劉少平 余 卉

原發(fā)性肝癌為我國常見惡性腫瘤之一，以肝區(qū)疼痛、消化道及全身癥狀、肝大為主要癥狀，具有惡性程度高、預后差、病情進展快等特點，因此盡早診治是改善患者生存質(zhì)量的關(guān)鍵[1]。目前甲胎蛋白是臨床上診治原發(fā)性肝癌的最常用腫瘤標志物，但其假陰性及假陽性結(jié)果較高，診斷及篩查價值并不高。近年來的研究表明[2]，單胺氧化酶(MAO)的活力改變和肝細胞受損后再生與原發(fā)性肝癌細胞增殖浸潤有關(guān)。5′-核苷酸酶(5′-NT)為最新發(fā)現(xiàn)的肝癌標志物，可作用于多種核苷酸，其濃度增加主要見于肝膽系統(tǒng)疾病[3]。γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶(GGT)主要存在于肝細胞膜及微粒體上，參與谷胱甘肽的代謝，已有研究報道[4]，GGT對肝癌有一定預測價值。但目前臨床上缺乏以上指標聯(lián)合檢測的報道，本研究旨在分析血清MAO、5-NT、GGT檢測在診斷原發(fā)性肝癌中的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇天門市第一人民醫(yī)院2015年2月至2018年6月收治的43例原發(fā)性肝癌患者，入選標準[5]：均根據(jù)臨床病史、癥狀、實驗室指標及影像學檢查確診為原發(fā)性肝癌；心、腦、腎等臟器嚴重不全。排除標準：妊娠或者哺乳階段；活動性肝病、轉(zhuǎn)移性肝癌；嚴重創(chuàng)傷。43例原發(fā)性肝癌患者中男性24例，女性19例；年齡29～71歲，平均(55.49±8.17)歲。同期選擇我院收治的52例良性肝病患者，包括肝硬化患者20例、慢性乙型肝炎患者18例、病毒性肝炎患者14例；男性30例，女性22例；年齡26～74歲，平均(57.01±6.42)歲。并選擇本院健康體檢者35例作為健康對照組，男性20例，女性15例；年齡25～73歲，平均(56.38±8.59)。3組年齡、性別等資料比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。

1.2 方法

采集所有受試者空腹外周靜脈血，用血液分離機按3 000 r/min分離15 min，將上清液保存在-20 ℃低溫箱中待檢。采用貝克曼AU5821生化分析儀檢測血清MAO、5′-HT、GGT水平，MAO試劑盒來自浙江伊利康生物技術(shù)有限公司，5'-HT試劑盒來自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，GGT試劑盒來自北京利德曼生化股份有限公司。

1.3 統(tǒng)計學分析

2 結(jié)果

2.1 各組血清MAO、5′-HT、GGT水平比較

原發(fā)性肝癌組血清MAO、5′-HT、GGT水平高于良性肝病組，良性肝病組血清MAO、5′-HT及GGT水平高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 各組血清MAO、5′-HT、GGT水平比較

2.2 血清MAO、5′-NT、GGT單獨和聯(lián)合檢測原發(fā)性肝癌的ROC曲線

血清MAO曲線下面積為0.718(95%CI為0.613～0.822，P<0.001)，敏感度和特異度分別為0.571和0.418；5′-NT曲線下面積為 0.717(95%CI為0.616～0.819，P<0.001)，敏感度和特異度分別為0.558和0.476；GGT曲線下面積為0.714(95%CI為0.611～0.818，P<0.001)，敏感度和特異度分別為0.738和0.334；聯(lián)合檢測曲線下面積為0.884(95%CI為0.817～0.952，P<0.001)，敏感度和特異度分別為0.401和0.881，見表2及圖1。

表2 血清MAO、5′-NT、GGT單獨和聯(lián)合檢測原發(fā)性肝癌的ROC曲線

3 討論

原發(fā)性肝癌的發(fā)病率及病死率較高，其發(fā)病隱匿，容易通過淋巴、血液系統(tǒng)轉(zhuǎn)移，是嚴重威脅機體健康的惡性腫瘤之一。目前臨床對惡性腫瘤篩查的重視程度不高，患者就診時多為中晚期，已錯過最佳診療時機。因此非介入性、重復性高、操作簡便的檢查方法備受臨床關(guān)注。近年來有研究發(fā)現(xiàn)[6]，多種血液標志物對惡性腫瘤的診斷有良好的預測價值。

