李 雷，吳伍濤，許 淵，童 盼

（湖北省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院荊州分院，湖北荊州 434000）

硒對(duì)正常的生命過程是必不可少的，所有動(dòng)物都需要這種無機(jī)微量元素。硒的重要性直到1973 年才被發(fā)現(xiàn)，當(dāng)時(shí)它被發(fā)現(xiàn)是谷胱甘肽過氧化物酶的組成部分，這種酶是一種非常有效的抗氧化劑，保護(hù)身體免受自由基氧化傷害（鐵梅等，2017）。該酶在肝臟或血漿中的活性水平提示機(jī)體硒的供應(yīng)量。過氧化谷胱甘肽通過破壞過氧化氫和氫過氧化物，利用谷胱甘肽的還原性來保護(hù)細(xì)胞和細(xì)胞膜免受氧化損傷。硒已經(jīng)在多種水產(chǎn)動(dòng)物（如虹鱒魚、鯰魚、大西洋鮭魚和幼年石斑魚）中得到研究。王磊等（2015）研究發(fā)現(xiàn)，有機(jī)硒（硒代蛋氨酸）比無機(jī)硒（亞硒酸鈉）具有更高的生物利用度。硒與動(dòng)物組織中的蛋白質(zhì)相關(guān)，而肌肉和海鮮是食物中可靠的礦物質(zhì)元素來源。肉類氧化反應(yīng)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和食品質(zhì)量的損失，因此，為了提高肉的氧化穩(wěn)定性，在家畜飼料中添加硒等抗氧化劑可以改善肉的質(zhì)量（Downs 等，2000）。本研究旨在評(píng)估不同硒源（亞硒酸鈉和硒代蛋氨酸）在鯽魚上的應(yīng)用，研究其對(duì)鯽魚生長(zhǎng)性能、抗氧化、體成分及硒沉積的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)日糧與設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選擇120 條初始體重為（14.5±0.49）g 的鯽魚，隨機(jī)分為3 組，每組4 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 條。3 組分別飼喂基礎(chǔ)日糧（對(duì)照組）、基礎(chǔ)飼糧+0.5 mg/kg 硒（以亞硒酸鈉或硒代蛋氨酸形式，T1 或T2 組），試驗(yàn)為期30 d。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。對(duì)照組與試驗(yàn)組的日糧硒設(shè)計(jì)值分別為0、0.5 和0.5 mg/kg，實(shí)測(cè)值分別為0.04、0.56 和0.54 mg/kg。

試驗(yàn)動(dòng)物在2 個(gè)混凝土罐中（每個(gè)罐體尺寸為400 cm×140 cm×105 cm）進(jìn)行馴化，每日用基礎(chǔ)日糧飼喂2 次，連續(xù)2 周，之后將健康的鯽魚在水產(chǎn)養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)殖30 d，初始放養(yǎng)密度為每個(gè)魚缸10 只。試驗(yàn)期間分別在早上6 點(diǎn)、中午12 點(diǎn)和下午6 點(diǎn)各飼喂1 次，每日飼料投喂量約為總體重的0.03，并根據(jù)普通鯽魚的實(shí)際飼料攝入量進(jìn)行適當(dāng)調(diào)節(jié)。每天在第2 次投料前通過虹吸管收集每個(gè)水族館的飼料殘留物。記錄每天飼料投喂量。每隔3 天清洗一遍魚缸。水溫控制在24 ～26℃，室溫維持在28℃，每天光照12 h，黑暗12 h。通過測(cè)定水溫和溶解氧濃度來控制水質(zhì)，使水中溶解氧保持在6 mg/L 以上。

表1 試驗(yàn)日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2 樣品采集與分析 采集200 g 基礎(chǔ)日糧用于分析粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、總能量和水分。在為期30 d 的試驗(yàn)中，測(cè)定每個(gè)魚缸所有鯽魚的開始和結(jié)束體重。同時(shí)計(jì)算每個(gè)魚缸的鯽魚存活率。并計(jì)算特定生長(zhǎng)速率，具體計(jì)算公式如下。

特 定 生 長(zhǎng) 速 率/%=（末 重- 初 重）/ 末 重×100。

為了對(duì)鯽魚肌肉進(jìn)行生化分析和谷胱甘肽過氧化物酶分析，在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，從每個(gè)魚缸隨機(jī)收集6 只鯽魚（禁食24 h），尾端靜脈采血后分離血清，同時(shí)收集肝臟樣品用于勻漿，肝臟和血清中谷胱甘肽過氧化物酶活性采用用試劑盒法測(cè)定。利用原子吸收光度計(jì)法測(cè)定肌肉硒含量。將魚粉碎烘干制備成風(fēng)干樣品，用于分析水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 軟件單因素方差分析，采用Ducan’s 法進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)結(jié)果以“平均值± 標(biāo)準(zhǔn)誤差”表示，P ＜0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長(zhǎng)性能 3 種飼料處理中不同硒源對(duì)水質(zhì)的影響均不顯著（P ＞0.05）?？偘?、亞硝酸鹽 和pH 分 別 為0 ～0.2 mg/L、0 ～0.1 mg/L 和7.0 ～7.4，且均穩(wěn)定在可接受范圍內(nèi)。由表2可知，T1 和T2 組與對(duì)照組相比顯著提高了鯽魚的特定生長(zhǎng)率，分別提高41.15% 和44.13%（P ＜0.05），同時(shí)末重也顯著提高了13.51% 和13.06%（P ＜0.05）。但T1 和T2 組對(duì)末重和特定生長(zhǎng)率的影響無顯著差異（P ＞0.05）。對(duì)照組與處理組對(duì)鯽魚初重、存活率和料重比的影響均無顯著差異（P ＞0.05）。

