雷 秦 王 娟 許世娟

淋巴瘤可以分為霍奇金淋巴瘤與非霍奇金淋巴瘤，在非霍奇金淋巴瘤中，70%左右為B細胞淋巴瘤，其中進展相對緩慢、惡性度相對較低的惰性淋巴瘤(indolent lymphoma)和進展相對較快、惡性度相對較高的侵襲性淋巴瘤(aggressive lymphoma)[1-2]。惰性B淋巴瘤患者的臨床主要特征為病情反復，腫瘤生長較緩慢，多數(shù)患者在就診時處于晚期，常累及外周血和骨髓[3-4]，治療上多采用化療，但是很多患者仍無法根治[5]。影響惰性B淋巴瘤患者預后的因素有很多，淋巴瘤國際預后指數(shù)(follicular lymphoma international prognostic index，F(xiàn)LIPI)能夠在一定程度上判斷患者的預后，但是多為主觀性，且臨床上不能僅僅依靠單一的指數(shù)進行判斷[6-7]。已有研究顯示惰性B淋巴瘤的發(fā)生與發(fā)展涉及到細胞增殖、分化、凋亡、信號轉導和癌基因表達的蛋白、抑癌基因突變等[8-9]。本研究采用回顧性研究方法，探討了惰性B淋巴瘤臨床特征及預后的影響因子，為惰性淋巴瘤臨床治療選擇提供依據(jù)。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2015年8月到2018年2月選擇在我院接受化療的71例惰性B淋巴瘤患者作為惰性組，同期選擇彌漫性大B細胞淋巴瘤45例作為侵襲組，納入標準：全部患者均有病理組織石蠟標本；所有患者均經(jīng)病理細胞形態(tài)學和免疫組化確診，都符合WHO關于B淋巴瘤的分類標準；所有患者接受4個療程的氟達拉濱為基礎的聯(lián)合化療方案與CHOP樣方案；患者依從性好，都接受規(guī)范化治療；臨床病歷資料完整；醫(yī)院倫理委員會批準了此次研究。排除標準：臨床資料缺乏；存在精神病、心腦血管疾病、呼吸系統(tǒng)疾病等；妊娠與哺乳期婦女。

1.2 IL-6與IL-10表達檢測

取所有患者的病理組織石蠟標本，制成4 μm厚的組織切片，保存?zhèn)溆?。將石蠟分別依次放入裝有不同濃度二甲苯的瓶子中0.25 h以除去組織中的石蠟。然后進行酒精梯度洗脫，隨后將切片放入煮沸的檸檬酸緩沖液持續(xù)20 min。使用3%過氧化氫溶液對切片進行孵育，在濕盒封閉15 min。在組織中央滴加恰當?shù)囊豢?抗IL-6抗體與抗IL-10抗體)，4 ℃冰箱過夜。隨后滴加二抗生物素化山羊抗兔IgG，室溫放置30 min，滴加DAB顯色劑，鏡下觀察，蘇木精重新染色，蒸餾水沖洗，梯度脫水與透明，鏡下觀察染色的結果。判斷標準：IL-6與IL-10陽性的判定標準為細胞質(zhì)和/細胞膜上出現(xiàn)棕黃色的顆粒。根據(jù)腫瘤細胞中陽性細胞占總細胞數(shù)的百分比：4分：≥76%；3分：51%～75%；2分：26%～50%；1分：11%～25%；0分：≤10%。陽性細胞的著色強度：3分為棕褐色；2分為棕黃色；1分為淺棕黃色；0分為黃色或淡黃色。將兩者積分相乘，≥5分表示為陽性。

1.3 調(diào)查資料

調(diào)查所有患者的性別、年齡、臨床分期、體能狀態(tài)、結外受累、骨髓侵犯、FLIPI分級等。在化療后按照WHO實體瘤療效評價標準，分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、病情穩(wěn)定(SD)、病情進展(PD)等4個級別，(完全緩解+部分緩解)/組內(nèi)例數(shù)×100.0%=總有效率。

1.4 統(tǒng)計方法

選擇SPSS 23.00軟件對計量數(shù)據(jù)與計數(shù)數(shù)據(jù)進行分析，計量資料以均值±標準差表示，對比采用t檢驗，計數(shù)數(shù)據(jù)以百分比、率表示，對比采用卡方分析，采用單因素分析變量分析和Logistic回歸進行二分類變量的多因素分析，檢驗水準為α=0.05，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 一般資料對比

2組的性別、臨床分期、體能狀態(tài)、FLIPI分級等差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，2組的結外受累、骨髓侵犯、年齡等差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組一般資料對比

2.2 IL-6與IL-10陽性率對比

惰性組的IL-6與IL-10陽性表達率顯著低于侵襲組(P<0.05)。見表2。

表2 2組IL-6與IL-10陽性表達情況對比(例,%)

