程小飛 蔣國民 向 勁 宋 銳 李紹明 伍遠(yuǎn)安 * 劉 麗* 王志明

(1. 湖南省水產(chǎn)科學(xué)研究所, 長沙 410153; 2. 水產(chǎn)高效健康生產(chǎn)湖南省協(xié)同創(chuàng)新中心, 常德 415000;3. 長沙市水生動物防疫檢疫站, 長沙 410153)

非傳染性病死畜禽是畜禽養(yǎng)殖及其加工過程中不可避免的“副產(chǎn)物”, 既是農(nóng)業(yè)廢棄物, 又是生物資源, 用則利, 棄則害[1]。非傳染性病死動物無害化處理后的資源利用是當(dāng)今社會各界關(guān)注的熱點,其對于保障食品安全和生態(tài)環(huán)境安全, 促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展具有重要意義?；品ㄊ遣∷绖游餆o害化處理的主要方式之一, 是指將病死動物進(jìn)行破碎預(yù)處理后, 再于高溫高壓條件下進(jìn)行滅菌及相關(guān)處理的一種無害化處理方式[2]。無害化處理產(chǎn)品肉骨粉(Meat and bone meal, MBM), 主要營養(yǎng)成分有蛋白質(zhì)、脂肪、礦物質(zhì)以及各種維生素等, 其中粗蛋白含量一般為50%—60%, 且氨基酸組分比較平衡,脂肪含量為8%—12%[3]。楊慧杰等[4]研究表明, 病死豬經(jīng)過無害化生物降解以后所制得的肉骨粉, 營養(yǎng)價值和飼用價值高, 基本符合國家規(guī)定的飼料用肉骨粉標(biāo)準(zhǔn)。非傳染性病死豬無公害化處理產(chǎn)品(豬肉骨粉)作為動物蛋白原料替代水產(chǎn)飼料中的魚粉, 一方面可以降低病死動物尸體隨意丟棄對環(huán)境的污染, 達(dá)到保護(hù)生態(tài)環(huán)境的目的; 另一方面可以實現(xiàn)生物資源再利用, 解決蛋白質(zhì)飼料原料緊缺問題, 降低養(yǎng)殖成本。

芙蓉鯉鯽(Furong crucian carp)是湖南省水產(chǎn)科學(xué)研究所以散鱗鏡鯉(Cyprinus carpio)為母本, 興國紅鯉(Cyprinus carpiovarsingguoensis)為父本雜交獲得雜交子代芙蓉鯉(Cyprinus capioFurong), 再以芙蓉鯉為母本, 紅鯽(Carassius auratusred var.)為父本進(jìn)行雜交培育而成, 屬于國家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部水產(chǎn)新品種(GS-02-001-2009)[5]。芙蓉鯉鯽體色偏黃, 鱗片緊密且具有生長快、肉質(zhì)好、性腺敗育以及抗性強等優(yōu)點, 深受廣大養(yǎng)殖戶的喜愛。目前對芙蓉鯉鯽的研究主要集中在遺傳育種[6—8]及營養(yǎng)需求[9—12]等方面, 但關(guān)于魚粉替代在芙蓉鯉鯽上的研究尚未見報道。

本實驗研究了以非傳染性病死豬無害化處理產(chǎn)品豬肉骨粉為蛋白源, 替代芙蓉鯉鯽飼料中50%和100%魚粉蛋白, 通過測定芙蓉鯉鯽的生長性能、營養(yǎng)成分、血液生理生化指標(biāo)及質(zhì)構(gòu)特性, 綜合評價豬肉骨粉在芙蓉鯉鯽飼料中的應(yīng)用效果, 以期為非傳染性病死動物無公害化處理產(chǎn)品(豬肉骨粉)在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 實驗飼料

