肖艷波，張琳，李群，左巧娟，王宗康

口腔鱗狀細(xì)胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）多發(fā)于舌、牙齦、頰部等部位，是一種上皮源性的惡性腫瘤?，F(xiàn)階段多通過(guò)手術(shù)切除治療后再輔助放療、化療等手段的綜合治療。雷霆等［1］研究提示盡管已經(jīng)進(jìn)行了綜合治療并進(jìn)行了淋巴組織清掃處理，但術(shù)后仍存在一定的OSCC的復(fù)發(fā)。故而，對(duì)OSCC的發(fā)病原因及轉(zhuǎn)移、侵襲機(jī)制進(jìn)行深入研究，探尋對(duì)OSCC具有較高敏感度和強(qiáng)特異性的標(biāo)志物已成為現(xiàn)階段口腔腫瘤研究的重要方向。雷霆等［2］研究還發(fā)現(xiàn)尿激酶型纖溶酶原激活劑（urokinasetype plasminogen activator，uPA）與鱗狀細(xì)胞癌關(guān)系密切，其表達(dá)水平與胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均具有密切聯(lián)系。環(huán)氧化酶-2（cyclooxygenase 2，COX-2）在炎癥及腫瘤等誘導(dǎo)下出現(xiàn)異常高表達(dá)，而在正常細(xì)胞和組織低表達(dá)或不表達(dá)，亦可參與腫瘤細(xì)胞的抗凋亡、增長(zhǎng)過(guò)程，促進(jìn)生成血管、腫瘤的轉(zhuǎn)移和浸潤(rùn)過(guò)程［3］。故而，為探討OSCC的發(fā)病原因及對(duì)其發(fā)展過(guò)程的評(píng)價(jià)，本研究深入探討了血清uPA、COX-2在OSCC中的表達(dá)及其意義，現(xiàn)匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017 年2—12 月湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院確診的OSCC 病人90 例（OSCC組）、健康體檢志愿者90例（對(duì)照組）。兩組病人的年齡、性別比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）OSCC 病人的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《口腔黏膜病學(xué)》第四版中的診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］；（2）年齡18～65 歲范圍之內(nèi)；（3）均為首診病人；（4）經(jīng)病理學(xué)檢查確診為OSCC；（5）本研究獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)（HN-LL-2016-59），獲得研究對(duì)象的知情同意。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）既往具有放化療病史；（2）伴有其他部位的惡性腫瘤；（3）免疫缺陷性疾?。唬?）伴有其他類型的病毒感染；（5）長(zhǎng)期使用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素的病人。

1.2 血清uPA、COX-2檢測(cè)方法 病人入院后取空腹靜脈血5 mL，離心后分離血清，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)血清uPA、COX-2 水平，試劑盒均購(gòu)于南京建成生物研究所，實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

表1 健康體檢志愿者與口腔鱗狀細(xì)胞癌（OSCC）病人的一般資料比較

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)軟件采用SPSS 18.0 版本，計(jì)量數(shù)據(jù)表述采用表示，組間比較采用成組t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 說(shuō)明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象的血清uPA、COX-2 水平比較OSCC組病人血清uPA、COX-2水平顯著的高于對(duì)照組，均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表2）。

2.2 不同病理學(xué)特征的OSCC 病人的血清uPA 水平比較 臨床分期（Ⅲ期+Ⅳ期）、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的OSCC組病人血清uPA水平顯著的高于臨床分期（Ⅰ期+Ⅱ期）、未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的OSCC 組病人，均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；在不同病理學(xué)分化的OSCC 病人中，血清uPA 水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表3）。

表2 健康體檢志愿者與口腔鱗狀細(xì)胞癌（OSCC）病人的血清尿激酶型纖溶酶原激活劑（uPA）、環(huán)氧合酶2（COX-2）水平比較/

表2 健康體檢志愿者與口腔鱗狀細(xì)胞癌（OSCC）病人的血清尿激酶型纖溶酶原激活劑（uPA）、環(huán)氧合酶2（COX-2）水平比較/

表3 不同病理學(xué)特征的口腔鱗狀細(xì)胞癌（OSCC）病人的血清尿激酶型纖溶酶原激活劑（uPA）水平比較/（mg/L，）

表3 不同病理學(xué)特征的口腔鱗狀細(xì)胞癌（OSCC）病人的血清尿激酶型纖溶酶原激活劑（uPA）水平比較/（mg/L，）

2.3 不同病理學(xué)特征的OSCC 病人的血清COX-2水平比較 臨床分期（Ⅲ期+Ⅳ期）、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化的OSCC 組病人血清COX-2 水平顯著的高于臨床分期（Ⅰ期+Ⅱ期）、未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及高中分化的的OSCC 組病人，均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表4）。