2.3 惰性組預后情況

在惰性組71例患者中，化療后完全緩解54例，部分緩解8例，病情穩(wěn)定5例，病情進展4例，總有效率為87.3%。

2.4 惰性組預后影響因素分析

在惰性組71例患者中，以化療總有效率作為因變量，以結外受累、骨髓侵犯、年齡、IL-6與IL-10陽性率作為自變量，二元Logistic回歸顯示結外受累、骨髓侵犯、IL-6與IL-10陽性率均為影響預后的危險因素(P<0.05)。見表3。

表3 影響惰性B淋巴瘤患者預后的危險因素(n=71)

3 討論

惰性B淋巴瘤是一類臨床進展相對緩慢、惡性程度較低的一種非霍奇金淋巴瘤，占非霍奇金淋巴瘤的1/4以上[10]?，F(xiàn)代研究表明惰性B淋巴瘤的可能誘因包括DNA修復機制異常、病毒和細菌的感染、免疫缺陷所致的凋亡等[11]。本研究顯示2組的性別、臨床分期、體能狀態(tài)、FLIPI分級等對比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，2組的結外受累、骨髓侵犯、年齡等對比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。表明相對于侵襲性非霍奇金淋巴瘤，惰性B淋巴瘤患者年齡較大，少伴隨有結外受累、骨髓侵犯，但是在常規(guī)疾病危重程度分級上與侵襲性非霍奇金淋巴瘤無顯著差異。

淋巴瘤組織包括腫瘤細胞與間質(zhì)細胞，間質(zhì)細胞能夠抑制腫瘤的擴散，也能夠提供腫瘤生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，從而在腫瘤的生長、轉移與擴散中發(fā)揮重要作用[12-13]，特別是浸潤的單核細胞衍生化細胞在T細胞淋巴瘤、T細胞淋巴增殖性疾病等相關疾病中均能夠表達，巨噬細胞中可見IL-6與IL-10有較強的表達，可能參與促進淋巴瘤細胞的生長[14]。IL-6是一種多效免疫調(diào)節(jié)細胞因子，在機體內(nèi)可參與促進造血細胞的生成、免疫調(diào)節(jié)、腫瘤生成、炎癥反應等。IL-6也是一種多效免疫調(diào)節(jié)細胞因子，能夠抑制巨噬細胞依賴的T淋巴細胞的增殖與分化[15]。在非霍奇金淋巴瘤患者中，患者血清IL-6的水平顯著性升高，并且與患者預后較差有顯著相關性[16]。本研究顯示惰性組的IL-6與IL-10陽性顯著低于侵襲組(P<0.05)，該實驗結果與相關研究結果相一致[17]，說明IL-6與IL-10可通過其腫瘤免疫的作用保護腫瘤細胞，促進腫瘤細胞的生長，為腫瘤細胞的生長提供良好的環(huán)境。當前也有研究顯示IL-6與IL-10不僅在淋巴瘤細胞與組織中表達，在淋巴瘤組織中浸潤的巨噬細胞與血管內(nèi)皮細胞中也有較強的表達，惡性程度相對較高、腫瘤進展速度相對較快的侵襲性淋巴瘤組患者血清IL-6與IL-10水平顯著高于惰性淋巴瘤組[18]。

惰性B淋巴瘤尚無有效的標準治療方案，治療方法包括單純手術、化療、放療、手術加化療或放療、化療加放療等[19]。不過惰性B淋巴瘤基本失去了手術治療機會，CHOP方案曾經(jīng)被認為是惰性B淋巴瘤患者的標準一線方案[20]。近年來，氟達拉濱以其所獲得的高緩解率已被廣泛應用于惰性B淋巴瘤的治療，也取得了比較好的效果[21]。本研究顯示在惰性組71例患者中，化療后完全緩解54例，部分緩解8例，病情穩(wěn)定5例，病情進展4例，總有效率為87.3%；二元Logistic回歸顯示結外受累、骨髓侵犯、IL-6與IL-10陽性率均為影響預后的危險因素(P<0.05)。從機制上分析，IL-6與IL-10能夠通過受體系統(tǒng)發(fā)揮多種生物學功能，兩者的過度表達存在一種負反饋調(diào)節(jié)，可能是引起患者諸多并發(fā)癥狀的主要原因[22]。有研究顯示在侵襲性淋巴瘤組患者中，血漿IL-6與IL-10水平還與骨髓浸潤顯著相關，并且IL-10作為危險因素之一，與療效不佳也具有較強的關聯(lián)度，另外若非霍奇金淋巴瘤患者IL-6水平較高，則其存活率就較低[23-24]。上述結果也可為淋巴瘤的治療提供新思路，即通過IL-6與IL-10來阻斷其體內(nèi)作用通路，達到治療惰性B淋巴瘤的目的。本研究也有一定的不足，惰性B淋巴瘤的臨床特征比較多，影響預后的因素也比較多，本研究樣本數(shù)量較少，為此可能存在研究偏倚性，將在后續(xù)研究中深入分析。

總之，惰性B淋巴瘤患者年齡較大，少伴隨有結外受累、骨髓侵犯，IL-6與IL-10表達量比較低，結外受累、骨髓侵犯、IL-6與IL-10陽性率均為影響預后的危險因素。