◆作者：鞏華 趙長(zhǎng)臣 陳總會(huì) 賴迎迢

◆單位：中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所

加州鱸，即大口黑鱸(large mouth bass，Micropterus salmoides)，屬?gòu)V溫肉食性淡水魚(yú)類(lèi)，是目前廣東省乃至全國(guó)重要的特種養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)。大口黑鱸是兇猛的肉食性魚(yú)類(lèi)，無(wú)節(jié)幼蟲(chóng)和輪蟲(chóng)常用作大口黑鱸仔魚(yú)的開(kāi)口飼料，魚(yú)苗以輪蟲(chóng)和小型甲殼動(dòng)物為食，通過(guò)馴化大口黑鱸能夠攝食顆粒飼料。大口黑鱸長(zhǎng)到40～60cm 時(shí)就能被馴化吃軟顆粒飼料（Williamson，1990）。

該品種原產(chǎn)美國(guó)，因其適應(yīng)能力強(qiáng)、養(yǎng)殖周期短、抗病能力強(qiáng)、肉質(zhì)鮮美等特點(diǎn)，從1970 開(kāi)始從密西西比河流域推廣到世界各地，1983 年引入我國(guó)廣東，成為地方特色名優(yōu)品種，養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大，深受行業(yè)重視,但是隨著養(yǎng)殖密度的不斷增加、水體環(huán)境惡化以及病原微生物的傳播，加州鱸病害相關(guān)的報(bào)道越來(lái)越多，發(fā)病越來(lái)越嚴(yán)重。特別是病毒病，如虹彩病毒科（Iridoviridae）蛙病毒屬（Ranavirus）的大口黑鱸病毒（Large mouth Bass Virus，LMBV）、大口黑鱸潰瘍病病毒（Large mouth Bass Ulcerative disease Virus，LMBUV），虹彩病毒科細(xì)胞腫大病毒屬（Megalocytivirus）的傳染性脾腎壞死病毒（Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus，ISKNV），彈狀病毒科（Rhabdoviridae）水泡病毒屬（Vesiculovirus）的加州鱸彈狀病毒（Large mouth Bass Perhabdovirus，LBPV），自2008 年發(fā)病以來(lái)，從苗種到成魚(yú)，都有發(fā)生，甚至近年來(lái)在加州鱸上還檢出神經(jīng)壞死病毒（Nervous necrosis virus，NNV），這些病毒病雖然發(fā)病季節(jié)各不相同，但病毒病在廣東全年都會(huì)發(fā)生，可感染魚(yú)苗、幼魚(yú)和成魚(yú)，有時(shí)致死率最高可達(dá)90%以上，可通過(guò)水源、魚(yú)卵、餌料魚(yú)等進(jìn)行水平傳播，同時(shí)也存在通過(guò)親魚(yú)進(jìn)行垂直傳播的可能。

目前魚(yú)類(lèi)病毒病還沒(méi)有特效藥物，對(duì)加州鱸的疫苗研究方興未艾，除了做好苗種檢疫和隔離之外，只能通過(guò)外調(diào)水體，內(nèi)服保肝產(chǎn)品提高免疫力，進(jìn)行綜合防控。特別高溫季節(jié)，加州鱸攝食旺盛，需要從管理各個(gè)環(huán)節(jié)入手，積極防控各類(lèi)病害發(fā)生。

