毛未賢 張萌萌 馬倩倩 高遠(yuǎn) 宋世凱 尹紀(jì)偉

1．吉林省一汽總醫(yī)院，吉林長(zhǎng)春130011

2．《中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志》社，北京 100102

維生素K1與維生素K2為天然維生素K，屬于 維生素K族化合物［1］。維生素K1廣泛存在于動(dòng)物內(nèi)臟和綠色蔬菜中［2］，與葉綠體結(jié)合比較緊密，人體對(duì)維生素K的吸收率較低，需轉(zhuǎn)化為維生素K2后發(fā)揮生物學(xué)作用。維生素K2是人體內(nèi)腸道細(xì)菌的代謝產(chǎn)物，主要由細(xì)菌合成［3－4］，是人類(lèi)飲食中維生素K的主要結(jié)構(gòu)形式，在人體內(nèi)可直接發(fā)揮生理作用，通過(guò)低密度脂蛋白輸送，分布在腎、骨、生殖器及血管壁等組織，在體內(nèi)的生物利用率為維生素K1的2倍。

維生素K2可通過(guò)多種途徑調(diào)節(jié)骨代謝，具有促進(jìn)骨形成和抑制骨吸收的雙向作用。充足的維生素K2可保證血液中的鈣在骨骼進(jìn)行有效地沉積與礦化［5－6］。

1 資料與方法

1.1 一般資料

男性骨質(zhì)疏松癥患者71例，年齡53～78歲，平均(65.2±7.8)歲。排除標(biāo)準(zhǔn):急、慢性肝、腎疾病、糖尿病、甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)、甲狀旁腺機(jī)能減退、甲狀腺功能亢進(jìn)癥、甲狀腺功能減退癥、腫瘤及放化療患者;長(zhǎng)期服用糖皮質(zhì)激素治療的患者;正在使用華法令治療的患者;半年內(nèi)應(yīng)用抗骨質(zhì)疏松藥物治療的患者。

根據(jù)WHO骨質(zhì)疏松診斷標(biāo)準(zhǔn):骨密度(bone mineral density，BMD)與同性別健康成人骨峰值比較T－Score(T值)≥－1.0 SD為骨密度正常，－2.5 SD＜T值＜－1.0 SD為骨密度降低，T值≤－2.5 SD為骨質(zhì)疏松。本研究入選受試者T值≤－2.5 SD，符合骨質(zhì)疏松診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 治療方法

采用固力康［四烯甲萘醌軟膠囊，衛(wèi)材(中國(guó))藥業(yè)有限公司］治療男性骨質(zhì)疏松患者，15 mg/粒，每日3次，每次1粒，飯后口服;同時(shí)給予碳酸鈣D3(鈣爾奇D)，0.6 g/粒，每日1次，每次1粒，飯后30 min 口服;骨化三醇(羅蓋全)，0.25 μg/粒，每日一次，每次1粒，飯后30 min口服。連續(xù)治療一年，治療期間未使用其他影響骨代謝的藥物。

治療期間監(jiān)測(cè)血清鈣濃度。分別于治療前、治療后6、9、12個(gè)月采血測(cè)定血清骨代謝指標(biāo)骨鈣素(osteocalcin，OC;bone glaprotein，BGP)、Ⅰ型膠原交聯(lián)C－末端肽(type I collagen carboxy－terminal peptide，CTX－1)、細(xì)胞因子白介素 6(interleukin 6，IL－6)、白介素10(IL－10)水平，并于治療后6、12 個(gè)月檢測(cè)患者腰椎L1～4BMD、股骨頸BMD。

1.3 檢查儀器

采用美國(guó)Hologic公司生產(chǎn)的Discovery WA型雙能X線骨密度儀檢測(cè)患者腰椎L1～4骨密度與股骨頸骨密度。采用美國(guó)Thermo公司全自動(dòng)酶標(biāo)免疫分析儀檢測(cè)患者血清骨代謝指標(biāo)BGP、CTX－1、細(xì)胞因子 IL－6、IL－10 水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SSPS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)71例患者治療前后腰椎 L1～4BMD、股骨頸 BMD，血清 BGP、CTX－1、IL－6、IL－10水平進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)均用珋x±s表示，治療前后數(shù)據(jù)兩兩比較采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前、治療后6個(gè)月、12個(gè)月患者腰椎與股骨頸BMD測(cè)定值比較

結(jié)果顯示，治療6個(gè)月后患者腰椎(L1～4)BMD較治療前增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療12個(gè)月后患者腰椎(L1～4)BMD較治療前顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療6個(gè)月后患者股骨頸BMD較治療前增加，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);治療12個(gè)月后患者股骨頸BMD較治療前增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 71例患者治療前、治療6個(gè)月、12個(gè)月后BMD測(cè)定值比較(g/cm2s)Table 1 Comparison of BMD measurements in 71 patients before treatment，and 6 months and 12 months after treatment(g/cm2，珋x±s)

