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摘要：【目的】探究添加不同水平甘草粉的飼料對尖吻鱸幼魚生長特性、消化酶及免疫酶的影響，為甘草在尖吻鱸飼料中的添加應(yīng)用提供參考依據(jù)?！痉椒ā繉⒏什莘郯床煌壤砑又溜暳现?，然后對尖吻鱸幼魚進(jìn)行飼料投喂試驗，添加量0%為對照組，1%、3%和5%為試驗組，各組均設(shè)3個平行，試驗周期56 d，測定淀粉酶（AMS）、脂肪酶（LPS）、胰蛋白酶（TRYP）、胃蛋白酶（PP）、總抗氧化能力（T-AOC）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、過氧化物酶（POD）、過氧化氫酶（CAT）、丙二醛（MDA）和溶菌酶（LZM）等指標(biāo)，并對尖吻鱸消化酶指標(biāo)與生長特性指標(biāo)間、免疫酶指標(biāo)與存活率間進(jìn)行相關(guān)分析?！窘Y(jié)果】3%和5%試驗組尖吻鱸的存活率（SR）顯著高于對照組（P<0.05，下同）;各試驗組的體長增長率（BLGR）均顯著高于對照組;增重率（WGR）和特定生長率（SGR）在5%試驗組顯著升高;前腸AMS活力在3%和5%試驗組顯著升高;肝臟AMS、前腸LPS、肝臟LPS和胃LPS活力在各試驗組均顯著升高;前腸TRYP活力在1%和5%試驗組顯著升高;PP活力在5%試驗組顯著升高。WGR、SGR與肝臟AMS活力呈顯著正相關(guān)。肝臟T-AOC活力在各試驗組均顯著升高，CAT活力、GSH-PX活力和POD活力在1%試驗組顯著升高，MDA含量在5%試驗組顯著下降;血清T-AOC活力和CAT活力在各試驗組均顯著升高，GSH-PX活力在3%試驗組顯著升高，LZM活力在1%和5%試驗組顯著下降。SR與肝臟T-AOC、肝臟T-SOD、血清T-AOC、血清CAT和血清GSH-PX活力呈顯著正相關(guān)，與血清MDA含量及血清T-SOD活力呈顯著負(fù)相關(guān)?！窘Y(jié)論】飼料中添加3%～5%甘草粉可更好地提高尖吻鱸消化酶活性、促進(jìn)魚體增長，協(xié)助殺菌，提高尖吻鱸的存活率;添加1%～3%甘草粉可增強(qiáng)尖吻鱸抗氧化能力，減少肝過氧化物積累。因此，飼料中添加適量的甘草對尖吻鱸幼魚具有促進(jìn)消化及提高免疫的作用。

關(guān)鍵詞： 甘草;尖吻鱸;生長特性;消化酶;免疫酶

中圖分類號： S963.14? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：2095-1191（2020）12-3116-10