1 加州鱸的病毒病

1.1 蛙屬虹彩病毒

由病毒感染引起的加州鱸疾病死亡率高，且難以防治，對(duì)世界范圍內(nèi)的加州鱸養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了較為嚴(yán)重的威脅。加州鱸病毒首次發(fā)現(xiàn)于1991 年的美國(guó)弗羅里達(dá)州的野生魚(yú)體中，1995 年美國(guó)南卡羅萊納州的水庫(kù)養(yǎng)殖加州鱸暴發(fā)大規(guī)模死亡，經(jīng)病原分離鑒定為L(zhǎng)MBV，分子特性研究表明該病毒隸屬于虹彩病毒科（Iridoviridae） 蛙病毒屬（Ranavirus）。我國(guó)最早發(fā)現(xiàn)于2008 年廣東省的佛山順德地區(qū)，被其感染的加州鱸死亡率高達(dá)60%以上。此次流行暴發(fā)的加州鱸潰瘍病的發(fā)生溫度為25～32℃，病魚(yú)體表有斑塊狀出血性潰瘍，甚至大片潰爛，裸露肌肉壞死并有出血，尾鰭、胸鰭和背鰭基部紅腫潰爛，部分病魚(yú)體色變黑，眼有白內(nèi)障，或伴有心腔血塊聚積，鰓動(dòng)脈擴(kuò)張淤血，鰓絲和肝臟發(fā)白，少數(shù)病魚(yú)螺旋游動(dòng)，肝、脾、腎腫大并伴有出血。病魚(yú)肝臟腫大、顏色發(fā)白或發(fā)黃，也有的發(fā)病魚(yú)體表雖完好但脾臟腫大，且此次病毒主要影響成魚(yú)。實(shí)驗(yàn)分離得到的加州鱸潰瘍病病毒（LMBUV）在病毒粒子大小與LMBV 相似，與裂唇魚(yú)病毒（DFV）的氨基酸序列同源性最高，為100%；與LMBV 氨基酸序列同源性為98%，推測(cè)此次暴發(fā)潰瘍病是由觀賞魚(yú)DFV 病毒傳播感染加州鱸所致，這也是我國(guó)加州鱸的蛙屬虹彩病毒病首次報(bào)道。

1.2 細(xì)胞腫大虹彩病毒

2009 年在廣東省佛山南海、順德等地，一種新的病毒被發(fā)現(xiàn)。發(fā)病魚(yú)在水面離群慢游，鰓變白或伴有出血點(diǎn)，肝臟腫大變白或土黃色，少數(shù)魚(yú)肝臟有出血斑，脾臟腫大變黑紅色，腎臟也腫大。一些病魚(yú)腹隔膜破裂、潰爛，黏連在一起。部分病魚(yú)體色變黑，下頜至腹部發(fā)紅，眼眶四周充血，嚴(yán)重時(shí)個(gè)別眼球突出。該病以肝脾的腫大為主要特征，暫命名為大口黑鱸肝脾腫大病。這種病毒的細(xì)胞質(zhì)中存在大量的病毒顆粒，分子特性分析顯示，與鱖染性脾腎壞死病毒（ISKNV）的MCP 基因核苷酸同源性為98%，氨基酸同源性為99%，說(shuō)明該病毒與ISKNV 有很近的親緣關(guān)系，也可能就是ISKNV 的一個(gè)病毒株。電鏡觀察和MCP 基因測(cè)序分析結(jié)果顯示，該病毒屬于虹彩病毒科細(xì)胞腫大病毒屬（Megalocytivirus）。

1.3 彈狀病毒

2013 年以來(lái)，在加州鱸的主養(yǎng)區(qū)的苗種發(fā)病嚴(yán)重，該病主要在4-5 月、10-11 月，水 溫 在25℃～28℃，發(fā)病快，可導(dǎo)致100%死亡。病魚(yú)主要癥狀是爛身、爛鰭、停止攝食，瀕死魚(yú)在水面漫游，嚴(yán)重者體色發(fā)黑。解剖病魚(yú)鰓有少量出血點(diǎn)、肝臟嚴(yán)重腫大、充血，呈“花肝”，腎臟腫大，胃腸空、無(wú)食，其他組織器官無(wú)明顯變化。加州鱸魚(yú)彈狀病毒病的病原為加州鱸彈狀病毒，屬水泡病毒屬（Vesiculovirus），為線性負(fù)鏈單鏈RNA 病毒，病毒粒子大小為53nm×140nm，形態(tài)似棒狀或子彈狀。

