姚 強(qiáng)，宮志遠(yuǎn)，黃春燕，韓建東，趙升遠(yuǎn)，張?jiān)鳎?瑾，謝紅艷，楊 鵬

（山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所，農(nóng)業(yè)部廢棄物基質(zhì)化利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250100）

真姬菇（Hypsizygus marmoreus） 屬擔(dān)子菌亞門（Basidiomycotina） 層菌綱 （Hymenomycetes） 傘菌目（Agaricales） 白蘑科（Tricholomataceae） 玉蕈屬（Hypsizygus）[1-3]。真姬菇口感獨(dú)特，擁有典型的蟹香味，食用味道鮮美，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富[4]，且具有多種保健功能[5-6]。倍受消費(fèi)者青睞。作為大宗消費(fèi)產(chǎn)品，真姬菇內(nèi)含多種蛋白質(zhì)、氨基酸和維生素[7]，具有防便秘、抗氧化、抗衰老、提高免疫力等效果[8-10]。且其貨架期較其他菇種長(zhǎng)、耐存儲(chǔ)，還具有高蛋白、低熱量、低脂肪的特點(diǎn)[11]。真姬菇市場(chǎng)化分類包括純白色和淺灰色兩種品系，其中，純白色品系又稱白色真姬菇、白色蟹味菇、白玉蕈、白玉菇、玉龍菇等[12-13]，淺灰色品系稱為蟹味菇、灰蟹菇、斑玉蕈、荷葉離褶傘等，是我國(guó)規(guī)?；⒐S化栽培程度較高的食用菌主栽品種之一，現(xiàn)國(guó)內(nèi)主要產(chǎn)地為上海、福建、山西、山東、河南、河北等地[14-15]。

山東地區(qū)依托區(qū)域資源稟賦，白玉菇生產(chǎn)規(guī)模大，工廠化程度高，但適宜區(qū)域工廠化栽培的白玉菇品種較少，且在實(shí)際栽培過(guò)程中存在生長(zhǎng)周期過(guò)長(zhǎng)、抗逆性差，抗雜菌能力弱，易受限于栽培產(chǎn)地和環(huán)境，從而提高了成本，對(duì)企業(yè)的生產(chǎn)效益有所影響[16-17]。本研究通過(guò)對(duì)13株市場(chǎng)主栽白玉菇品種進(jìn)行品種比較試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，旨在為山東地區(qū)白玉菇工廠化生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)菌種的篩選提供技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 供試菌種

參與試驗(yàn)所用白玉菇品種均從國(guó)內(nèi)公司、科研院所等渠道收集。菌種編號(hào)及來(lái)源如表1所示。

表1 白玉菇供試菌種編號(hào)及來(lái)源Tab.1 Number and source of white Hypsizygus marmoreus tested

1.2 供試培養(yǎng)基

母種培養(yǎng)基：普通市售PDA培養(yǎng)基。

液體菌種培養(yǎng)基：白砂糖0.3%、玉米粉0.3%，磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%，水1 L。

栽培培養(yǎng)基：玉米芯30%、棉籽殼20%、豆秸10%、麩皮16%、啤酒糟5%、米糠5%、甜菜渣10%、豆粕2%、貝殼粉2%。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 母種制備及活化

將保存菌株接入PDA平板培養(yǎng)基中進(jìn)行活化培養(yǎng)，25℃恒溫生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待菌絲滿管接入液體菌種培養(yǎng)基中。

1.3.2 液體菌種制備

按比例稱取原料，200 mL置于500 mL規(guī)格三角瓶中，121℃、101 kPa條件下高壓滅菌40 min，每個(gè)菌株各做3次重復(fù)，于22℃、190 r·min-1搖床培養(yǎng)8 d。觀察菌絲體形態(tài)大小及測(cè)定菌絲濕重、菌絲均一性、菌液pH等[18-19]。

1.3.3 栽培試驗(yàn)

將栽培培養(yǎng)基按比例配制好后裝瓶，中間打5孔，于121℃、0.13 MPa條件下滅菌4 h，出鍋將菌瓶移入預(yù)冷室，待培養(yǎng)料溫度降至室溫在環(huán)境下機(jī)械化接種，每瓶接種量為20 mL。接種后在培菌室里于溫度18℃、相對(duì)濕度70%條件下養(yǎng)菌，待菌絲長(zhǎng)滿瓶后繼續(xù)進(jìn)行菌絲后熟培養(yǎng)，共計(jì)85 d～90 d后進(jìn)行搔菌，并移入出菇房進(jìn)行出菇培養(yǎng)。