表2 不同硒源對(duì)鯽魚生長(zhǎng)性能的影響

2.2 體成分和硒含量 由表3 可知，對(duì)照組較T1和T2 組顯著降低了肌肉硒水平（P ＜0.05）。與對(duì)照組和T1 組相比，T2 組肌肉硒含量最高（P＜0.05）。各組對(duì)鯽魚機(jī)體水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量的影響均無顯著差異（P ＞0.05）。

表3 不同硒源對(duì)鯽魚機(jī)體化學(xué)成分及硒含量的影響

2.3 肝臟和血清抗氧化酶活性 由表4 可知，不同硒源對(duì)肝臟和血清谷胱甘肽過氧化物酶活性的影響均無顯著差異（P ＞0.05），但補(bǔ)充硒提高了肝臟和血清抗氧化酶活性。

表4 不同硒源對(duì)鯽魚肝臟和血清谷胱甘肽 過氧化物酶活性的影響 U

3 討論

本研究結(jié)果表明，日糧補(bǔ)充硒（無論是有機(jī)硒還是無機(jī)硒）均可顯著提高鯽魚生長(zhǎng)性能，作者認(rèn)為，硒對(duì)鯽魚的生長(zhǎng)是必要的。Gatlin 和Wilson（2014）也觀察到類似結(jié)果，他們發(fā)現(xiàn)，斑點(diǎn)叉尾鮰的生長(zhǎng)受日糧硒水平的影響，且缺硒通常會(huì)抑制生長(zhǎng)。Poston 等（2006）發(fā)現(xiàn)，含0.1 mg/kg 硒和500 IU/kg 維生素E 的飼料可以顯著降低缺乏硒鮭魚苗的死亡率。本研究結(jié)果從相反的角度也證明了這一點(diǎn)，這可能與日糧中硒含量有關(guān)。硒在動(dòng)物體內(nèi)具有大量的生物學(xué)功能，其中最重要和已知的作用是其抗氧化作用，因?yàn)樗纬蓙單腚装彼?，谷胱甘肽過氧化物酶的中心部分。本研究結(jié)果中T1 和T2 組較對(duì)照組提高了血清和肝臟氧化酶活力較高。谷胱甘肽過氧化物酶在細(xì)胞中起重要作用，該酶的還原形式在胞質(zhì)和線粒體基質(zhì)水平上可以降低過氧化氫和脂質(zhì)過氧化氫（Dong，2000）。硒的作用也體現(xiàn)在其他功能性蛋白上，如硒蛋白，與碘相互作用可以防止異常的激素代謝，因此，硒對(duì)鯽魚生長(zhǎng)性能的影響可能與硒的上述功能有關(guān)。

本研究比較了基礎(chǔ)日糧與硒補(bǔ)充日糧對(duì)鯽魚肌肉硒沉積量的影響，結(jié)果顯示，硒代蛋氨酸組肌肉硒含量最高，亞硒酸鈉組其次，對(duì)照組最低，這與Lorentzen 等（1994）在大西洋鮭魚上得到的研究結(jié)果一致，其發(fā)現(xiàn)與給予亞硒酸鈉和對(duì)照組相比，硒代蛋氨酸組的肌肉和全身硒濃度最高，這說明亞硒酸鈉和硒代蛋氨酸的代謝方式不同，雖然無機(jī)和有機(jī)形式的硒都能通過腸道屏障。但試驗(yàn)表明，有機(jī)硒（硒代蛋氨酸）的生物利用度高于無機(jī)硒（亞硒酸鈉）（孟田田等，2017）。硒的生物利用度不僅取決于腸道吸收利用率，還取決于轉(zhuǎn)化的生物活性形式（郄彥昭等，2010）。

評(píng)估硒體內(nèi)生物利用率的一個(gè)有效方法是通過抗氧化酶- 谷胱甘肽過氧化物酶活性來評(píng)判。本研究添加硒代蛋氨酸的T2 組與添加亞硒酸鈉的T1 組相比，添加硒代蛋氨酸的日糧提高了鯽魚血漿中谷胱甘肽過氧化物酶活性，表明硒有機(jī)形式的生物利用度高于無機(jī)形式。

4 結(jié)論

綜上所述，本研究證明日糧添加不同硒源（硒代蛋氨酸和亞硒酸鈉）能提高鯽魚的生長(zhǎng)性能、谷胱甘肽過氧化物酶活性和肌肉硒濃度。此外，有機(jī)硒（硒代蛋氨酸）形式比無機(jī)形式（亞硒酸鈉）效果更好。