本實驗所用無害化處理產(chǎn)品豬肉骨粉(粗蛋白質(zhì)66.65%、粗脂肪13.34%)由湖南盛祥生態(tài)環(huán)?？萍加邢薰咎峁? 魚粉(粗蛋白66.67%、粗脂肪8.22%)及其他飼料原料均購于湖南大北農(nóng)農(nóng)業(yè)科技有限公司。實驗設(shè)計了3組等氮(38%)等脂(6.5%)的飼料, 以魚粉組(FM)飼料作為對照組, 分別以肉骨粉蛋白替代魚粉蛋白的50% (T1)和100% (T2), 共3個處理, 每個處理3平行。所有原料粉碎過60目篩,用小型攪拌機(jī)攪拌充分混勻, 經(jīng)飼料機(jī)(環(huán)模顆粒機(jī)SZLH200, 江蘇正昌集團(tuán)有限公司)制成1.5 mm粒徑的顆粒飼料, 風(fēng)干后于-20℃冰柜密封儲存。實驗飼料配方和基本生化組成見表1, 實驗飼料氨基酸組成見表2。

表1 實驗飼料配方及化學(xué)成分(%干物質(zhì))Tab. 1 Formulation and chemical composition of the experimental diets (% dry matter)

1.2 實驗魚及飼養(yǎng)管理

本實驗于湖南省水產(chǎn)科學(xué)研究所孵化棚內(nèi)的水泥池養(yǎng)殖系統(tǒng)開展, 水泥池 (長2.8 m×寬1.6 m×深1.0 m), 實驗期間水泥池全天24h進(jìn)行不間斷鼓風(fēng)機(jī)增氧, 且保持微流水。實驗芙蓉鯉鯽由湖南魚緣生物科技有限公司提供的當(dāng)年苗種。實驗開始前1d, 實驗魚饑餓24h, 選取初始規(guī)格均勻、體格健壯的芙蓉鯉鯽270尾[初重： (17.47±2.56) g], 隨機(jī)分配至9個相同規(guī)格水泥養(yǎng)殖池, 每實驗組3個重復(fù), 每個重復(fù)30尾。實驗期間按體重的3.0%—7.0%投喂飼料, 日投喂4次(8：00、11：00、15：00和17：30), 生長實驗共持續(xù)56d。實驗期間水溫為25.0—33.0℃,溶解氧為5.30—5.80 mg/L, pH為7.00—7.64, 氨氮為0.10—0.20 mg/L, 亞硝酸鹽0.03—0.05 mg/L, 硫化物0.03—0.04 mg/L。

1.3 樣品采集與檢測

實驗魚采樣前饑餓24h, 每尾魚測體長和體重;每池隨機(jī)取10尾魚用MS-222麻醉后, 尾靜脈取血,分別放進(jìn)0.5 mL的噴涂有EDTA K2抗凝劑的離心管(制備全血)和1.5 mL的非抗凝離心管。非抗凝血液樣品4℃冰箱過夜后, 3000 r/min, 離心10min制備血清; 每池隨機(jī)取10尾魚解剖, 測量腸長, 稱空殼重、肝胰臟重、脾重及腸重, 取肝胰臟組織和腸組織迅速置液氮中保存, 隨后轉(zhuǎn)至-80℃冰箱保存待用。其他實驗魚留作全魚樣品, 經(jīng)液氮速凍后于-20℃保存待用。

表2 實驗飼料氨基酸組成(%干物質(zhì))Tab. 2 Amino acid profile of the experimental diets (% dry matter)

采用以下公式計算生長性能和生物學(xué)性狀：

成活率(Survival ratio,SR, %)=終末魚數(shù)/ 初始魚數(shù)×100%;

攝食率(Feeding rates,FR, %BW/d)=飼料攝入干物質(zhì)/ [投喂天數(shù)×(初始體重+終末體重)/ 2];

增重率(Weight gaining rate,WGR, %)=(終末體重-初始體重)/初始體重×100%;

特定生長率(Specific growth rate,SGR, %/d)=[(ln終末體重-ln初始體重)/飼養(yǎng)天數(shù)]×100%;

絕對增長率(Absolute growth rate,AGR, g/d)=(終末體重-初始體重)/飼養(yǎng)天數(shù);

飼料系數(shù)(Feed conversion ratio,FCR)=投飼總量/(終末體重－初始體重);

肥滿度(Condition factor,CF, g/cm3)=(體重/體長3)×100%;