1.3.4 出菇階段培養(yǎng)及采收

前期將出菇房溫度調(diào)整至10℃進(jìn)行低溫刺激菇蕾形成，待菇柄長(zhǎng)至瓶口1 cm時(shí)，將出菇房室溫度調(diào)至15℃，每日補(bǔ)光，200 lx、強(qiáng)光光照3 h，菇房相對(duì)濕度保持90%～95%，適量通風(fēng)。等菇柄長(zhǎng)至6 cm～8 cm、菇蓋直徑長(zhǎng)至2 cm～4 cm且未開(kāi)傘時(shí)即可采收。觀察并記錄不同菌株菌絲生長(zhǎng)情況，接種后記錄第10天、第20天、第30天和第40天開(kāi)始連續(xù)3 d記錄的菌絲平均生長(zhǎng)速度值進(jìn)行計(jì)算，并記錄滿瓶時(shí)間、搔菌至原基形成時(shí)間、菌蓋分化時(shí)間等等，以便于計(jì)算不同品種的生長(zhǎng)周期[20]。

1.3.5 子實(shí)體農(nóng)藝性狀測(cè)定

試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)重復(fù)，觀察并記錄子實(shí)體菌蓋顏色、大小、厚度，菌柄長(zhǎng)度、直徑以及單株鮮重、生物學(xué)效率等[21]，進(jìn)行綜合分析。生物學(xué)效率（P，%） 公式為：

P=m1/m2×100

式中：m1表示平均單產(chǎn)（g）；m2表示培養(yǎng)料干重 （g）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同白玉菇品種培養(yǎng)菌絲生長(zhǎng)特性

白玉菇菌絲生長(zhǎng)特性情況見(jiàn)表2。

表2 白玉菇菌絲生長(zhǎng)特性Tab.2 Mycelium growth characteristics of white Hypsizygus marmoreus

由表2可以看出，不同品種間菌絲培養(yǎng)存在較大差異，其中H3、H4、H9、H12這四個(gè)菌種表現(xiàn)優(yōu)于其他菌種，其中H3菌絲日均生長(zhǎng)速度為6.12 mm·d-1，菌絲生長(zhǎng)快，菌絲密集且粗壯，液體培養(yǎng)形態(tài)表現(xiàn)為菌球大小均勻，菌液澄清，菌絲體濕重為19.56 g·mL-1，菌絲長(zhǎng)勢(shì)優(yōu)于其他菌種。H4、H9、H12次之，菌絲生長(zhǎng)速度分別為5.91 mm·d-1、6.05 mm·d-1、5.96 mm·d-1，菌絲生長(zhǎng)較快，菌絲較為粗壯，長(zhǎng)勢(shì)良好，菌絲濕重分別為17.21 g·100-1mL-1、19.11 g·100-1mL-1、18.87 g·100-1mL-1。H10 和 H11 兩個(gè)菌種表現(xiàn)最劣勢(shì)，菌絲生長(zhǎng)緩慢，稀疏且長(zhǎng)勢(shì)一般，菌絲生長(zhǎng)速度分別為5.13 mm·d-1、4.97 mm·d-1，菌絲球大小不均勻，菌液較澄清，其中H10菌球呈碎片化，H11菌球表面光滑。試驗(yàn)可以看出，H3、H9菌種穩(wěn)定性較好，H10和H11兩個(gè)菌種菌絲具有易老化的特點(diǎn)，不利于傳代培養(yǎng)。

2.2 不同品種的白玉菇菌絲培養(yǎng)特點(diǎn)