2 臨床診斷

這些病毒病在生產(chǎn)中主要通過(guò)臨床典型癥狀、組織病理變化以及發(fā)病季節(jié)、水溫、發(fā)病程度、流行速度等初步判斷，但臨床確診就要通過(guò)分子手段，即進(jìn)行核酸的各種聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測(cè)，通過(guò)保守序列的特異性條帶進(jìn)行分析。

3 防控措施

目前加州鱸的養(yǎng)殖中，病毒病危害日漸嚴(yán)重，這些病原可以通過(guò)水體和病魚(yú)傳播，有的在苗種中潛伏時(shí)間較長(zhǎng)，隨著苗種攜帶，嚴(yán)重時(shí)80%池塘發(fā)病，死亡率短時(shí)間內(nèi)可高達(dá)90%，用藥效果不佳，經(jīng)濟(jì)損失大，在病害發(fā)生之前進(jìn)行預(yù)防具有積極意義。

養(yǎng)殖過(guò)程中注意調(diào)水改底。水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物生活在水中，是一個(gè)生產(chǎn)、凈化場(chǎng)所，必須滿足環(huán)境生物生存、生長(zhǎng)的要求，才能有效地穩(wěn)定環(huán)境和提高生產(chǎn)、凈化效能，水質(zhì)的好壞直接決定動(dòng)物的健康狀況。所以，除了保證溶解氧、合適的溫度、pH 值、一定的浮游生物量外，養(yǎng)水的關(guān)鍵是氨氮的天然和人工控制。注意養(yǎng)殖過(guò)程中的底質(zhì)維護(hù)，池塘底部的土壤是許多積累在池塘生態(tài)系統(tǒng)中的物質(zhì)倉(cāng)庫(kù)，也是各類(lèi)病原儲(chǔ)存的溫床。一般增氧機(jī)，特別是涌浪機(jī)、微孔增氧設(shè)備等，可以促進(jìn)水體上下交換，提高水體底部的含氧量，降低條件性致病菌的繁殖，提高機(jī)體免疫力。

一旦發(fā)病，使用藥物須注意有關(guān)事項(xiàng)，忌用強(qiáng)刺激性藥物。治療病毒病的藥物還沒(méi)有特效藥，許多相關(guān)疫苗也正在研發(fā)中，所以在養(yǎng)殖過(guò)程中應(yīng)該適當(dāng)控制養(yǎng)殖密度，嚴(yán)格消毒，杜絕傳染源傳播，同時(shí)在飼料中添加一些營(yíng)養(yǎng)保健藥物，生產(chǎn)中防控魚(yú)類(lèi)病毒病最好的選擇還是內(nèi)服中藥類(lèi)制劑，如三黃散、板藍(lán)根、穿心蓮等清熱解毒、涼血消腫類(lèi)中藥。復(fù)方中草藥添加劑的使用，使得合成激素的膽固醇含量增加，從而促進(jìn)了魚(yú)體代謝和生長(zhǎng)；搭配抗菌藥物防止細(xì)菌類(lèi)病原繼發(fā)性感染，同時(shí)添加維生素等，調(diào)理動(dòng)物肝臟。