肝胰臟指數(shù)(Hepatosomatic index,HSI, %)=肝胰臟重/體重×100%;

內(nèi)臟指數(shù)(Viscerosomatic index,VSI, %)=內(nèi)臟重/體重×100%;

脂指數(shù)(Lipid index, %)=腸系膜脂肪重/體重×100%;

腸指數(shù)(Intestine index, %)=腸重/體重×100%;

脾臟指數(shù)(Spleen index, %)=脾臟重/體重×100%。

1.4 樣品分析

取樣及對樣品的處理： 取芙蓉鯉鯽背部兩側(cè)肌肉, 用組織搗碎機(jī)粉碎以做體成分分析。

營養(yǎng)成分測定： 實驗飼料與背肌營養(yǎng)組成均參照AOAC(2003)標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行測定, 干物質(zhì)測定采用恒溫干燥法(105℃); 蛋白質(zhì)測定采用凱氏定氮法測定; 脂肪測定采用索氏抽提法測定; 灰分測定采用馬福爐灼燒法(550℃); 氨基酸測定采用酸水解法, 取樣品0.5 g, 用6 mol/L的鹽酸于110℃下水解22h過濾定容至50 mL, 取0.5 mL真空干燥制作成樣品, 使用德國Sykam公司S-433D型氨基酸分析儀測定樣品氨基酸組成及比例。

血液生理生化指標(biāo)測定： 丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(Alanine amino transtcrase, ALT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(Aspartic amino transtcrase, AST)、甘油三酯(Triglyceride, TG)、膽固醇(Cholesterol, CHOL)、高密度脂蛋白(High-density lipoprotein cholesterol, HDL-c)、低密度脂蛋白(Low-density lipoprotein cholesterol, LDL-c)、總蛋白(Total protein, TP)、白蛋白(Albumin, ALB)、球蛋白(Globulin, GLO)、白蛋白/球蛋白(Albumin/Globulin, A/G)、血糖(Glucose,GLU), 采用美國貝克曼庫爾特AU5800全自動生化分析儀進(jìn)行測定, 其中ALT和AST檢測使用上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司試劑盒, HDL-c和LDL-c檢測使用浙江伊利康生物技術(shù)有限公司試劑盒,CHOL、TG和GLU檢測使用上?？迫A生物工程股份有限公司試劑盒, TP、ALB和GLO檢測使用是中生北控生物科技股份有限公司試劑盒。

血液生理指標(biāo)： 白細(xì)胞 (White blood cell, WBC)、紅細(xì)胞(Red blood cell, RBC)、血紅蛋白(Hemoglobin, HGB)、紅細(xì)胞比容(Hematocrit, HCT)、紅細(xì)胞平均體積(Mean corpuscular volume, MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量(Mean corpuscular hemoglobin, MCH)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(Mean corpuscular hemoglobin concentration, MCHC)、血小板數(shù)(Platelet, PLT)、紅細(xì)胞分布寬度(Red cell volume distribution width, RDW-CV)、血小板分布寬度(Platelet distribution width, PDW)、平均血小板體積(Mean platelet volume, MPV)、大型血小板比率(Platelet-large cell ratio, P-LCR)、血小板壓積(Platelet ocrit, PCT), 采用日本希森美康全自動細(xì)胞分析儀分析。

肌肉質(zhì)構(gòu)特性： 采用美國FTC公司的MSPRO型質(zhì)構(gòu)儀檢測, 采用球形探頭(直徑6.35 mm),對肌肉進(jìn)行2次壓縮進(jìn)行質(zhì)地多面剖析(TPA)模式測實。其中質(zhì)構(gòu)特性指標(biāo)包括彈性、硬度、咀嚼性、黏聚性、回復(fù)性和黏著性, 各參數(shù)定義詳見文獻(xiàn)[13]。取芙蓉鯉鯽側(cè)線以上靠近頭部的肌肉塊,修剪成10 mm×10 mm×5 mm的方塊, 每尾魚取 3 個平行樣品進(jìn)行測定, 每一個樣品進(jìn)行6次平行測量,去最大值和最小值后, 取平均值。TPA模式設(shè)定參數(shù)為測實速度： 1 mm/s; 變形程度： 50%; 最小壓力：0.1 N; 兩次壓縮時間間隔： 5s。數(shù)據(jù)采集速率： 200 pps。