白玉菇菌絲生長(zhǎng)速度統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表3。

表3 白玉菇菌絲生長(zhǎng)速度Tab.3 Growth rate of mycelium of white Hypsizygus marmoreus

各白玉菇品種栽培瓶菌絲長(zhǎng)勢(shì)表現(xiàn)略有差異。由表3可知，H3、H9、H12菌絲體呈白色，菌瓶?jī)?nèi)無(wú)黃斑出現(xiàn)，吃料及菌絲爬壁效果良好，生產(chǎn)周期較其他品種縮短5 d～7 d，性狀表現(xiàn)俱佳，可進(jìn)一步優(yōu)化，作為長(zhǎng)期的生產(chǎn)菌種備選。H4、H8、H13三個(gè)品種表現(xiàn)相對(duì)較好，生產(chǎn)周期較其余品種縮短3 d～5 d。除此之外，其余菌種多數(shù)菌瓶出現(xiàn)黃斑，且吃料速度中等或較慢，其中H10品種表現(xiàn)較差，生產(chǎn)周期最長(zhǎng)為124 d，菌瓶?jī)?nèi)部出現(xiàn)少量黃斑，且吃料爬壁速度緩慢，菌種表現(xiàn)不穩(wěn)定，不宜長(zhǎng)期作為生產(chǎn)菌種。

2.3 不同白玉菇品種農(nóng)藝性狀特點(diǎn)

白玉菇農(nóng)藝性狀特點(diǎn)情況見(jiàn)表4。

表4 白玉菇農(nóng)藝性狀特點(diǎn)Tab.4 Agronomic characteristics of white Hypsizygus marmoreus

由表4可知，通過(guò)測(cè)定白玉菇子實(shí)體的菌柄長(zhǎng)度、直徑、菌蓋厚度等指標(biāo)分析可得，各品種子實(shí)體外觀性狀差異不大，其中菌株H9的平均單產(chǎn)量及生物學(xué)效率最高，分別為324.3 g/瓶、92.77%。H3、H1平均單產(chǎn)量分別為304.7 g/瓶，生物學(xué)效率分別為87.1%、86.7%。其余品種生物學(xué)效率均在75%～85%，差異表現(xiàn)不明顯，H10品種單產(chǎn)量最低，僅262.5 g/瓶，生物學(xué)轉(zhuǎn)化效率不高，疑似有退化表現(xiàn)，具體還需進(jìn)一步試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)證明。

2.4 不同白玉菇品種的商品性狀

白玉菇商品性狀統(tǒng)計(jì)情況見(jiàn)表5。

表5 白玉菇商品性狀Tab.5 Commercial properties of white Hypsizygus marmoreus

不同品種白玉菇商品性狀有所差異。由表5可知，H3、H9、H12品種商品性狀表現(xiàn)優(yōu)異，采收期不易開(kāi)傘、菇型好、生長(zhǎng)整齊、菌叢濃密、易采收，遺傳性狀穩(wěn)定，可作為工廠化生產(chǎn)主栽品種。此外，H13、H4品種表現(xiàn)較好，采收期不易開(kāi)傘，菌柄脆嫩，子實(shí)體生長(zhǎng)整齊，菌叢較濃密，可作為生產(chǎn)備用菌種和進(jìn)一步篩選優(yōu)化試驗(yàn)品種。H5、H10、H11品種采收期均有少量開(kāi)傘、菇型稍有不齊、菌叢較稀疏、長(zhǎng)勢(shì)不佳，遺傳性狀相對(duì)不穩(wěn)定。疑似保藏時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或管理不當(dāng)?shù)仍驅(qū)е戮N退化問(wèn)題，還需進(jìn)一步驗(yàn)證，作為試驗(yàn)預(yù)備菌種。

3 討論與結(jié)論

白玉菇作為我國(guó)可以工廠化生產(chǎn)的食藥兼用珍稀食用菌品種之一，對(duì)其不同地區(qū)的品種進(jìn)行對(duì)比篩選試驗(yàn)具有重要意義。研究表明，H3、H9、H12三個(gè)菌株可作為山東區(qū)域食用菌栽培的主要品種，適宜山東區(qū)域工廠化生產(chǎn)，且遺傳性狀相對(duì)穩(wěn)定，商品性狀表現(xiàn)優(yōu)異，較其他品種可縮短生產(chǎn)周期3 d～7 d，可極大的提高企業(yè)的生產(chǎn)效率和產(chǎn)品競(jìng)爭(zhēng)力，其中H9產(chǎn)量最高，平均單產(chǎn)為324.3 g/瓶，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率為92.7%。在下一步的試驗(yàn)中對(duì)品種的生理生化等數(shù)據(jù)進(jìn)行測(cè)定，以期完善區(qū)域白玉菇工廠化生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范。目前我國(guó)對(duì)白玉菇的研究還處于前期階段，隨著不斷深入的研究和挖掘，會(huì)使白玉菇展現(xiàn)更多的食用、藥用等價(jià)值，更好的促進(jìn)食用菌產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。