馬少康

T 細(xì)胞為淋巴細(xì)胞的主要成分,可以參與多種生物功能,殺死靶細(xì)胞,輔助或者抑制B 細(xì)胞產(chǎn)生抗體。CD3+、CD4+、CD8+是T 淋巴細(xì)胞亞群的重要組成部分,參與免疫應(yīng)答。支氣管哮喘簡(jiǎn)稱哮喘,慢性氣道炎癥是一種涉及多種細(xì)胞,如涉及嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及氣道上皮細(xì)胞等成分的慢性炎癥性疾病,臨床上發(fā)病率比較高。近幾年由于環(huán)境的改變,該病的發(fā)病率逐年上升,中國約有2000 萬人罹患哮喘,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量,給社會(huì)帶來承重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)［1］,該病是一種由臨床免疫機(jī)制介導(dǎo)的慢性肺病并與臨床患者的免疫功能好壞密切相關(guān)。罹患哮喘患者臨床體液和臨床細(xì)胞免疫功能均異常。由于該病反復(fù)發(fā)作,治療費(fèi)用較高,因此如果判斷疾病的進(jìn)展非常重要。大量研究表明臨床上支氣管哮喘患者的外周血淋巴細(xì)胞亞群的增加與否與臨床哮喘發(fā)作程度密切相關(guān)。本研究對(duì)支氣管哮喘患者外周血中CD4+、CD8+、CD3+、HLA-DR細(xì)胞水平進(jìn)行研究,探討支氣管哮喘患者外周血T 細(xì)胞的關(guān)系,為臨床支氣管哮喘的免疫預(yù)防和臨床診斷提供理論依據(jù),現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年1 月～2019 年1 月本院80 例支氣管哮喘患者,隨機(jī)分為試驗(yàn)組(急性發(fā)作期患者)和對(duì)照組(非急性發(fā)作期患者),各40 例。其中,試驗(yàn)組患者男21 例,女19 例；年齡52～63 歲,平均年齡(57.0±4.5)歲；病程9～13 年,平均病程(10.2±3.23)年；基礎(chǔ)疾?。焊哐獕? 例,冠心病1 例,糖尿病2 例。對(duì)照組患者男20 例,女20 例；年齡46～67 歲,平均年齡(55.0±4.2)歲；病程3～10 年,平均病程(5.3±3.18)年；基礎(chǔ)疾?。焊哐獕? 例,冠心病1 例,糖尿病2 例。兩組患者的性別、年齡、病程、基礎(chǔ)疾病等一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①研究得到了臨床醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn),所有患者都深度了解研究且均簽署知情同意書；②表現(xiàn)為不停反復(fù)喘息、咳嗽、呼吸短促、胸悶的患者,接觸過過敏原以及冷空氣、物理、化學(xué)刺激等的患者,呼吸道感染的患者,過度運(yùn)動(dòng)以及過度通氣(如大笑和哭鬧)的患者,夜間或者凌晨發(fā)作加劇的患者；③發(fā)病過程中可在雙肺聽到散在或彌漫的喘息聲的患者；④抗哮喘治療可有效或自發(fā)緩解的呼氣期延長(zhǎng)的患者。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①其他肺部疾病包括肺纖維化、肺癌、支氣管擴(kuò)張等患者；②肝腎功能不全患者；③最近使用免疫抑制劑的患者；④腫瘤患者、結(jié)核患者以及其他免疫性疾病的患者；⑤不愿意參加研究的患者。

1.3 方法 所有受試者在早晨均抽取5 ml 空腹外周靜脈血,測(cè)定外周血中CD3+、CD4+、CD8+、HLA-DR 細(xì)胞的含量。檢測(cè)過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

試驗(yàn)組CD8+、CD3+、HLA-DR 細(xì)胞水平分別為(36.35±4.16)%、(1365.90±301.40)%、(1.98±0.72)%,均高于對(duì)照組的(23.41±3.63)%、(1105.90±381.40)%、(1.59±0.71)%,CD4+、CD4+/CD8+細(xì)胞水平分別為(22.52±3.41)%、(0.61±0.62),均低于對(duì)照組的(30.31±2.93)%、(1.30±0.55),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組患者外周血CD8+、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、HLA-DR 細(xì)胞水平比較()