1.5 統(tǒng)計分析

采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。實驗數(shù)據(jù)首先進(jìn)行方差齊性檢驗; 方差齊性后, 進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA), 用Duncan’s多重比較來確定各實驗組間差異的顯著性,P＜0.05被認(rèn)為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 生長和飼料利用

實驗結(jié)果如表3所示, 芙蓉鯉鯽的終末體重、攝食率、絕對生長率、特定生長率和增重率在各處理組間無顯著性差異(P＞0.05)。終末體長隨著替代比例增加呈逐漸降低趨勢, 且T2組體長顯著低于FM組(P＜0.05), T1組與FM組、T2組差異不顯著(P＞0.05)。飼料系數(shù)隨著替代比例增加呈逐漸上升趨勢, 且T2組飼料系數(shù)顯著大于FM組(P＜0.05),T1組與FM組、T2組差異不顯著(P＞0.05)。芙蓉鯉鯽的存活率各處理組間無顯著性差異(P＞0.05)。

2.2 形態(tài)學(xué)

芙蓉鯉鯽形體指標(biāo)如表4所示。隨著飼料中肉骨粉含量的升高, 芙蓉鯉鯽的肥滿度呈增大趨勢,且T2組顯著大于FM組和T1組(P＜0.05), T1組與FM組差異不顯著(P＞0.05)。各處理組間芙蓉鯉鯽的內(nèi)臟指數(shù)、肝胰臟指數(shù)、脂指數(shù)、腸指數(shù)、腸體比、脾臟指數(shù)無顯著性差異(P＞0.05)。

表3 豬肉骨粉替代魚粉對芙蓉鯉鯽幼魚生長及飼料利用的影響Tab. 3 Effects of the replacement of fish meal with meat and bone meal on the growth and feed utilization of juvenile Furong crucian carp

表4 豬肉骨粉替代魚粉對芙蓉鯉鯽幼魚生物性狀的影響Tab. 4 Effects of the replacement of fish meal with meat and bone meal on the biological parameters of juvenile Furong crucian carp

2.3 血液生理

實驗結(jié)果如表5表示, 飼料中肉骨粉替代魚粉蛋白, 芙蓉鯉鯽血液中血紅蛋白含量顯著升高(P＜0.05),而不同替代組間差異不顯著(P＞0.05)。芙蓉鯉鯽血液中的白細(xì)胞含量、紅細(xì)胞含量、紅細(xì)胞比容、紅細(xì)胞平均體積、平均血紅蛋白量、平均血紅蛋白濃度、血小板含量、紅細(xì)胞分布寬度、血小板分布寬度、平均血小板體積、大型血小板比率和血小板壓積在各處理組間無顯著性差異(P＞0.05)。

2.4 血清生化

實驗結(jié)果如表6所示, 芙蓉鯉鯽血清谷草轉(zhuǎn)氨酶隨著飼料中肉骨粉含量的上升呈下降趨勢, 當(dāng)替代比例達(dá)到100%, 谷草轉(zhuǎn)氨酶含量顯著低于對照組(P＞0.05), 而T1組與FM組、T2組差異不顯著(P＞0.05)。血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶的比值在FM、T1和T2三處理組有逐漸升高的趨勢, 且T2組顯著高于FM組和T1組(P＜0.05), T1組與FM組差異不顯著(P＞0.05)。芙蓉鯉鯽血清白蛋白、球蛋白、總蛋白、白球比、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、葡萄糖、甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、極低密度脂蛋白膽固醇在FM、T1和T2三處理組間均沒有顯著差異(P＞0.05)。

表5 豬肉骨粉替代魚粉對芙蓉鯉鯽幼魚血液生理指標(biāo)的影響Tab. 5 Effects of the replacement of fish meal with meat and bone meal on the blood physiological indices of juvenile Furong crucian carp

表6 豬肉骨粉替代魚粉對芙蓉鯉鯽幼魚血清生化指標(biāo)的影響Tab. 6 Effects of the replacement of fish meal with meat and bone meal on the serum biochemical indices of juvenile Furong crucian carp