表1 71例患者治療前、治療6個(gè)月、12個(gè)月后BMD測(cè)定值比較(g/cm2s)Table 1 Comparison of BMD measurements in 71 patients before treatment，and 6 months and 12 months after treatment(g/cm2，珋x±s)

注:*P＜0.05。

時(shí)間 腰椎(L1～4)BMD 股骨頸BMD治療前 0.719±0.098 0.559±0.085治療后6個(gè)月 0.762±0.105* 0.571±0.091治療后12個(gè)月 0.801±0.073* 0.596±0.112*

2.2 治療前、治療6個(gè)月、9個(gè)月、12個(gè)月后71例患者骨代謝指標(biāo) BGP、CTX－1、細(xì)胞因子 IL－6、IL－10測(cè)定值比較

結(jié)果顯示，治療6個(gè)月后，血清BGP水平升高，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療9個(gè)月、12個(gè)月后，血清BGP水平持續(xù)升高，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療6個(gè)月后，血清CTX－1水平較治療前降低，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療9個(gè)月、12個(gè)月后，血清CTX－1水平較治療前持續(xù)降低，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療6個(gè)月后，血清IL－6水平較治療前開(kāi)始下降，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療9個(gè)月、12個(gè)月后，血清IL－6水平持續(xù)降低，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);治療6個(gè)月后，血清IL－10水平較治療前升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);治療9個(gè)月、12個(gè)月后，血清IL－10水平升高，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

表271例患者治療前、治療6個(gè)月、9個(gè)月、12個(gè)月后BGP、CTX－1、IL－6、IL－10測(cè)定值比較(珋x±s)Table 2 The comparison of measured values of BGP，CTX－1，IL－6 and IL－10 in 71 patients before treatment，and 6 months，9 months and 12 months after treatment(珋±s)

表271例患者治療前、治療6個(gè)月、9個(gè)月、12個(gè)月后BGP、CTX－1、IL－6、IL－10測(cè)定值比較(珋x±s)Table 2 The comparison of measured values of BGP，CTX－1，IL－6 and IL－10 in 71 patients before treatment，and 6 months，9 months and 12 months after treatment(珋±s)

注:與治療前比較，*P＜0.05。

時(shí)間 BGP/(μg/L) CTX－1/(μg/L) IL－6/(ng/mL) IL－10/(ng/mL)治療前 7.89±0.81 0.29±0.16 0.46±0.21 30.96±5.83治療后 6個(gè)月 8.37±0.79* 0.27±0.15* 0.41±0.25* 32.52±4.62治療后 9個(gè)月 8.73±0.92* 0.25±0.13* 0.39±0.18* 34.17±6.79*治療后 12個(gè)月 8.97±0.81* 0.24±0.11* 0.38±0.23* 35.02±7.11*

3 討論

本研究探討維生素K聯(lián)合骨化三醇、鈣爾奇D治療男性骨質(zhì)疏松的療效觀察，選取71例男性骨質(zhì)疏松癥患者作為研究對(duì)象，給予固力康、骨化三醇、鈣爾奇D進(jìn)行治療，治療時(shí)間為12個(gè)月。觀察治療前后骨密度的變化及血清骨代謝指標(biāo)BGP、CTX－1水平與血清細(xì)胞因子IL－6、IL－10水平的變化。結(jié)果表明，維生素K2可顯著增加骨質(zhì)疏松患者腰椎及股骨頸骨密度，促進(jìn)骨形成，提高骨形成標(biāo)志物BGP水平，上調(diào)血清細(xì)胞因子IL－10表達(dá)，降低骨吸收標(biāo)志物CTX－1水平，下調(diào)血清細(xì)胞因子IL－6的表達(dá)。

固力康是維生素K2同類(lèi)藥物之一。維生素K2可誘導(dǎo)成骨細(xì)胞生成，并促進(jìn)其活化，抑制成骨細(xì)胞Fas的表達(dá)，抑制成骨細(xì)胞凋亡，維持成骨細(xì)胞數(shù)量，增加骨細(xì)胞外膠原蛋白聚集，促進(jìn)骨形成。維生素K2可通過(guò)誘導(dǎo)破骨細(xì)胞凋亡，抑制破骨細(xì)胞表達(dá)與形成，下調(diào)破骨細(xì)胞分化因子－核因子κB(NF－κB)的活化及其配體 RANKL 的表達(dá)等方式［7－10］，抑制破骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨吸收。維生素K2通過(guò)促進(jìn)骨形成、抑制骨吸收的雙向作用調(diào)節(jié)骨代謝，提高骨密度、增加骨強(qiáng)度、促進(jìn)骨礦化、維持骨健康。Bai等［11］的Meta分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，維生素K能夠減緩骨密度下降，降低骨折發(fā)生率。有研究者使用維生素K治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥，結(jié)果顯示，治療6個(gè)月后，治療組患者腰椎、髖部BMD明顯升高，骨形成指標(biāo)明顯升高，骨吸收指標(biāo)明顯下降［12］。國(guó)內(nèi)有學(xué)者［13］用維生素K治療老年2型糖尿病，治療6個(gè)月后，患者腰椎、股骨頸BMD均升高。