表1 兩組患者外周血CD8+、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、HLA-DR 細(xì)胞水平比較()

注：與對(duì)照組比較,aP＜0.05

3 討論

T 淋巴細(xì)胞來源于人體骨髓多能干細(xì)胞,其為卵黃囊和胚胎期的肝臟。在人類胚胎和初級(jí)階段,骨髓中的一些多能干細(xì)胞或前T 細(xì)胞在胸腺激素的誘導(dǎo)下進(jìn)入胸腺并且長(zhǎng)大最后變成具有免疫活性的T 細(xì)胞。成熟T 細(xì)胞通過血流分布到外周免疫器官的胸腺依賴區(qū)并通過淋巴管、外周血和組織液循環(huán)最后發(fā)揮細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能。T 細(xì)胞的循環(huán)利用有助于廣泛接觸進(jìn)入人體的抗原并增強(qiáng)免疫反應(yīng)最后使免疫記憶保持更多時(shí)間。T 細(xì)胞膜上有許多不同的標(biāo)記物,其主要是表面抗原和表面受體。這些表面標(biāo)記物是結(jié)合在細(xì)胞膜上的大蛋白質(zhì)分子。輔助T 細(xì)胞在其他T 淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答中起輔助和增強(qiáng)作用。由于支氣管哮喘的具體發(fā)病機(jī)制尚不清楚,一些研究報(bào)道過敏反應(yīng)和氣道炎癥與支氣管哮喘的病理機(jī)制密切相關(guān),免疫功能和炎癥是影響過敏反應(yīng)和氣道炎癥的重要因素。免疫應(yīng)答的主要參與細(xì)胞為T 淋巴細(xì)胞,因此,T 淋巴細(xì)胞的異常變化是評(píng)價(jià)哮喘的重要指標(biāo)。

哮喘是一種免疫性過敏性疾病,其特征是慢性呼吸道炎癥反應(yīng)涉及多種細(xì)胞［2］。大量研究發(fā)現(xiàn),T 淋巴細(xì)胞亞群的異常表達(dá)對(duì)支氣管哮喘的病情有較大影響。臨床上CD3+和CD4+以及CD8+是臨床T 淋巴細(xì)胞亞群的重要組成部分,且臨床上CD4+和CD8+的比值分別表示免疫功能增強(qiáng)或減弱的程度。CD4+/CD8+是評(píng)價(jià)免疫功能的關(guān)鍵指標(biāo)。氣管哮喘發(fā)作時(shí),CD4+T 細(xì)胞的激活和CD8+T 細(xì)胞功能的抑制是一致的［3］。提示支氣管哮喘發(fā)作輔助性T 細(xì)胞的比例明顯優(yōu)于抑制性T 細(xì)胞,進(jìn)一步說明CD4+T 淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)在支氣管哮喘發(fā)作中起著重要作用。

病理學(xué)臨床免疫反應(yīng)是臨床哮喘患者氣道慢性炎癥發(fā)生的主要原因,當(dāng)患者氣道受到刺激時(shí)會(huì)產(chǎn)生和釋放炎癥介質(zhì)并導(dǎo)致呼吸分泌物增多,影響肺通氣。T 淋巴細(xì)胞的主要功能是調(diào)節(jié)蛋白抗原誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答,并且其中最重要的是CD4+T 細(xì)胞,而且CD4+T 細(xì)胞與CD8+T 細(xì)胞比例的失衡會(huì)影響到患者免疫系統(tǒng)。有研究表明,當(dāng)CD4+T 細(xì)胞或CD8+T 細(xì)胞的水平或功能異常時(shí)將會(huì)導(dǎo)致患者T 淋巴細(xì)胞調(diào)節(jié)失去平衡［3］,并導(dǎo)致機(jī)體發(fā)病。有學(xué)者對(duì)健康人外周血CD8+T與哮喘患者相比較發(fā)現(xiàn),無論是發(fā)作期還是緩解期,其患者外周血的臨床CD8+T 細(xì)胞水平明顯高于健康人,且CD4+T細(xì)胞水平以及CD4+/CD8+比值均低于健康人,這項(xiàng)研究表明,哮喘患者的T 淋巴細(xì)胞有差別于正常人,說明通過T 淋巴細(xì)胞的含量可對(duì)患者的疾病狀態(tài)進(jìn)行判斷。

