽性率的24.23%；H9、H5陽性率分別為18.50%和10.00%，也明顯高于廣東省各地市2012—2015年外環(huán)境禽流感病毒對(duì)應(yīng)亞型的13.53%和3.70%；只有H7陽性率為2.50%，低于廣東省各地市2012—2015年外環(huán)境禽流感病毒對(duì)應(yīng)亞型的3.89%。H9為陽性率最高亞型，H5居次，H7最低，這個(gè)順序與河源市情況[4]類似。

羅定市不同年份、不同市場(chǎng)、不同樣本禽流感病毒陽性檢出率存在明顯差別。2016年和2017年A型陽性率明顯高于2018年和2019年，表明羅定市禽流感病毒污染狀況近2年有明顯改善。不同市場(chǎng)禽流感病毒污染狀況差異反映了各市場(chǎng)衛(wèi)生條件與管理的差別，禽流感病毒污染嚴(yán)重的市場(chǎng)應(yīng)加強(qiáng)消毒、休市、準(zhǔn)入檢疫措施。不同樣本檢出陽性率差異反映了禽類處理方面的一些差別：案板重復(fù)使用、清洗不徹底等，而籠具和清洗禽類的污水容易被污染，其他地區(qū)也有類似情況。

綜上所述，羅定市活禽市場(chǎng)外環(huán)境存在禽流感病毒污染，雖然近2年情況有明顯改善，仍需加強(qiáng)禽流感病毒監(jiān)測(cè)，活禽市場(chǎng)應(yīng)加強(qiáng)消毒、清掃、定期休市及市場(chǎng)內(nèi)活禽不過夜措施。