張紅剛，趙照林，張 程，郭明慧，郭 尚，郝秀麗

（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西功能食品研究院，山西 太原 030030）

“沐野1號(hào)”是原山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所與忻州市沐野食用菌研究所等單位聯(lián)合馴化選育的雙孢蘑菇新品系[1]，其具有菌蓋淺褐色，菌柄白色，口感獨(dú)特，菇柄可食用，菇柄、菇蓋嫩脆香，風(fēng)味濃厚，貨架期長(zhǎng)等特點(diǎn)[2]。本研究在常用雙孢蘑菇生產(chǎn)配方的基礎(chǔ)上，以玉米芯、玉米秸稈、牛糞和雞糞等作為“沐野1號(hào)”傳統(tǒng)菇房生產(chǎn)培養(yǎng)料，由此設(shè)計(jì)6個(gè)不同配方。通過試驗(yàn)，觀測(cè)并分析不同培養(yǎng)料配方條件下，“沐野1號(hào)”菌絲活力和子實(shí)體產(chǎn)量，同時(shí)進(jìn)行經(jīng)濟(jì)效益分析，進(jìn)而篩選出產(chǎn)量高、成本低、經(jīng)濟(jì)效益好的優(yōu)良配方，以期為后期加大推廣面積提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株

雙孢蘑菇新品系“沐野1號(hào)”，由原山西農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所提供。

1.1.2 培養(yǎng)料原料及配方

玉米芯、玉米秸稈、麥秸、牛糞、雞糞、尿素、磷肥、復(fù)合肥和石膏粉等。

本研究共設(shè)計(jì)6個(gè)培養(yǎng)料配方，進(jìn)行雙孢蘑菇新菌株“沐野1號(hào)”最佳培養(yǎng)料配方篩選，具體配方見表1，表中所列配方含水量均為60%～65%。

表1 不同培養(yǎng)料配方Tab.1 Different substrate formulations

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 栽培方法

試驗(yàn)在山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所平遙縣雙孢蘑菇試驗(yàn)基地進(jìn)行。按照當(dāng)?shù)剡m宜的栽培季節(jié)進(jìn)行管理，不同配方培養(yǎng)料的堆制發(fā)酵均選擇在2018年8月初進(jìn)行預(yù)濕主料，然后建堆。建堆時(shí)邊建堆邊澆水，建成后堆頂要成龜背形，每個(gè)發(fā)酵料堆以高1.5 m，寬2 m，長(zhǎng)5 m為標(biāo)準(zhǔn)。料堆建成后要以草氈覆蓋，保持濕度。建堆1周后，進(jìn)行第1次翻堆，以后每隔5 d、4 d和3 d各翻1次。翻堆時(shí)要做到上下里外混合均勻，先從外到內(nèi)，從內(nèi)到外，再?gòu)纳系较?，從下到上翻?dòng)。翻堆時(shí)要注意水分調(diào)節(jié)，第3次翻堆時(shí)，將pH調(diào)節(jié)至7.0左右。為減少熱量散失，最后1次翻堆結(jié)束后立即進(jìn)棚，隨后按照傳統(tǒng)方法進(jìn)行二次發(fā)酵。要點(diǎn)是將棚內(nèi)溫度加到58℃～60℃并持續(xù) 10 h～12 h，再將溫度降至48℃～50℃范圍持續(xù)7 d。至9月中旬，發(fā)酵料腐熟，無腐臭味，棕褐色，松軟適中，培養(yǎng)料的一次、二次發(fā)酵結(jié)束。

隨后將發(fā)酵料按照25 kg·m-2鋪料，選擇“沐野1號(hào)”麥粒種進(jìn)行播種，播種量為1 kg·m-2。先撒播一半菌種，然后搔動(dòng)料面，讓菌種落入料面內(nèi)，然后將剩余的菌種均勻撒播在料面上，將其撫平，使菌種掉落在培養(yǎng)料縫隙，與料面充分接觸，以利于菌絲上料。

常規(guī)管理期間可在菌絲生產(chǎn)到料層厚度一半時(shí)，進(jìn)行打孔，進(jìn)而改善料內(nèi)通氣狀況，促進(jìn)菌絲“吃料”，菌絲“吃料”結(jié)束后，進(jìn)行覆土管理環(huán)節(jié)。