Abstract：【Objective】This study was conducted to explore the effects of different levels of glycyrrhiza meal in feed on growth performance，digestive enzymes and immune enzymes of juvenile Lates calcarifer，and aimed to provide refe-rence for the addition of glycyrrhiza to the L. calcarifer feed. 【Method】The glycyrrhiza meal was added to the feed at di-fferent proportions，L. calcarifer were fed with experimental diets. 0% glycyrrhizameal was used as the control group，1%，5%，9% glycyrrhizameal were the testing groups. Each group was set to be three parallelgroups，the experiment lasted 56 d.The indexes includingamylase（AMS），lipase（LPS），trypsin（TRYP），pepsin（PP），total antioxidant capacity（T-AOC），total superoxide dismutase（T-SOD），glutathione peroxidase（GSH-PX），peroxidase（POD），catalase（CAT），malondialdehyde（MDA） and lysozyme（LZM） were determined. The correlation between digestive enzyme indexes and growth chara-cteristic indexes and the correlation between immune enzyme indexes and survival rate of L. calcarifer were analyzed. 【Result】The survival rate increased significantly in the 3% and 5% group compared to control group（P<0.05， the same below）. The growth rate of body length（BLGR） in all test groups was significantly higher than that of the control group. Weight gain rate（WGR） and special growth rate（SGR） increased significantly in the 5% group. In foregut，AMS activity increased significantly in the 3% and 5% group. Liver AMS activity，foregut LPS activity，liver LPS activity， gastric LPS activity increased significantly in each test group. Intestinal TRYP activity increased significantly in the 1% and 5% group. Stomach PP activity increased significantly in the 5% group.There was? significant positive correlation between WGR，SGR and liver AMS. Liver T-AOC activity increased significantly in each test group. Liver CAT activity， GSH-PX activity and POD activity increased significantly in the 1% group. Liver MDA content decreased significantly in the 5% group. Serum T-AOC activity and CAT activity increased significantly in each test group. Serum GSH-PX activity increased significantly in the 3% group. Serum LZM activity decreased significantly in the 1% and 5% groups. There was significant positive correlation between SR and activities of liver T-AOC，liver T-SOD，serum T-AOC，serum CAT，serum GSH-PX. There was significant negative correlation between SR and serum MDA，serum T-SOD. 【Conclusion】Adding 3%-5% glycyrrhiza in the feed can promote the digestive enzyme activity of the L. calcarifer，and improve fish body growth. It helps inhibit bacteria to improve the survival rate of L. calcarifer. Adding 1%-3% can improve antioxidant capacity and reducethe accumulation of liver peroxides. Therefore，the proper addition of glycyrrhiza in the diet has the effect of promoting digestion and improving immunity to L. calcarifer.

Key words： glycyrrhiza; Lates calcarifer; growth characteristics; digestive enzymes; immune enzymes

Foundation item：Guangxi Innovation Driven Development Special Project（Guike AA18242031）;Science and Technology Innovation Group Project of Chinese Academy of Fishery Sciences（2020TD55）; Central Public-interest Scien-tific Institution Basal Research Project of South China Sea Fisheries Research Institute of Chinese Academy of Fishery Sciences（2018ZD01，2017ZD01）

0 引言

【研究意義】尖吻鱸（Lates calcarifer）作為我國廣泛養(yǎng)殖的魚種，其食用價值和商用價值均較高，但近年來隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，其養(yǎng)殖環(huán)境逐漸變得惡劣，常受到弧菌病及寄生蟲病的威脅，且感染死亡率極高。研發(fā)中藥飼料添加劑可提高尖吻鱸的免疫力，降低用藥污染，維持養(yǎng)殖環(huán)境的穩(wěn)定性，其無害、無殘留的特點(diǎn)有利于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)發(fā)展，對提高水產(chǎn)品安全及保證人類健康具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】甘草及其提取物在抑菌及抗氧化方面均有顯著作用。陸清兒和童朝明（2008）、楊靜等（2017）研究發(fā)現(xiàn)甘草總黃酮對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、雙歧桿菌及綠膿桿菌均具有一定的抑制作用;張光輝等（2019）利用人工配制的1，1-二苯基-2-苦基肼（DPPH）自由基檢測發(fā)現(xiàn)甘草中的黃酮類化合物甘草素、甘草甲苷和甘草乙苷對DPPH自由基的平均清除率分別達(dá)51.56%、44.85%和34.53%;趙森銘等（2019）發(fā)現(xiàn)甘草水提物中的半甘草異黃酮B也具有較強(qiáng)的抗氧化能力。中藥添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中已得到廣泛應(yīng)用，在黃鱔（Monopterus albus）（李金龍等，2013）、草魚（Ctenopharyngodon idellus）（譚娟等，2015）、閃光鱘（Acipenser stellatus）（齊茜等，2016）、鯽魚（Carassius auratus）（陳思航等，2018）、珍珠龍膽（Epinephelus lanceolatus ♂×E. fuscoguttatus ♀）（徐安樂等，2018）、凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）（葉建生等，2018）和中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）（周永昌等，2019）等養(yǎng)殖品種中均有研究，使用中藥添加劑后，黃鱔的增重率、消化酶及總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）等指標(biāo)顯著提高，草魚的增重率和SOD活性顯著提高，閃光鱘的增重率顯著提高，珍珠龍膽的腸道脂肪酶、腸道胰蛋白酶和SOD活性顯著提高，鯽魚的誘食活性及增重率顯著提高，凡納濱對蝦的存活率及SOD活性顯著提高，中華絨螯蟹的增重率、特定生長率、T-AOC和SOD等指標(biāo)顯著提高。可見，中藥具有提高機(jī)體抗氧化能力、增強(qiáng)抵抗力，提高存活率及誘食促進(jìn)消化等優(yōu)點(diǎn)。【本研究切入點(diǎn)】尖吻鱸在育苗（陸忠康，1998）、飼料添加（林黑著等，2010;袁豐華等，2010）、生長發(fā)育（趙旺等，2017;周勝杰等，2018b）及環(huán)境脅迫（胡靜等，2018;劉亞娟等，2018）等方面已有較多研究報道，但以中藥作為飼料添加劑的研究較少，尤其鮮見將甘草粉作為尖吻鱸飼料添加劑?！緮M解決的關(guān)鍵問題】在尖吻鱸飼料中添加不同比例的甘草粉，研究其對尖吻鱸生長特性、消化酶及非特異性免疫酶活性的影響，豐富尖吻鱸中草藥飼料添加劑的應(yīng)用種類，論證甘草作為尖吻鱸飼料添加劑的可行性，為其實際生產(chǎn)應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗用魚及投喂管理