2.5 背肌生化組成及氨基酸組成

背肌生化組成如表7所示, 芙蓉鯉鯽背肌中水分和灰分含量在各組間沒有顯著差異(P＞0.05); 粗蛋白質(zhì)含量FM、T1、T2有依次降低的趨勢, 但差異不顯著(P＞0.05); 粗脂肪含量FM組顯著高于T1組(P＜0.05), T2組與FM和T1之間差異不顯著(P＞0.05)。

背肌氨基酸組成如表8所示, T1組的天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸顯著低于FM組(P＜0.05), T1組的谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、酪氨酸顯著低于T2組(P＜0.05); T2組除甘氨酸顯著低于FM外(P＜0.05),其余氨基酸均與FM組沒有顯著差異(P＞0.05)。ΣEAA、ΣDAA、ΣTAA表現(xiàn)為T1＜T2＜FM, 且T1顯著小于FM(P＜0.05), T2與T1及T2與FM均差異不顯著(P＞0.05); FM、T1、T2三個處理組間的蘇氨酸、絲氨酸、胱氨酸、組氨酸、賴氨酸、精氨酸、脯氨酸沒有顯著差異(P＞0.05)。

2.6 質(zhì)構(gòu)特性

如表9所示, FM、T1和T2三處理組實驗魚肌肉的硬度、膠黏性、咀嚼性和內(nèi)聚性均沒有顯著性差異(P＞0.05), 而T1和T2替代組肌肉的彈性顯著高于FM組(P＜0.05)。T1組的黏附性顯著大于FM組(P＜0.05), 與T2組差異不顯著(P＞0.05), T2組的黏附性較FM組有所提高, 但差異不顯著(P＞0.05)。

表7 豬肉骨粉替代魚粉對芙蓉鯉鯽幼魚背肌化學(xué)組成的影響(% 以濕重計)Tab. 7 Effects of fish meal replaced by meat and bone meal on dorsal muscle chemical composition of juvenile Furong crucian carp (% wet matter)

表8 豬肉骨粉替代魚粉對芙蓉鯉鯽幼魚背肌氨基酸組成的影響(%以濕重計)Tab. 8 Effects offish meal replaced by meat and bone meal on amino acid profile of dorsal muscle of juvenile Furong crucian carp (% wet matter)

表9 豬肉骨粉替代魚粉對芙蓉鯉鯽幼魚背肌質(zhì)構(gòu)特性的影響Tab. 9 Effects of fish meal replaced by meat and bone meal on muscle texture characteristics of juvenile Furong crucian carp