在覆土前3 d，每天需用1%的石灰水噴灑料面2次，噴水同時(shí)要注意通風(fēng)?？煞?次覆土，先覆直徑2.5 cm左右的粗土，厚度4 cm。當(dāng)菌絲生長(zhǎng)到粗土厚度的1/3時(shí)再覆細(xì)土，用量為13 kg·m-2。

覆土后，溫度控制在14℃～18℃，合理控制菌絲生長(zhǎng)，進(jìn)而促進(jìn)原基形成。在1 d～2 d內(nèi)分4次噴撒重水，用量為2.5 kg·m-2。隨后土層表面原基大量形成，等大部分原基發(fā)育成黃豆大小時(shí)，噴2 d分4次噴灑出菇水，用量為2.5 kg·m-2。覆土層表面有菇蕾形成后，加強(qiáng)通風(fēng)，并保持空氣濕度在85%～90%，溫度在16℃～22℃，菌蓋長(zhǎng)至3 cm～5 cm而未開傘時(shí)采收，同時(shí)清除殘留菇根。每次采收完畢后，停水2 d清床并補(bǔ)土，然后噴灑轉(zhuǎn)潮水。

1.2.2 不同培養(yǎng)料對(duì)“沐野1號(hào)”菌絲體及子實(shí)體生長(zhǎng)的影響

以山西省常用培養(yǎng)料配方作為CK，再設(shè)置A、B、C、D和E等5個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)置3次重復(fù)。

每個(gè)重復(fù)的播種面積為設(shè)定為1 m2，同時(shí)四周設(shè)寬6 cm的保護(hù)行，播種小區(qū)按照隨機(jī)區(qū)組排列。播種后定期觀察菌絲生長(zhǎng)情況。通過目測(cè)，觀察菌絲的密度、氣生菌絲量和顏色，并記錄萌發(fā)時(shí)間，以次來判斷菌絲長(zhǎng)勢(shì)。記錄菌絲生長(zhǎng)時(shí)間和相對(duì)吃料深度情況，直至長(zhǎng)滿培養(yǎng)料。相對(duì)吃料深度（Y，%）公式為：

Y=Y1/Y2

式中：Y1表示菌絲吃料深度（cm）；Y2表示培養(yǎng)料厚度（cm）。

待試驗(yàn)設(shè)計(jì)中的6個(gè)培養(yǎng)料配方均長(zhǎng)滿菌絲后，進(jìn)行統(tǒng)一的覆土出菇管理，定期按照現(xiàn)蕾時(shí)間、出菇整齊度、單位面積產(chǎn)量等指標(biāo)進(jìn)行數(shù)據(jù)記錄。

具體取樣方法：每個(gè)處理的3個(gè)重復(fù)小區(qū)內(nèi)隨機(jī)抽取10個(gè)采收點(diǎn)，依次采收保管，并標(biāo)記。采收時(shí)要保證在每個(gè)采收點(diǎn)內(nèi)均為隨機(jī)取樣。單個(gè)潮次，在每個(gè)小區(qū)隨機(jī)采收菇數(shù)為20朵，即每個(gè)采收點(diǎn)取2個(gè)菇。采集到的樣本及時(shí)測(cè)定，先測(cè)定單菇重量，再用刻度尺測(cè)定菌蓋厚度和直徑，菌柄直徑和長(zhǎng)度。

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件采用SAS和Excel。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)料對(duì)“沐野1號(hào)”菌絲生長(zhǎng)時(shí)間與相對(duì)吃料深度影響

不同培養(yǎng)料配方處理?xiàng)l件下“沐野1號(hào)”菌絲生長(zhǎng)時(shí)間與相對(duì)吃料深度之間的影響結(jié)果見表2。

表2 不同培養(yǎng)料配方條件下菌絲生長(zhǎng)時(shí)間與相對(duì)吃料深度Tab.2 Growth time and relative feeding depth of mycelium in different media