試驗用尖吻鱸由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所熱帶水產(chǎn)研究開發(fā)中心自行培育。取體表光滑、無損傷、攝食良好、反應(yīng)機(jī)敏、游動活潑的尖吻鱸360尾，隨機(jī)平均分成4組[甘草粉添加量分別為0（對照）、1%、3%和5%]，每組3個平行，每個平行30尾魚，分別對其進(jìn)行飼料投喂試驗。投喂試驗在熱帶水產(chǎn)研究開發(fā)中心流水式海水養(yǎng)殖桶中進(jìn)行，各組尖吻鱸初始平均體重分別為13.53、13.95、13.96和14.27 g，初始平均體長分別為8.83、8.45、9.03和8.79 cm。試驗期間觀察并記錄其進(jìn)食情況和死亡狀況，同時進(jìn)行水質(zhì)檢測。主要水質(zhì)指標(biāo)如下：溫度（25～29）℃、pH 7.6～8.1、氨氮<0.01 mg/L、亞硝酸鹽<0.02 mg/L。每天投喂2次，時間分別為上午9：00和下午3：00，采用飽食法投喂，即投喂到尖吻鱸停止攝食為止。投喂后1 h左右進(jìn)行吸底，將糞便吸出，以免污染水體。下午4：30左右進(jìn)行1次換水，換水量控制在2/3左右，試驗周期為8周（56 d）。

1. 2 試驗飼料制備

試驗所用飼料及其配方由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所熱帶水產(chǎn)研究開發(fā)中心自行設(shè)計和制作，嚴(yán)格把控質(zhì)量。其中甘草粉購自亳州市德永堂生物科技有限公司，罐裝180 g，無添加劑。配方信息見表1。

1. 3 取樣方法及生長性能測定

試驗結(jié)束后停食24 h，稱總重。每組試驗3個平行，每個平行取3尾，每組共9尾，MS222麻醉后進(jìn)行取樣。紙巾擦拭體表，吸干水分，用滅菌的解剖工具進(jìn)行解剖，取其肝臟和血液，整個操作步驟置于冰袋上進(jìn)行。將每個平行的同種組織或器官混合后待測，置于-80 ℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆?，測定時稱其重量，按比例加入預(yù)冷的0.9%生理鹽水，冰浴勻漿制成10%的勻漿液，按照試劑盒說明進(jìn)行離心取上清液，最后將其稀釋成不同種酶測試所需的最適濃度。另外，每個平行隨機(jī)取3尾魚，分別測定體長、體重、內(nèi)臟重量和肝臟重量。增重率（WGR）、特定生長率（SGR）、臟體比（VSI）、肝體比（HSI）、體長增長率（BLGR）、肥滿度（CF）、飼料系數(shù)（FCR）和存活率（SR）的計算公式（李卓佳等，2011;趙書燕等，2017）如下：