3 討論

3.1 豬肉骨粉替代魚粉對芙蓉鯉鯽生長性能影響的評價

本研究中所選用的豬肉骨粉為非傳染性病死豬經(jīng)過無公害化處理后的產(chǎn)品。所用病豬并未感染惡性傳染性疫病, 符合《病害動物和病害動物產(chǎn)品生物安全處理規(guī)程》(GB 16548-2006)規(guī)定的可化制法處理的要求, 因此原則上不存在惡性傳染性病原; 此外, 國內(nèi)外研究表明, 病死豬經(jīng)無公害化處理后, 其肉骨粉衛(wèi)生和質(zhì)量安全得到進(jìn)一步提升。楊慧杰等[4]利用生物降解技術(shù)對病死豬進(jìn)行無害化處理, 所得肉骨粉中細(xì)菌、霉菌和沙門氏菌數(shù)據(jù)均符合相關(guān)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求, 且生物安全指標(biāo)(包括口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒 2 型和偽狂犬病毒等項目)檢測結(jié)果均為陰性。Routt等[14]對17個不同化制處理廠的原料和產(chǎn)品進(jìn)行了檢測, 發(fā)現(xiàn)經(jīng)過處理后產(chǎn)氣莢膜梭菌、李斯特菌、彎曲桿菌和沙門氏菌均被完全殺滅。曾中華[15]研究發(fā)現(xiàn), 畜禽養(yǎng)殖場有機(jī)廢棄物處理機(jī)(TY-FCW-26型)能有效殺滅豬瘟病毒、圓環(huán)病毒、偽狂犬病毒、藍(lán)耳病毒及大腸桿菌、沙門氏菌和蛔蟲卵, 生物安全水平高。由此可見, 經(jīng)過無害化處理后, 非傳染性病死豬肉骨粉品質(zhì)提高, 所含菌類顯著減少,質(zhì)量更加安全。傳統(tǒng)肉骨粉是由哺乳動物的屠宰中不宜食用的下腳料等經(jīng)高溫高壓消毒及粉碎加工提煉等一系列加工處理制作而成, 其中骨質(zhì)成分和難以消化的殘渣占有很大比例。根據(jù)我國飼料用骨粉及肉骨粉國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 20193—2006)中肉骨粉粗蛋白質(zhì)/(%)的標(biāo)準(zhǔn)劃分規(guī)定： 一級(≥50), 二級(≥45), 三級(≥40); 粗灰分/(%)的標(biāo)準(zhǔn)劃分規(guī)定：一級(≤33), 二級(≤38), 三級(≤43))。本實驗中選用的豬肉骨粉原料(蛋白質(zhì)66.65%, 粗脂肪13.34%,水分3.25%, 灰分18.25%)中肉粉比例遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)肉骨粉中的肉粉比例, 從而其蛋白質(zhì)含量和必需氨基酸組成等營養(yǎng)素要遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)肉骨粉。

本研究表明, 肉骨粉替代芙蓉鯉鯽飼料中50%—100%魚粉(魚粉含量10%)時, 芙蓉鯉鯽特定生長率、存活率在對照組和替代組之間未出現(xiàn)顯著變化。類似的, 敬婷等[16]研究發(fā)現(xiàn), 肉骨粉可替代羅非魚日糧中33%—100%魚粉(魚粉含量12%)而不影響魚體的生長。Moutinho等[17]對金頭鯛(Sparus aurata)研究表明, 肉骨粉替代其飼料50%魚粉蛋白(魚粉含量57.4%)對其生長沒有顯著影響, 而當(dāng)替代100%魚粉蛋白時, 其生長性能顯著降低。分析認(rèn)為, 在不同魚類的研究中, 肉骨粉替代魚粉的比例及對其生長性能的影響差異較大, 首先可能與飼料中肉骨粉的絕對含量相關(guān), 其次可能與實驗所選用肉骨粉的質(zhì)量優(yōu)劣相關(guān)。Nengas等[18]實驗發(fā)現(xiàn), 以禽肉粉及其副產(chǎn)品替代魚粉蛋白時, 某些限制性氨基酸的不足是制約金頭鯛(Sparus aurata)生長的主要因素。在本實驗中, 替代組和對照組飼料在必需氨基酸含量和比例均非常接近, 從而保證各實驗飼料均有較好的營養(yǎng)價值。其次, 來源于肉骨粉中大量易消化吸收的鱗、鈣等礦物元素可能對于芙蓉鯉鯽的生長具有重要促進(jìn)作用[19]。

在本實驗中, 芙蓉鯉鯽飼料系數(shù)隨著飼料中肉骨粉含量的增加呈現(xiàn)上升的趨勢, 當(dāng)替代比例達(dá)到100%, 替代組飼料系數(shù)顯著大于對照組。這與Moutinho等[17]對金頭鯛(Sparus aurata)報道相似,金頭鯛飼料效率隨著飼料中肉骨粉替代魚粉蛋白比例的增加而降低, 且75%替代顯著低于對照組,而50%替代差異不顯著。即肉骨粉低水平替代魚粉蛋白(替代低于50%魚粉蛋白)不會對其飼料系數(shù)產(chǎn)生顯著影響, 而高水平替代(替代75%—100%魚粉蛋白)會使飼料系數(shù)顯著升高。芙蓉鯉鯽對高肉骨粉含量飼料具有較高的飼料系數(shù)可能與魚類對肉骨粉的表觀消化率較低有關(guān)。常青等[20]發(fā)現(xiàn)花鱸(Lateolabrax japonicus)對于紅魚粉具有92.30%的蛋白質(zhì)表觀消化率和83.96%的能量表觀消化率,而對于肉骨粉, 蛋白質(zhì)和能量的表觀消化率分別為77.39%和67.94%。同樣, 張松等[21]研究結(jié)果表明,異育銀鯽對于肉骨粉的干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、能量、磷的表觀消化率隨著飼料中肉骨粉含量的上升呈顯著的下降趨勢。研究發(fā)現(xiàn), 肉骨粉中灰分的含量達(dá)20%以上, 而原料過高的灰分則嚴(yán)重限制魚類對其蛋白質(zhì)等營養(yǎng)素的消化吸收[22]。