維生素K2是谷氨酸γ－羧化酶的輔酶，維生素K依賴(lài)蛋白－骨鈣素和基質(zhì)γ－羧化谷氨酸殘基蛋白中的谷氨酸殘基需經(jīng)維生素K2羧化后，形成羧基谷氨酸才能具有生理活性［14］，從而抑制軟骨礦化，調(diào)節(jié)軟骨代謝，促進(jìn)鈣在靶組織沉積與礦化［15］。維生素K2可顯著增加血清羧化BGP水平［16］，減少非羧化BGP的水平。BGP是反映骨形成的特異性生化指標(biāo)，測(cè)定血清中BGP水平能夠直接反映骨質(zhì)疏松患者骨細(xì)胞活性和骨形成情況［17－18］。本研究患者治療6個(gè)月后，血清BGP水平開(kāi)始升高，治療9個(gè)月、12個(gè)月后，血清BGP水平與治療前比較持續(xù)升高，說(shuō)明使用維生素K2治療骨質(zhì)疏松可促進(jìn)骨鈣素的表達(dá)，促進(jìn)骨形成。Nagura等［19］研究維生素K2與甲狀旁腺素聯(lián)合用藥治療骨質(zhì)疏松，結(jié)果顯示血清羧化BGP水平顯著提高，成骨細(xì)胞數(shù)量上升明顯。Yamaguchi等［20］、Koshihara 等［21］實(shí)驗(yàn)研究指出維生素K2可通過(guò)促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與成骨前體細(xì)胞骨特異性堿性磷酸酶和BGP的表達(dá)，促進(jìn)成骨活性。Baue等［22］研究發(fā)現(xiàn)，喂食維生素K的大鼠，血清BGP水平較未加入維生素K組高，說(shuō)明維生素K通過(guò)提高成骨細(xì)胞的活躍程度及數(shù)量促進(jìn)骨形成。Donaldson等［23］使用阿侖膦酸鈉和維生素K聯(lián)合治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松，結(jié)果顯示，聯(lián)合治療組股骨頸骨密度增加，未羧化BGP水平下降，BGP水平增加。

IL－10是一種骨吸收抑制因子，可作為骨質(zhì)疏松診斷的觀察指標(biāo)之一，在骨質(zhì)疏松患者中IL－10水平降低。本研究使用維生素K2治療后，血清IL－10水平上升，說(shuō)明維生素K2可促進(jìn)骨形成細(xì)胞因子的表達(dá)。

CTX－1是反映骨吸收的重要骨代謝指標(biāo)，是最為廣泛的膠原降解標(biāo)志物，與骨吸收程度密切相關(guān)。在本研究中，使用維生素K2治療6個(gè)月后，血清CTX－1水平較治療前降低，治療9個(gè)月、12個(gè)月后，CTX－1水平持續(xù)降低，說(shuō)明維生素K2可通過(guò)抑制骨吸收標(biāo)志物的合成抑制骨吸收作用。趙成毅等［24］的研究中觀察到對(duì)老年性椎體壓縮性骨折患者椎體成形術(shù)后應(yīng)用唑來(lái)膦酸聯(lián)合維生素K2治療3年，β－CTX較術(shù)前明顯降低，唑來(lái)膦酸聯(lián)合維生素K2治療可促進(jìn)患者骨形成，抑制骨吸收，提高骨密度。

維生素K2也可通過(guò)抑制骨吸收細(xì)胞因子IL－6等抑制破骨細(xì)胞活性，從而抑制骨吸收。

本研究治療6個(gè)月后，血清IL－6水平較治療前開(kāi)始下降，治療9個(gè)月、12個(gè)月后，血清IL－6水平持續(xù)降低，進(jìn)一步說(shuō)明維生素K2通過(guò)抑制骨吸收細(xì)胞因子抑制骨吸收作用。董坤倫［25］研究維生素K2結(jié)合鈣劑在繼發(fā)骨質(zhì)疏松癥中的臨床應(yīng)用也證明，維生素K2可以明顯提高患者的骨密度，降低骨轉(zhuǎn)換，降低血清IL－6水平。

以往報(bào)道多觀察治療3個(gè)月后骨代謝指標(biāo)及細(xì)胞因子變化情況，本研究觀察治療后6、9、12個(gè)月與骨代謝相關(guān)的骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)和細(xì)胞因子變化情況，獲得了更多的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)。

綜上，本研究使用維生素K聯(lián)合骨化三醇、鈣爾奇D治療男性骨質(zhì)疏松，結(jié)果發(fā)現(xiàn)維生素K可提高患者腰椎與股骨頸骨密度，升高血清骨形成指標(biāo)BGP、細(xì)胞因子IL－10水平，降低血清骨吸收指標(biāo)CTX－1、細(xì)胞因子IL－6水平，維生素K治療男性骨質(zhì)疏松效果顯著，是臨床上治療骨質(zhì)疏松的重要策略之一。