從表2可見，“沐野1號(hào)”菌絲在0～5 d生長(zhǎng)較慢，5 d～15 d后生長(zhǎng)迅速，20 d左右后又趨于緩和，最終在第35天左右均長(zhǎng)滿料面。通過6種不同培養(yǎng)料菌絲生長(zhǎng)吃料深度的比較，可以看出，培養(yǎng)料D配方的菌絲生長(zhǎng)速度一直比較快，最終在第30天時(shí)吃透料面；其次是配方B，對(duì)照配方CK的菌絲在起始生長(zhǎng)階段保持了較快的增長(zhǎng)速度，可經(jīng)過一段時(shí)間以后，生長(zhǎng)速度變緩。

2.2 “沐野1號(hào)”不同培養(yǎng)料中菌絲生長(zhǎng)勢(shì)的測(cè)定

不同培養(yǎng)料對(duì)雙孢蘑菇“沐野1號(hào)”菌絲體生長(zhǎng)勢(shì)的影響見表3。

表3 不同培養(yǎng)料配方對(duì)雙孢蘑菇“沐野1號(hào)”菌絲體生長(zhǎng)勢(shì)的影響Tab.3 Effect of different culture materials on mycelium growth of Agaricus bisporus strain‘Muye No.1’

通過表3可以看出，培養(yǎng)料配方D條件下菌絲密度大，菌絲體顏色整體呈濃白，氣生菌絲較多，且萌發(fā)時(shí)間最短。

2.3 “沐野1號(hào)”子實(shí)體物理指標(biāo)的測(cè)定

“沐野1號(hào)”菌蓋厚度與直徑、菌柄長(zhǎng)度與直徑等指標(biāo)見表4～表7。

表4 不同配方對(duì)子實(shí)體菌蓋厚度與直徑的影響Tab.4 The effect of different formula on the thickness of fruiting body

表5 不同配方對(duì)子實(shí)體菌柄直徑與長(zhǎng)度的影響Tab.5 Effects of different formula on the diameter of fruiting body stipe

表6 不同處理對(duì)單菇重的影響Tab.6 Effects of different treatments on the weight of single mushroom

表7 不同處理對(duì)雙孢蘑菇“沐野1號(hào)”前三潮菇及總產(chǎn)量影響Tab.7 Effects of different treatments on the first three tidal mushrooms and the total yield of Agaricus bisporus strain‘Muye No.1’

通過表4可以看出，配方D子實(shí)體菌蓋厚度較大，但與其他處理間差異不顯著。對(duì)照處理菌蓋直徑較大，與配方A、配方B和配方E間差異不顯著，與配方C、配方D相比差異顯著，但未達(dá)極顯著水平。

由表5可見，對(duì)照CK和配方D的菌柄直徑相等，均為2 cm；配方A、配方C和配方E的菌柄直徑也相等，均為1.87 cm；配方A、C、配方D、配方E與對(duì)照CK相比差異不顯著。配方B最小，為1.73 cm，且與對(duì)照CK的差異極顯著。菌柄長(zhǎng)度方面，配方D的菌柄最長(zhǎng)，為2.43 cm，處理B次之，為2.4 cm，再次是對(duì)照CK，為2.23 cm，且配方C與對(duì)照CK的差異顯著。A、E兩個(gè)配方菌柄最短，均為1.87 cm，與對(duì)照CK之間差異顯著。

由表6可見，D配方條件下，“沐野1號(hào)”單菇最重，為28.7 g，A配方條件下，單菇重最輕，為24.6 g，其余各配方居中。除配方A與對(duì)照CK的差異顯著外，其余配方與對(duì)照CK之間差異均不顯著。

由表7看出，各配方均采收三潮菇，第二潮時(shí)配方A的產(chǎn)量達(dá)最大值；對(duì)照CK和配方B、配方C、配方D的第一潮產(chǎn)量最高；配方E三潮菇產(chǎn)量均最低；同時(shí)對(duì)照CK和5個(gè)配方每潮菇出菇量差異均不顯著。由表7可見，配方D三潮總產(chǎn)量為17.76 kg·m-2，每潮菇產(chǎn)量均高于其他配方，比對(duì)照CK前三潮產(chǎn)量提高48%。同時(shí)可以看出配方D第一潮菇的產(chǎn)量（6.23 kg·m-2）超過了配方E（4.85 kg·m-2）的總產(chǎn)。說明玉米秸稈、玉米芯和牛糞混合的培養(yǎng)料，可使“沐野1號(hào)”產(chǎn)量顯著提高。