3.2 豬肉骨粉替代魚粉對芙蓉鯉鯽血液生理生化指標(biāo)影響的評價

血紅蛋白的主要功能是運輸和儲存氧氣, 其次還具有調(diào)節(jié)pH、控制一氧化碳水平、參與免疫反應(yīng)的功能[23]。在本實驗中, 肉骨粉替代飼料中魚粉蛋白, 能顯著提高芙蓉鯉鯽血液中血紅蛋白水平,而對魚其他血液生理指標(biāo)均未產(chǎn)生顯著變化。血紅蛋白水平的升高, 一方面有利于更有利于芙蓉鯉鯽對氧氣的獲得, 在低溶解氧含量條件下降低其窒息點, 提高抗應(yīng)激能力; 另一方有利于滿足其各項生理代謝活動對血氧的需求。

在本實驗中, 芙蓉鯉鯽血清AST隨肉骨粉含量增加而顯著降低, 血清ALT在各處理組間無顯著差異。田芊芊等[24]對黃鱔的研究結(jié)果與本研究結(jié)果相同, 肉骨粉替代黃鱔飼料中的魚粉, 黃鱔血清AST隨飼料中肉骨粉含量升高顯著降低, ALT在各組間無顯著差異。陳建國[25]也有類似報道, 團(tuán)頭魴血清中AST和ALT含量隨著肉骨粉替代魚粉比例的升高而顯著降低。血液中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)是魚類肝臟損傷程度的主要評價指標(biāo)[26]。AST和ALT主要分布于肝細(xì)胞內(nèi)各種細(xì)胞器中。當(dāng)肝細(xì)胞受到較輕損傷時, 先是血液中ALT升高; 當(dāng)肝細(xì)胞受損壞死嚴(yán)重時, 肝臟中AST才釋出。肝細(xì)胞內(nèi)的AST和ALT等活性酶因大量釋放而使其在血清中的含量升高, 其升高的程度與肝細(xì)胞受損的程度相一致[27]。因此, 可以認(rèn)為以肉骨粉替代魚粉蛋白對芙蓉鯉鯽的肝功能未造成損傷。

3.3 豬肉肉骨粉替代魚粉對芙蓉鯉鯽營養(yǎng)成分和質(zhì)構(gòu)特性影響的評價

蛋白質(zhì)和脂肪含量是肌肉營養(yǎng)成分的重要體現(xiàn), 也影響著肌肉的品質(zhì)好壞。在本實驗中, 飼料中病死豬肉骨粉水平對芙蓉鯉鯽粗脂肪含量有顯著影響, 且50%替代組背肌粗脂肪含量顯著低于魚粉組, 而對其背肌粗蛋白質(zhì)含量沒有顯著影響。類似的, 敬婷等[16]報道, 羅非魚日糧中肉骨粉替代魚粉后各組之間全魚水分、粗蛋白質(zhì)差異不顯著, 脂肪逐漸下降。Moutinho等[17]報道, 金頭鯛(Sparus aurata)日糧中肉骨粉替代50%及75%的魚粉蛋白后各組之間全魚水分、灰分、粗蛋白質(zhì)差異不顯著,脂肪含量卻在75%替代組顯著降低。魚類對脂肪的消化性能與脂肪源的脂肪酸組成有關(guān), 動物性脂肪源的飽和脂肪酸含量高, 難以被魚體消化[28], 肉骨粉替代魚粉后飼料中飽和脂肪酸的含量增加, 而飼料中飽和脂肪酸含量高會降低魚體對飼料脂肪和干物質(zhì)的消化率[29]。此外, 本研究發(fā)現(xiàn), 隨著飼料中病死豬肉骨粉替代魚粉水平增加, 芙蓉鯉鯽背肌中必需氨基酸、鮮味氨基酸和總氨基酸呈一定的下降趨勢。與本研究類似, 在框鱗鏡鯉[30]中以蠶蛹粉替代魚粉和團(tuán)頭魴[25]中以肉骨粉替代魚粉也會出現(xiàn)魚體背肌中必需氨基酸、鮮味氨基酸和總氨基酸含量出現(xiàn)顯著下降。本實驗中芙蓉鯉鯽背肌總氨基酸和必需氨基酸含量下降, 一方面由于替代組飼料中相應(yīng)的氨基酸含量下降, 說明飼料與背肌氨基酸組成正相關(guān); 另一方面, 實驗肉骨粉中可能摻入了過多的皮毛、骨質(zhì)、磷及難以消化的其他殘渣等, 制約了氨基酸的消化吸收, 從而魚體氨基酸含量下降。

