姚雪婷 梅應(yīng)兵 孫勤國(guó) 彭玉英

(1武漢市第三醫(yī)院老年病科，湖北 武漢 430060；2湖北省中醫(yī)院(光谷院區(qū))老年病科；3武漢市青山區(qū)紅鋼城街社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心)

健忘癥好發(fā)于老年人群，可分為生理性及病理性兩種類型，生理性健忘患者臨床癥狀較輕，可于適當(dāng)調(diào)養(yǎng)后恢復(fù)正常，而病理性健忘則較為嚴(yán)重，若未盡早采取有效的治療措施，可能發(fā)展為老年性癡呆，對(duì)患者及其家人的生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響〔1～3〕。目前對(duì)老年癡呆的研究也成為這一領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)〔4,5〕。作為老年癡呆的重要前驅(qū)癥狀，老年健忘的研究尚處于起步階段?；谥嗅t(yī)“治未病”理論，本課題通過流行病學(xué)調(diào)查，總結(jié)老年健忘(老年腦動(dòng)脈硬化)的中醫(yī)證型及其分布規(guī)律，尋找癡呆早期的病機(jī)關(guān)鍵及病情演變規(guī)律。同時(shí)研究老年健忘(老年腦動(dòng)脈硬化)患者載脂蛋白(Apo)E基因情況，探討中醫(yī)健忘與ApoE基因的相關(guān)性，為中醫(yī)辨證提供微觀證據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究選取2014～2017年11月武漢市某社區(qū)580例社區(qū)60歲以上老年人為研究對(duì)象，對(duì)其進(jìn)行記憶力減退(健忘)、臨床癡呆評(píng)定量表(CDR)、簡(jiǎn)易精神狀態(tài)檢查(MMSE)量表、海金斯基缺血指數(shù)量表(HIS)、HAMD抑郁量表評(píng)分，評(píng)估結(jié)果顯示，580例社區(qū)老人中包括179例健忘老人及401例非健忘老人。

1.2研究方法 (1)腦動(dòng)脈硬化各中醫(yī)證候判別模式。精髓空虛：頭暈、頭痛、失眠、腦鳴、耳鳴、健忘、乏力、心悸、腰酸、眼花、視力下降、舌淡、薄苔、細(xì)脈、沉脈。痰濁阻滯：頭暈、頭痛、失眠、太息、胸脘痞悶、胸脅脘腹脹痛、肥胖、口苦、口干、心煩、舌暗、薄苔、黃苔、弦脈、沉脈。氣機(jī)郁滯：頭暈、頭痛、健忘、急躁、胸脅脘腹脹痛、太息、薄苔、舌紅、黃苔、澀脈、弦脈。腎氣虧虛：頭暈、失眠、多夢(mèng)、耳鳴、健忘、腰酸、急躁、齒松、齒痕舌、舌胖、舌暗、薄苔、白苔、細(xì)脈、尿頻。(2)基因測(cè)序法檢測(cè)ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)基因型：清晨抽取2 ml靜脈血至于含乙二胺四乙酸(EDTA)試管中，并送至武漢市第三醫(yī)院病理科提取DNA。20 μl PCR反應(yīng)體系：2 μl 10×PCR緩沖液(Mg+)、4 μl 5×Q-Solution、0.2 μl HotStarTaq DNA Polymerase、2 μl dNTPmix，正向引物1 μl，反向引物1 μl，模板DNA 1 μl，無菌水8.8 μl。PCR條件：預(yù)變性：95℃ 15 min，變性：94℃ 50 s，退火：63～58℃ 1 min(-0.5℃/1 min)，延伸：72℃ 1 min，上述過程循環(huán)10次，變性：94℃ 50 s，退火：57℃ 1 min，延伸：72℃ 1 min，上述過程循環(huán)30次，最后72℃延伸10 min。采用PCR純化試劑盒純化PCR產(chǎn)物，隨后進(jìn)行測(cè)序。數(shù)據(jù)分析采用DNA sequencing analysis 5.1。試驗(yàn)儀器及試劑均購(gòu)自QIAGEN公司。

1.3觀察指標(biāo) ①采用Logistic多因素回歸分析老年健忘的影響因素的。②通過記錄健忘患者的主要、次要癥狀及舌質(zhì)、舌苔、脈象，確定老年健忘的主要證型。③比較健忘與非健忘老人ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)基因型及等位基因頻率。④比較健忘組不同中醫(yī)證型受試者ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)基因型及等位基因頻率。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS20.0軟件進(jìn)行方差分析、LSD-t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1老年健忘癥的影響因素的Logistic多因素回歸分析 年齡、婚姻狀況及鄰里關(guān)系與老年健忘癥患病顯著相關(guān)(P<0.05)，見表1。

表1 老年健忘癥的影響因素的Logistic多因素回歸分析(n=179)

2.2老年健忘患者中醫(yī)證型分布情況 179例老年健忘患者中中醫(yī)證型為精髓空虛、痰濁阻滯、氣機(jī)郁滯、腎氣虧虛者分別為62例(34.64%)、35例(19.55%)、49例(27.37%)、33例(18.44%)。