MAO是作用于不同單胺類化合物的水溶性酶，廣泛分布于肝腎等器官細胞線粒體、結(jié)締組織內(nèi)，能夠參與膠原成熟最后階段的架橋形成。纖維形成后MAO脫離，增加血清中MAO濃度，肝病患者因肝內(nèi)慢性炎癥性刺激導致纖維結(jié)締組織增生，導致肝臟纖維化[7]。原發(fā)性肝癌發(fā)生后可慢性損傷肝細胞，促進線粒體破壞，導致MAO釋放入血，明顯增加MAO活性[8]。本研究結(jié)果顯示，原發(fā)性肝癌患者血清MAO水平顯著高于良性肝病組，說明血清MAO水平可能是原發(fā)性肝癌病情進展的有效監(jiān)測指標，對原發(fā)性肝癌的篩查及良性肝臟疾病的診斷有重要價值。ROC曲線描述了診斷試驗區(qū)分患者及非患者的能力，不受到發(fā)病率的影響，綜合了特異度及敏感度指標，并考慮了所有可能的診斷界值影響，更能全面評估診斷試驗準確性[9]。進一步ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，MAO曲線下面積高于0.5，證實血清MAO水平對原發(fā)性肝癌的診斷有一定意義。

圖1 血清MAO、5-NT、GGT聯(lián)合診斷原發(fā)性肝癌的ROC曲線

5′-NT作為一種糖蛋白，在機體運動、纖維蛋白合成、細胞生長發(fā)育及內(nèi)皮屏障功能等方面有重要作用，因此其和多種疾病發(fā)生發(fā)展有良好關(guān)系[10]。5′-NT在機體主要分布于肝臟膽小管及竇狀隙膜內(nèi)，肝內(nèi)外梗阻或者肝細胞受損時可釋放入血，血清中5′-NT濃度改變較少受到肝外疾病影響，釋放的5′-NT只有在膽汁酸作用下可進入血液，因此5′-NT在肝膽疾病診斷中有重要作用[11]。肝癌患者肝臟損傷明顯，肝細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)顯著破壞，線粒體出現(xiàn)退行性改變甚至消失，導致肝細胞損傷，明顯增加血清中5′-NT濃度[12]。既往研究發(fā)現(xiàn)[13]，定期檢測肝癌患者血清5′-NT濃度改變，有利于病情進展、療效及預后轉(zhuǎn)歸的觀察。本研究發(fā)現(xiàn)，血清5′-NT在良性肝病及原發(fā)性肝癌組中均上升，尤以原發(fā)性肝癌組上升最為明顯，血清5′-NT的ROC曲線下面積為0.717，說明其對原發(fā)性肝癌診斷的準確度較高，可能是其診斷的靈敏指標。

GGT為微粒體酶，在肝臟、腎臟及胰腺中含量豐富，正常狀態(tài)下，血清中GGT多來自于肝臟，肝內(nèi)GGT主要分布于肝內(nèi)膽管上皮及肝細胞漿內(nèi)，是生成半胱氨酰甘氨酸及γ-谷氨酰殘余物。肝臟發(fā)生炎癥肝內(nèi)合成亢進或者膽汁排除受阻時其濃度增加，此濃度上升能夠提示發(fā)生以膽汁淤積為主的病變。有研究發(fā)現(xiàn)[14]，血清中GGT不僅來源于損傷肝細胞所釋放酶，還可能是膽汁酸作用于細胞膜，導致GGT在細胞表層釋放并進入循環(huán)，推測GGT在腫瘤形成中的作用可能受到細胞應答中氧化應激途徑調(diào)節(jié)。癌變肝組織中，GGT重新大量表達，出現(xiàn)胎肝特點，在外周血中出現(xiàn)特異性同工酶帶，癌組織自身或周圍炎癥刺激作用，增加肝細胞膜通透性，引起肝癌患者血清GGT大幅增加，但其在癌變過程中的異常表達機制仍有待進一步研究[15]。相關(guān)研究報道[16]，肝臟癌變組織中，GGT催化的谷胱甘代謝可能有待氧化損傷，從而參與癌變組織的惡性轉(zhuǎn)化。本研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性肝癌組、良性肝病組血清GGT濃度均有程度不一的增加，但原發(fā)性肝癌組濃度相對較高，說明血清GGT濃度能較好反映肝臟病情進展及肝臟損傷程度。但GGT測定結(jié)果容易和其他肝膽疾病重疊，加上GGT在機體分布廣泛，多種酶誘導劑可誘導其合成，因此單獨檢測GGT對原發(fā)性肝癌的診斷價值有待提高。臨床診斷指標需滿足高特異度及敏感度的條件，但臨床實踐中大部分非創(chuàng)傷性診斷試驗的完善度不高，特異度及敏感度較低，需聯(lián)合多個指標聯(lián)合診斷。多個指標聯(lián)合診斷可明顯提高疾病的診斷準確率，本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清MAO、5′-NT及GGT聯(lián)合診斷的曲線下面積明顯高于單個指標。

綜上所述，血清MAO、5′-NT及GGT是反映肝功能損傷程度的敏感指標，聯(lián)合檢測可為原發(fā)性肝癌的診斷提高可靠依據(jù)。但本研究存在樣本量有限、觀察指標不夠全面等不足，因此本研究結(jié)果有待更多大規(guī)模、大樣本的長期研究進一步證實。