表4 不同病理學(xué)特征的口腔鱗狀細(xì)胞癌（OSCC）病人的血清環(huán)氧合酶2（COX-2）水平比較/（IU/L，）

表4 不同病理學(xué)特征的口腔鱗狀細(xì)胞癌（OSCC）病人的血清環(huán)氧合酶2（COX-2）水平比較/（IU/L，）

3 討論

口腔癌屬于臨床常見(jiàn)腫瘤，盡管早期具有增殖性紅斑的臨床表現(xiàn)，但不具有特異性，極易被臨床醫(yī)師忽視［5］。手術(shù)治療能夠有效提高病人的腫瘤局部控制率，但多因無(wú)法清除腫瘤不徹底導(dǎo)致腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。流行病學(xué)研究提示口腔癌癥病人術(shù)后5年生存率不足60%［6］。故而，提高OSCC的早期診斷準(zhǔn)確率及探究其轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的相關(guān)機(jī)制對(duì)探尋更有效的OSCC的治療方法具有重要意義。

uPA 屬于蛋白水解酶家族的重要一員，可結(jié)合纖溶蛋白酶后溶解細(xì)胞基底膜和外基質(zhì)，這也是腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲的基本條件［7-8］。此外，uPA能夠與細(xì)胞生長(zhǎng)因子產(chǎn)生協(xié)同作用，促進(jìn)上皮細(xì)胞三維結(jié)構(gòu)生產(chǎn)微毛細(xì)管。Christensen 等［9］研究發(fā)現(xiàn)骨髓瘤、白血病、結(jié)直腸癌等多種腫瘤病人均可發(fā)現(xiàn)血清uPA 的異常升高。梁新華等［10］在口腔鱗癌的研究中也發(fā)現(xiàn)，uPA 表達(dá)與腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。李支堯等［11］認(rèn)為uPA 可能對(duì)鼻咽癌的侵襲轉(zhuǎn)移起促進(jìn)作用。劉嶸等［12］研究發(fā)現(xiàn)uPA 與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。COX-2 主要存在肝臟、胃腸道及腎臟等組織器官中，屬于誘導(dǎo)型酶，在大多數(shù)正常組織中不表達(dá)，在炎性因素刺激下可誘導(dǎo)表達(dá)。其水平顯著升高后機(jī)體組織細(xì)胞的黏附功能會(huì)得到顯著加強(qiáng)，削弱機(jī)體組織細(xì)胞在凋亡功能，促進(jìn)機(jī)體組織細(xì)胞在增殖和轉(zhuǎn)錄，因此推測(cè)在腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移及侵襲過(guò)程中具有重要的影響［13-14］。徐佳瑛等［15］認(rèn)為COX-2在正?？谇火つぜ?xì)胞中幾乎不表達(dá)，50.0%的扁平苔蘚陽(yáng)性表達(dá)，80.0%口腔鱗癌陽(yáng)性表達(dá)，認(rèn)為COX-2 可能通過(guò)改變局部微環(huán)境而影響癌前病變及惡性腫瘤的進(jìn)展。王永華、柳志文［16］認(rèn)為COX-2可能通過(guò)誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的表達(dá)而促進(jìn)口腔鱗狀細(xì)胞癌中血管的形成，促使口腔鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展。

本研究結(jié)果顯示OSCC組病人血清uPA、COX-2水平顯著的高于對(duì)照組，均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。上述結(jié)果提示OSCC 病人體內(nèi)血清uPA、COX-2水平存在異常的升高，uPA、COX-2具有成為診斷OSCC重要指標(biāo)的潛力。由于uPA、COX-2與腫瘤細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞增生、遷移、侵襲活躍，管腔的形成加快關(guān)系密切，故本結(jié)果亦提示OSCC 病人uPA、COX-2升高能加速降解細(xì)胞基底膜和外基質(zhì)，加速腫瘤細(xì)胞的擴(kuò)散、轉(zhuǎn)移，并為腫瘤細(xì)胞的快速增值提供血液保障。

不用病理結(jié)果顯示臨床分期（Ⅲ期+Ⅳ期）、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的OSCC組病人血清uPA、COX-2水平顯著的高于臨床分期（Ⅰ期+Ⅱ期）、未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的OSCC組病人，均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。隨著臨床分期的加深，血清uPA、COX-2逐漸升高，該結(jié)果提示血清uPA、COX-2 有助于OSCC 的早期診斷、嚴(yán)重程度判斷，評(píng)估OSCC的治療效果及了解腫瘤進(jìn)展?fàn)顟B(tài)，亦可作為OSCC手術(shù)和輔助治療的客觀評(píng)價(jià)指標(biāo)。

隨著疾病嚴(yán)重程度的升高，uPA 系統(tǒng)分子基因轉(zhuǎn)錄能力及活動(dòng)逐漸增強(qiáng)，提高了相關(guān)蛋白的合成水平。uPA的過(guò)度表達(dá)能夠加速腫瘤組織的自身降解及ECM的快速降低，進(jìn)而滿足腫瘤細(xì)胞的移動(dòng)需要，促進(jìn)腫瘤新生血管的生成及腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移和侵襲［17-18］。COX-2表達(dá)升高能顯著提高機(jī)體組織細(xì)胞的黏附功能，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的異常增殖、侵襲及轉(zhuǎn)錄，袁建梅等［19-20］研究均證實(shí)COX-2 在乳腺癌、結(jié)腸癌等腫瘤高表達(dá)，可促進(jìn)腫瘤血管的生成及轉(zhuǎn)移、抑制機(jī)體免疫功能，參與調(diào)解腫瘤細(xì)胞增殖與凋亡等過(guò)程，這也均與本研究結(jié)果一致。

綜上所述，OSCC 組病人血清uPA、COX-2 水平較健康對(duì)象顯著升高，并且與OSCC 病情進(jìn)展關(guān)系密切，因此本課題組認(rèn)為uPA、COX-2 可能對(duì)OSCC的侵襲轉(zhuǎn)移起促進(jìn)作用。