有學(xué)者對(duì)哮喘患者進(jìn)行分組,急性發(fā)作期與非急性發(fā)作期相比較,發(fā)現(xiàn)在急性發(fā)作期下其外周血的CD8+T 細(xì)胞水平明顯高于非急性發(fā)作期［4］。而哮喘患者CD4+T 細(xì)胞水平和CD4+/CD8+比值均低于非急性發(fā)作期,且以上研究與本研究結(jié)果相同。最近研究表明,哮喘患者CD4+細(xì)胞在維持免疫平衡和抑制炎癥方面起著重要作用,并與哮喘患者氣道的炎癥臨床發(fā)作密切相關(guān)。哮喘患者外周血中CD4+數(shù)量減少會(huì)導(dǎo)致哮喘患者免疫抑制減弱,并且患者T 淋巴細(xì)胞的功能取決于T 淋巴細(xì)胞表面抗原的識(shí)別［5］。

哮喘患者T 淋巴細(xì)胞活化階段發(fā)生在抗原刺激患者淋巴細(xì)胞活化和增殖的階段,哮喘患者激活T 淋巴細(xì)胞后分泌的細(xì)胞因子與細(xì)胞接觸后分泌的細(xì)胞因子激活其他的免疫細(xì)胞,最近的研究發(fā)現(xiàn)哮喘患者T 淋巴細(xì)胞在活化后會(huì)表達(dá)多種表面分子,包括CD69 和HLA-DR。這些分子的表達(dá)作為哮喘患者T 細(xì)胞活化的指標(biāo)并已廣泛應(yīng)用于哮喘患者T 淋巴細(xì)胞的研究中。

在許多慢性傳染病如艾滋病病毒感染、慢性乙型肝炎感染、EB 病毒感染和自身免疫性疾病,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中,外周血中T 淋巴細(xì)胞表面活化標(biāo)記物等的表達(dá)都會(huì)加強(qiáng)。臨床上哮喘患者體液免疫和細(xì)胞免疫都依賴于患者T 淋巴細(xì)胞的增加,并通過鑒定抗原從而使細(xì)胞呈現(xiàn)特定抗原以幫助CD4+T 淋巴細(xì)胞。哮喘患者CD8+T 細(xì)胞活化后成為具有細(xì)胞毒性的T 淋巴細(xì)胞,其是哮喘患者免疫應(yīng)答的重要效應(yīng)細(xì)胞,并具有臨床抗原特異性,因此檢測(cè)哮喘患者T 淋巴細(xì)胞活化標(biāo)志物有助于判斷患者機(jī)體的細(xì)胞免疫學(xué)功能［6］。急性期患者CD4+T 淋巴細(xì)胞、CD8+T 淋巴細(xì)胞及HLA-DR 的表達(dá)水平高于緩解期。急性期哮喘患者比緩解期哮喘患者的T 淋巴細(xì)胞活化增多,且比急性期哮喘患者的細(xì)胞免疫功能活躍,這與以往的研究一致,認(rèn)為T 淋巴細(xì)胞介導(dǎo)并參與細(xì)胞免疫反應(yīng),在哮喘患者氣道病變和全身炎癥反應(yīng)的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。

綜上所述,通過CD8+、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、HLADR 細(xì)胞水平對(duì)哮喘患者疾病的進(jìn)展情況進(jìn)行評(píng)估具有顯著意義。但是本研究尚有不足之處,研究樣本例數(shù)過少,觀察指標(biāo)比較單一,應(yīng)該從多中心進(jìn)行樣本抽取,擴(kuò)大樣本數(shù)量,增加免疫指標(biāo),為臨床治療提供作證。