WGR（%）=（Wt-W0）/W0 ×100

SGR（%/d）=（lnWt-lnW0）/t×100

VSI（%）=內(nèi)臟重量/魚體重量×100

HSI（%）=肝臟重量/魚體重量×100

BLGR（%）=（Lt-L0）/L0×100

CF=體重/體長3×100

FCR=投喂飼料重量/魚增重量

SR（%）=每桶試驗結(jié)束魚數(shù)/試驗開始魚數(shù)×100

式中，Wt為終末平均重量（g），W0為初始平均重量（g），Lt為終末平均體長（cm），L0為初始平均體長（cm），t為養(yǎng)殖試驗天數(shù)（d）。

1. 4 酶活指標(biāo)測定

采用試劑盒（南京建成生物有限公司）進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)測定，包括淀粉酶（AMS）、脂肪酶（LPS）、胰蛋白酶（TRYP）、胃蛋白酶（PP）、總抗氧化能力（T-AOC）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、過氧化物酶（POD）、過氧化氫酶（CAT）、丙二醛（MDA）和溶菌酶（LZM）。其中，血清酶活力用U/mL表示，組織酶活力用U/mg可溶性蛋白（prot）表示，個別酶含量單位以試劑盒為準(zhǔn)。

1. 5 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0進(jìn)行相關(guān)分析、單因素方差分析及多重比較，并運(yùn)用Excel 2016制圖。

2 結(jié)果與分析

2. 1 甘草對尖吻鱸生長性能的影響

在飼料中添加不同水平的甘草粉，投喂尖吻鱸56 d后，其生長指標(biāo)測定結(jié)果見表2。相對于對照組，各試驗組尖吻鱸的WGR及SGR均呈上升趨勢，且在5%試驗組呈顯著升高（P<0.05，下同）。各試驗組尖吻鱸的BLGR均顯著高于對照組。隨著飼料中甘草添加量的增加，F(xiàn)CR呈現(xiàn)下降趨勢，至5%時顯著低于對照組。各試驗組尖吻鱸的SR呈先上升后下降的變化趨勢，且在3%試驗組達(dá)最大值，其中3%和5%試驗組的SR顯著高于對照組。HSI在3%試驗組最高，在5%試驗組最低，但各組間無顯著差異（P>0.05，下同）。VSI則在1%試驗組達(dá)最大值，5%試驗組的臟體比最小，各組間也無顯著差異。對照組的CF最高，但各組間差異不顯著。

2. 2 甘草對尖吻鱸消化酶的影響

飼料中添加不同水平的甘草粉，投喂尖吻鱸56 d后，其AMS活力如圖1-A所示，隨著飼料中甘草粉添加量的增加，尖吻鱸前腸和肝臟中的AMS活力呈先上升后下降的變化趨勢，均在3%試驗組達(dá)最大值，前腸中3%和5%試驗組的AMS活力顯著高于對照組;肝臟中各試驗組尖吻鱸的AMS活力均顯著高于對照組;尖吻鱸胃中的AMS活力則呈先升后降再升的變化趨勢，在3%試驗組達(dá)最小值，顯著低于對照組。

隨著飼料中甘草粉添加量的增加，尖吻鱸胃和肝臟中LPS活力呈上升趨勢，在5%試驗組達(dá)最大值，且各試驗組尖吻鱸的LPS活力均顯著高于對照組;在前腸中LPS活力則呈先上升后下降的變化趨勢，在3%試驗組達(dá)最大值，各試驗組尖吻鱸的LPS活力也顯著高于對照組（圖1-B）。

飼料中添加不同水平的甘草粉，尖吻鱸前腸TRYP活力呈先上升后下降再上升的變化趨勢，其中1%和5%試驗組顯著高于對照組，3%試驗組顯著低于對照組（圖2）;尖吻鱸PP活力則呈上升趨勢，5%試驗組顯著高于對照組（圖3）。

以WGR和SGR為評判指標(biāo)，尖吻鱸攝食添加不同水平甘草的飼料后，其WGR和SGR與肝臟AMS活力的相關(guān)性最高，具有顯著性，與其他消化酶均無顯著相關(guān)性（表3）。