3 結(jié)論

3.1 不同培養(yǎng)料配方對(duì)“沐野1號(hào)”菌絲生長(zhǎng)的影響

食用菌的生長(zhǎng)周期分為營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)和生殖生長(zhǎng)，其中營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)積累的階段，主要表現(xiàn)形式為菌種萌發(fā)情況，菌絲生長(zhǎng)速度、生長(zhǎng)勢(shì)和生長(zhǎng)周期，以及菌種抗逆性和菌絲活力表現(xiàn)等[3-8]。營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)為下一階段即生殖生長(zhǎng)儲(chǔ)備和積累營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，當(dāng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)積累充足時(shí)，菌齡達(dá)到后進(jìn)入生殖生長(zhǎng)即出菇。只有在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)階段，為菌絲體提供充足的可分解營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，再給以適宜的溫濕度，在生理成熟后才能獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的雙孢蘑菇。

對(duì)不同配方的培養(yǎng)料而言，在以玉米芯、玉米秸稈和牛糞混合的培養(yǎng)料上，“沐野1號(hào)”菌絲吃料最快，30天就長(zhǎng)滿培養(yǎng)料，同時(shí)生長(zhǎng)勢(shì)較強(qiáng)；麥草雞糞配方吃料速度僅次于CK，但生長(zhǎng)勢(shì)最強(qiáng)。菌絲在玉米芯、玉米秸稈和牛糞混合的培養(yǎng)料上生長(zhǎng)最好，其他處理居中。說明“沐野1號(hào)”適合在適當(dāng)配比的玉米芯、玉米秸稈和牛糞培養(yǎng)料配方上生長(zhǎng)，但是菌絲在玉米秸稈和牛糞混合型的培養(yǎng)料上生長(zhǎng)效果不好。

3.2 不同培養(yǎng)料配方對(duì)“沐野1號(hào)”子實(shí)體生長(zhǎng)的影響

對(duì)雙孢蘑菇品質(zhì)的衡量主要依靠菇蓋直徑和厚度，菌柄的柄長(zhǎng)和柄粗，以及單菇鮮重和色澤等。菌蓋形態(tài)是雙孢蘑菇主要的商品性表現(xiàn)，在生產(chǎn)中優(yōu)質(zhì)雙孢蘑菇菌蓋應(yīng)呈球形或半球形，菌肉飽滿，傘厚且結(jié)實(shí)。鮮菇的單菇重及色澤是重要的質(zhì)量指標(biāo)，直接影響產(chǎn)量和商品性[9-10]。

本結(jié)果顯示，各培養(yǎng)料處理下其菌蓋直徑、菌蓋厚度、菌柄粗、單菇重處于中等水平，但菌柄長(zhǎng)度明顯高于普通白色雙孢蘑菇，同時(shí)，玉米芯和玉米秸稈混合培養(yǎng)料條件下，各測(cè)定指標(biāo)均最優(yōu)。

3.3 不同培養(yǎng)料配方對(duì)“沐野1號(hào)”產(chǎn)量的影響

雙孢蘑菇產(chǎn)量主要通過單位產(chǎn)量、生物轉(zhuǎn)化率和采收時(shí)間等來衡量。實(shí)際生產(chǎn)中，不同發(fā)酵方法，不同培養(yǎng)料配方以及不同品種之間產(chǎn)量差異較大。研究表明，雙孢蘑菇可以利用所有富含纖維素、木質(zhì)素的農(nóng)林廢棄物，在歐美國(guó)家，主要以麥秸和雞糞作為培養(yǎng)料，且利用二次隧道發(fā)酵技術(shù)居多。在亞洲地區(qū)，特別是中國(guó)北方地區(qū)，大部分采取玉米芯和牛糞作為發(fā)酵料，且多采取傳統(tǒng)二次發(fā)酵技術(shù)。多方面研究表明，利用有膨松效果的廢棄農(nóng)林下腳料可增加培養(yǎng)料的透氣性，對(duì)菌絲成長(zhǎng)有利，有增產(chǎn)效果[11-14]。

試驗(yàn)結(jié)果表明，通過合理配比玉米芯、玉米秸稈和牛糞混合培養(yǎng)料對(duì)雙孢蘑菇單產(chǎn)提高影響大，說明“沐野1號(hào)”對(duì)培養(yǎng)料要求條件低，菌種適用性廣。