2.3老年健忘與非健忘人群ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)基因型分布 共檢測(cè)出ApoE基因E2/2、E2/3、E3/3、E2/4、E3/4、E4/4六種基因型(圖1)，其中健忘患者E3/3基因型頻率明顯低于非健忘人群，E2/3、E3/4及E4/4基因型頻率明顯高于非健忘人群(P<0.05)；健忘與非健忘人群E2/2及E2/4基因型頻率不存在顯著差異(P>0.05)，見表2。

1～6：E2/2、E2/3、E3/3、E2/4、E3/4、E4/4圖1 ApoE基因多態(tài)性基因檢測(cè)圖譜

表2 老年健忘與非健忘人群ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)基因型情況比較〔n(%)〕

2.4老年健忘與非健忘人群ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)等位基因頻率比較 健忘患者ε3等位基因頻率明顯低于非健忘人群，ε4等位基因頻率明顯高于非健忘人群(P<0.05)，見表3。

2.5不同中醫(yī)證型老年健忘患者ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)基因型比較 不同中醫(yī)證型老年健忘患者E2/2、E2/3、E3/3、E2/4、E3/4、E4/4基因型頻率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

2.6不同中醫(yī)證型老年健忘患者ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)等位基因頻率比較 氣機(jī)郁滯型健忘患者ε2等位基因頻率明顯低于精髓空虛、痰濁阻滯、腎氣虧虛型患者(P<0.05)；痰濁阻滯型健忘患者ε3等位基因頻率明顯高于精髓空虛、氣機(jī)郁滯、腎氣虧虛型患者(P<0.05)；氣機(jī)郁滯、腎氣虧虛型健忘患者ε4基因型頻率明顯高于精髓空虛及痰濁阻滯型患者(P<0.05)，見表5。

表3 老年健忘與非健忘人群ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)等位基因頻率比較〔n(%)〕

表4 不同中醫(yī)證型老年健忘患者ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)基因型比較〔n(%)，n=179〕

表5 不同中醫(yī)證型老年健忘患者ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)等位基因頻率比較〔n(%)，n=179〕

3 討 論

據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球老年性癡呆患者超過2 000萬，我國(guó)約有400萬癡呆患者，老年癡呆已成為繼心臟病、腫瘤、腦卒中后的人類第四大殺手〔6,7〕。健忘是以腦功能減退為主要臨床表現(xiàn)的一種病癥，西醫(yī)的腦動(dòng)脈硬化癥(CAS)與中醫(yī)健忘相似，是老年癡呆的重要前驅(qū)癥狀。本研究提示應(yīng)給予老齡人群更多關(guān)愛，定期組織家庭或集體活動(dòng)，促進(jìn)家庭內(nèi)部及鄰里之間和睦，以此降低老年健忘癥的患病風(fēng)險(xiǎn)，避免老年癡呆癥的發(fā)生〔8,9〕。

對(duì)于健忘，《靈樞·本神》有：“腎藏精，精舍志；腎盛怒而不止則傷志，志傷則喜忘前言。”在發(fā)病機(jī)制上，有學(xué)者認(rèn)為老年健忘虛主要責(zé)之于心、脾、腎虧虛，實(shí)則主要為瘀血、痰濁、火熱、肝郁。在腦動(dòng)脈硬化(健忘)程度與中醫(yī)證型關(guān)系上，有研究顯示輕度腦動(dòng)脈硬化以氣虛血瘀證為主，重度腦動(dòng)脈硬化以肝腎虧虛證為主〔10〕。但無專門針對(duì)60歲以上老年人群的證型研究，并且所選病例均為住院患者，不能代表實(shí)際人群的發(fā)病率及證型特征，因此需要對(duì)社區(qū)60歲老年人群進(jìn)行普遍篩選，才能得出全面的老年健忘發(fā)病率及中醫(yī)證型分布特征，本研究調(diào)查結(jié)果與同類型調(diào)查〔2〕結(jié)論較為一致。

西醫(yī)對(duì)老年癡呆的研究從神經(jīng)病理學(xué)、生物化學(xué)、基因?qū)W、病毒學(xué)等方面進(jìn)行了廣泛的研究，取得了可喜的進(jìn)展，目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者一致認(rèn)為ApoE基因與老年癡呆癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)〔11～13〕。ApoE是一種重要的載脂蛋白組成成分，該基因在血脂代謝過程中扮演重要角色，而血脂異常是腦動(dòng)脈硬化癥主要的危險(xiǎn)因素〔14～16〕，故推斷ApoE基因與健忘癥的發(fā)病相關(guān)。本研究提示ε4等位基因可作為老年健忘癥患病的遺傳標(biāo)記。此外，本文研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)氣機(jī)郁滯、腎氣虧虛型老年健忘患者E4/4基因型頻率及ε4基因型頻率明顯高于精髓空虛、痰濁阻滯型患者，進(jìn)一步證實(shí)E4/E4基因型與腎虛血瘀證型相關(guān)，有學(xué)者提出ApoE基因多態(tài)性位點(diǎn)的不同基因型的心腦血管疾病患者其臨床血脂改變譜及臨床癥狀均存在明顯差異，且從中醫(yī)角度對(duì)高脂血癥研究表明，不同中醫(yī)證型患者間在血液流變學(xué)指標(biāo)以及血脂指標(biāo)均存在較大差異〔17～20〕，與本文研究結(jié)論類似。