2. 3 甘草對尖吻鱸免疫酶的影響

飼料中添加不同水平的甘草粉，投喂尖吻鱸56 d后，其POD、CAT及GSH-PX活力測定結(jié)果分別見圖4、表4和表5。試驗組尖吻鱸肝臟中POD活力相對于對照組均有所增加，且在1%試驗組顯著升高;血清中CAT活力在各試驗組均顯著高于對照組，且在3%試驗組達(dá)最大值，GSH-PX活力在3%試驗組也達(dá)最大值并顯著高于對照組;肝臟中CAT活力和GSH-PX活力則在1%試驗組達(dá)最大值，并顯著高于對照組。

飼料中添加不同水平的甘草粉對尖吻鱸T-SOD、T-AOC活力及MDA含量的影響見表6～表8。隨著飼料中甘草粉添加量的增加，尖吻鱸血清T-SOD活力呈下降趨勢，在5%試驗組達(dá)最小值;肝臟中T-SOD活力呈先上升后略有下降的變化趨勢，在3%試驗組達(dá)最大值。但血清和肝臟中的T-SOD活力在各組間均無顯著差異（表6）。

尖吻鱸血清中T-AOC活力與血清T-SOD活力的變化趨勢相反，隨著飼料中甘草粉添加量的增加呈上升趨勢，在5%試驗組達(dá)最大值，且各試驗組均顯著高于對照組;肝臟中T-AOC活力與肝臟T-SOD活力的變化趨勢接近，先升高后下降，但各試驗組的T-AOC活力均顯著高于對照組（表7）。

尖吻鱸血清中MDA含量在1%試驗組最高、3%試驗組最低，3%試驗組相比對照組顯著下降，1%和5%試驗組相對于對照組均無顯著變化;隨著飼料中甘草粉添加量的增加，尖吻鱸肝臟中MDA含量呈下降趨勢，5%試驗組相對于對照組顯著下降（表8）。

飼料中添加不同水平的甘草粉對尖吻鱸血清LZM活力的影響見圖5。相對于對照組，尖吻鱸血清LZM活力在1%和5%試驗組呈顯著下降，而3%試驗組無顯著變化。

以SR為評判指標(biāo)，尖吻鱸攝食添加不同水平甘草粉的飼料后，其SR與肝臟T-SOD活力、肝臟T-AOC活力、血清T-AOC活力、血清CAT活力和血清GSH-PX活力呈顯著正相關(guān)，且與肝臟T-SOD活力相關(guān)性最高，與血清T-SOD活力和血清MDA含量呈顯著負(fù)相關(guān)（表9）。

3 討論

3. 1 甘草對尖吻鱸生長性能的影響

甘草中含有多種活性成分，主要包括甘草皂苷類的甘草皂苷、甘草酸和甘草次酸，甘草黃酮類的甘草總黃酮、甘草苷及甘草多糖等，其本身散發(fā)特殊的香氣且味甘（付道斌等，2018;李想和李冀，2019），可改變飼料口味，增強(qiáng)動物的食欲，在獸用藥及飼料添加方面均有廣泛應(yīng)用。已有研究表明，甘草及其所含物質(zhì)可提高肉仔雞的平均日增重及飼料轉(zhuǎn)化率（王麗榮等，2004），促進(jìn)灘羔羊的采食速度和采食量，提高增質(zhì)量效果（吳瑛等，2006），提高豬的平均日增重（賈春英和李海，2011）。在凡納濱對蝦飼料中添加甘草酸后，添加組凡納繽對蝦的SGR顯著高于對照組（Chen et al.，2010）;在黃鱸飼料中添加甘草和黃芪投喂后，添加組黃鱸的WGR、長度、SGR及飼料轉(zhuǎn)化率均有顯著提高（Elabd et al.，2016）。本研究中，尖吻鱸飼料添加甘草粉后也有類似的效果，各甘草添加組尖吻鱸的WGR和SGR均高于對照組，且添加量為5%時顯著高于對照組;各甘草添加組的魚體BLGR也顯著高于對照組，說明飼料中添加甘草對尖吻鱸生長有一定的促進(jìn)作用。