質(zhì)構(gòu)剖面分析法 (Texture Profile Analysis, TPA)是通過質(zhì)構(gòu)儀模擬人口腔的咀嚼動作來探討食品的質(zhì)構(gòu)特性, 該方法具有客觀、快捷、結(jié)果可量化等特點。感官和質(zhì)構(gòu)是反映肉質(zhì)好壞的兩種評價手段, 通過質(zhì)構(gòu)的分析, 能夠客觀的得到魚肉品質(zhì)的高低。肌肉的質(zhì)構(gòu)特性主要由彈性、硬度、咀嚼性、黏聚性、回復(fù)性和黏著性6個指標(biāo)來表示。有研究表明, 質(zhì)構(gòu)指標(biāo)與營養(yǎng)指標(biāo)以及生理指標(biāo)間均表現(xiàn)出一定的相關(guān)性, 魚體的硬度與粗脂肪含量呈正相關(guān), 而魚體質(zhì)構(gòu)的黏附性和彈性與粗蛋白含量呈負(fù)相關(guān)[31,32]。因此在本實驗中, 芙蓉鯉鯽質(zhì)構(gòu)硬度降低, 而黏附性和彈性顯著上升可能是與其背肌粗脂肪和粗蛋白含量均出現(xiàn)一定程度的下降有關(guān)。TPA指標(biāo)在一定程度上反映了肌肉的品質(zhì)狀況, 胡芬等[32]認(rèn)為魚類肌肉硬度較大、彈性較強,口感會更好。Mithchell[33]研究表明彈性模擬魚肉在口腔行為, 彈性越大, 咀嚼性越好, 肉質(zhì)越爽脆。在本實驗中, 豬肉骨粉替代魚粉顯著增加了芙蓉鯉鯽肌肉的彈性及黏附性, 說明豬肉骨粉替代魚粉在一定程度上改善了芙蓉鯉鯽質(zhì)構(gòu)特性, 增強了魚肉品質(zhì)。

4 結(jié)論

在本實驗條件下, 以無害化處理產(chǎn)品豬肉骨粉替代芙蓉鯉鯽幼魚飼料中魚粉蛋白, 魚體的生長性能在各處理組間無顯著差異, 而飼料系數(shù)在100%替代組顯著高于對照組; 實驗魚血液中血紅蛋白含量替代組顯著高于對照組, 血液中谷草轉(zhuǎn)氨酶含量隨著飼料中肉骨粉替代比例增加而顯著降低, 血液其他生化指標(biāo)在各處理組間沒有顯著差異; 肌肉組成方面, 50%替代組肌肉粗脂肪含量顯著低于對照組, 且背肌天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸含量顯著低于對照組; 質(zhì)構(gòu)特性方面, 替代組肌肉的彈性和黏附性均顯著高于對照組。綜合以上芙蓉鯉鯽的各項指標(biāo)情況, 當(dāng)魚粉含量為10%時, 建議病死豬肉骨粉可替代芙蓉鯉鯽幼魚飼料中100%魚粉蛋白。