在SR方面，凡納濱對蝦飼料中添加甘草酸投喂后進(jìn)行攻毒測試時發(fā)現(xiàn)其添加組的SR明顯高于對照組（Chen et al.，2010）;甘草粗提物能顯著提高鯽魚感染細(xì)菌后的SR（王文博等，2007）。本研究中，各甘草添加組尖吻鱸的SR與對照組相比均呈升高趨勢，且添加量為3%和5%的SR顯著高于對照組，說明添加甘草粉同樣有利于提高尖吻鱸的SR。同時，本研究在進(jìn)行飼養(yǎng)投喂過程中發(fā)現(xiàn)，由于水溫降低，對照組的部分魚體出現(xiàn)白點(diǎn)病，但添加甘草粉的試驗組并未發(fā)現(xiàn)。有研究表明，甘草總黃酮對大腸桿菌、雙歧桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌等均有抑制作用（楊靜等，2017），甘草查爾酮A等還可協(xié)同氟康唑抑制白念珠菌活性（王元花等，2017）。因此，本研究中試驗組尖吻鱸的SR升高可能與甘草的抑菌作用有關(guān)。

3. 2 甘草對尖吻鱸消化酶的影響

國內(nèi)外對魚體消化酶的研究結(jié)果復(fù)雜多樣，魚的種類、飼料成分的變化及外部環(huán)境的改變均會對消化酶活力造成影響（Garling and Wilson，1976;黎軍勝等，2004;周勝杰等，2018a）。大量研究表明，中藥添加劑對魚類的消化酶具有促進(jìn)作用，如中藥可提高花鱸（劉慧吉等，2008）、斑點(diǎn)叉尾鮰（劉鴻艷等，2010）、羅非魚（牟洪生和劉慧娟，2012）等的消化酶活力。同樣，甘草具有相似作用，如團(tuán)頭魴幼魚飼料中添加甘草次酸后，其腸道中的LPS和蛋白酶活力均有顯著升高，腸道AMS活力也有輕微上升（蔡東森等，2015）。本研究中甘草粉的添加對尖吻鱸也有相似效果：在飼料中添加5%甘草粉，魚體的前腸AMS、TRYP和PP活力顯著升高，各甘草添加組尖吻鱸的肝臟AMS活力及前腸、胃和肝臟中的LPS活力均顯著升高。通過WGR、SGR與消化酶活力相關(guān)分析研究發(fā)現(xiàn)，盡管甘草能顯著提高尖吻鱸的各種消化酶活力，增強(qiáng)尖吻鱸的消化力，但WGR和SGR僅與肝臟AMS活力呈顯著正相關(guān)，添加量為5%時消化酶活力最好，WGR和SGR最高。

3. 3 甘草對尖吻鱸免疫酶的影響

免疫酶是機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，每種免疫酶均有其存在的作用與意義。機(jī)體的酶和非酶抗氧化防御系統(tǒng)與活性氧的清除能力相關(guān)（Zhao et al.，2013），SOD和GSH-PX是機(jī)體重要的抗氧化酶，T-AOC直接反映機(jī)體的抗氧化能力（Cheng et al.，2015;Tan et al.，2016）;GSH-PX可在谷胱甘肽存在的情況下消除脂質(zhì)過氧化物，抑制脂質(zhì)過氧化的傳播（Koneri et al.，2008）;CAT則負(fù)責(zé)催化組織器官中的H2O2;POD的主要作用是催化分解生物體內(nèi)的氧化物或過氧化物;LZM在血清中主要存在于中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和吞噬細(xì)胞，可水解細(xì)菌細(xì)胞壁，使細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)部滲透壓不同而破裂，通過此途徑殺滅病原微生物（劉紅柏等，2006）。而MDA是脂質(zhì)過氧化的分解產(chǎn)物（Gutteridge，1995），被廣泛用作脂質(zhì)過氧化的標(biāo)記物（Mansour，2000），其升高的水平可反映肝細(xì)胞脂質(zhì)過氧化損傷的程度（Hu et al.，2000）?？寡趸富盍Φ奶岣呖蓭椭鷻C(jī)體提高抗應(yīng)激能力。

已有研究表明，飼料中添加甘草粉可提高機(jī)體抗氧化酶活性，且對不同物種所促進(jìn)的免疫酶種類有所差異。凡納濱對蝦飼料中添加甘草酸后，其添加組SOD活力明顯高于對照組（Chen et al.，2010）;在黃鱸飼料中添加甘草和黃芪投喂后發(fā)現(xiàn)，添加組可顯著提高黃鱸的SOD、GSH-PX、CAT和LZM活性（Elabd et al.，2016）;不同的應(yīng)激源會顯著降低SOD活力，但投喂甘草的試驗組能有效修復(fù)下降，達(dá)到可控制的水平（Elabd et al.，2017）;在卡拉庫綿羊的飼料中添加4.5%甘草提取物投喂后發(fā)現(xiàn)，添加組的T-AOC和SOD活力較對照組分別增加1.8和1.2倍，有效提高了抗氧化狀態(tài)（Guo et al.，2019）;飼料中添加發(fā)酵甘草，能提高石斑魚肝臟SOD、GSH-PX和T-AOC活力（翁秦江等，2019）;甘草提取物對用CCl4誘導(dǎo)的鯉魚肝損傷模型具有保護(hù)作用，CCl4可使肝細(xì)胞中的SOD和GSH-PX活力明顯降低，但經(jīng)甘草提取液處理的肝細(xì)胞能升高至正常水平（Yin et al.，2011）。本研究結(jié)果顯示甘草粉的添加對尖吻鱸也有相似效果：在飼料中添加1%甘草粉，魚體的肝臟GSH-PX、CAT和POD活力顯著升高;添加3%甘草粉，血清GSH-PX活力顯著升高;各甘草添加組的肝臟T-AOC活力、血清T-AOC活力和血清CAT活力均顯著高于對照組，肝臟T-SOD活力比對照組提高23.5%;證明甘草對尖吻鱸抗氧化系統(tǒng)有促進(jìn)作用，為機(jī)體提供更好的保護(hù)。通過SR與免疫酶活力相關(guān)分析研究發(fā)現(xiàn)，SR與肝臟T-AOC、肝臟T-SOD、血清T-AOC、血清CAT和血清GSH-PX呈顯著正相關(guān)，說明抗氧化酶活力的提高，可增強(qiáng)機(jī)體的抗應(yīng)激能力，提高尖吻鱸的SR。

有研究表明，甘草對MDA的產(chǎn)生具有抑制作用。CCl4可使肝細(xì)胞中的MDA含量顯著升高，但經(jīng)甘草提取液處理的肝細(xì)胞能抑制MDA含量升高（Yin et al.，2011）;以添加甘草的飼料投喂斜帶石斑魚8周后進(jìn)行亞硝酸鹽脅迫，甘草添加組的肝臟MDA含量也比對照組顯著降低（翁秦江等，2019）。本研究中，肝臟MDA含量隨著飼料中甘草添加量的增加呈下降趨勢，且在5%試驗組呈顯著下降，與前人研究結(jié)果相似。說明甘草具有一定的護(hù)肝作用，可減少尖吻鱸的肝臟過氧化物積累，在添加量為5%時效果最好。

甘草對于LZM活力也有一定的影響。用添加甘草甜素的飼料投喂點(diǎn)帶石斑魚7 d后部分添加組LZM活力升高，而投喂14 d后部分添加組有輕微下降（崔培等，2013）;動物血清中的LZM活性可以因機(jī)體接觸抗原性物質(zhì)或免疫刺激劑而上升（韓永峰等，2018）。本研究結(jié)果表明，尖吻鱸血清中的LZM活力在1%和5%試驗組顯著低于對照組。可能是由于甘草具有較強(qiáng)的抑菌作用，殺滅水體中的病菌減少了機(jī)體接觸抗原性物質(zhì)，而導(dǎo)致尖吻鱸血清中的LZM活力下降。

4 結(jié)論

飼料中添加3%～5%甘草粉可更好地提高尖吻鱸消化酶活性、促進(jìn)魚體增長，協(xié)助殺菌，提高尖吻鱸的存活率;添加1%～3%甘草粉可增強(qiáng)尖吻鱸抗氧化能力，減少肝過氧化物積累。因此，飼料中添加適量的甘草對尖吻鱸幼魚具有促進(jìn)消化及提高免疫的作用。

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（責(zé)任編輯 羅 麗）