4 加州鱸肝臟調(diào)理

在臨床診斷過(guò)程中，幾乎所有發(fā)病加州鱸的肝臟都處于非正常狀態(tài)：肝臟腫大，質(zhì)地變脆，同時(shí)顏色變淺、變黃，肝臟有出血點(diǎn)或斑狀出血，即“花肝”癥狀。肝臟在魚(yú)體內(nèi)主要分泌膽汁，合成各種消化酶和儲(chǔ)存糖原，進(jìn)行蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物的異化和同化作用。養(yǎng)殖環(huán)境中的農(nóng)藥、獸藥、添加劑、激素和病原毒素等可能會(huì)危害到魚(yú)體健康的外源物質(zhì)的代謝主要在肝臟中進(jìn)行，肝臟在解毒抗應(yīng)激方面發(fā)揮主力作用。而在發(fā)病高峰期，大多數(shù)動(dòng)物生長(zhǎng)旺盛，攝食量大，肝臟負(fù)擔(dān)大。動(dòng)物排泄的氨氮多，造成水中氨氮等有毒化學(xué)物質(zhì)濃度上升，對(duì)動(dòng)物機(jī)體危害大；高溫季節(jié)易出現(xiàn)底質(zhì)、水質(zhì)的持續(xù)惡化，有毒有害物質(zhì)長(zhǎng)時(shí)間超標(biāo)，養(yǎng)殖密度大的水體在養(yǎng)殖中后期，藍(lán)藻、裸藻等分泌有害藻毒素的微藻生長(zhǎng)旺盛，都會(huì)影響機(jī)體，特別是肝臟。高溫季節(jié)養(yǎng)殖魚(yú)攝食旺盛，特別前期攻料太猛，造成體內(nèi)脂肪、糖原蓄積過(guò)多，肝臟負(fù)擔(dān)大，還可能形成脂肪肝。

通過(guò)馴化加州鱸能夠攝食顆粒飼料到體長(zhǎng)40～60cm，目前加州鱸養(yǎng)殖中已可全程投喂人工飼料，飼料是水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中最大宗的投入品，飼料的選擇與管理是養(yǎng)殖成敗的關(guān)鍵因素之一。研究也發(fā)現(xiàn)，誘發(fā)加州鱸肝臟疾病的主要原因可能就是飼料中高水平的可消化碳水化合物（＞20%）和霉菌毒素等，特別是使用的膨化飼料中，適當(dāng)增加淀粉含量可提高膨化系數(shù)，增加浮水率，且淀粉含量稍高可增加擠壓操作寬度，易獲得高質(zhì)量膨化顆粒。但已有研究表明肉食性魚(yú)對(duì)葡萄糖的消化吸收效率高，但血液中葡萄糖的清除速率慢，易引起持續(xù)性高血糖，高糖會(huì)引起加州鱸魚(yú)體肝臟的病變，增加代謝負(fù)擔(dān)，生長(zhǎng)減緩。室外養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)中飼料的碳水化合物由27%降低到20%，可改善加州鱸的肝臟組織形態(tài)，提高運(yùn)輸過(guò)程抗逆性和成活率。體重23～29g的加州鱸養(yǎng)殖30 天的實(shí)驗(yàn)表明，加州鱸飼料中纖維素的含量不能超3.5%，否則會(huì)造成肝臟組織形態(tài)和功能的顯著性變化。

因此在加州鱸病毒病的預(yù)防中，保肝護(hù)肝應(yīng)該成為重要措施之一。

4.1 中草藥

中草藥中含有多種生物活性物質(zhì)和天然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，能促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體代謝和蛋白質(zhì)及酶的合成，提高肝臟代謝功能，降低肝臟負(fù)擔(dān)。很多中藥組方，如龍膽瀉肝散、小柴胡散、板藍(lán)根散、三黃散等是很好的保肝類(lèi)組方，同時(shí)具有清熱解毒的功效，在養(yǎng)殖過(guò)程中，特別是高溫季節(jié)添加，可以提高免疫力，降低肝臟應(yīng)激強(qiáng)度。但是由于加州鱸是肉食性魚(yú)類(lèi)，對(duì)中草藥的消化吸收能力普遍不如畜禽動(dòng)物（消化道肌肉層厚度、腸壁絨毛數(shù)量、消化酶的種類(lèi)和活性），對(duì)中草藥加工工藝要求更高，如極細(xì)粉（200 目以上）的效果比普通散劑（40 目）要顯著得多，而在生產(chǎn)中使用中藥提取物的效果更佳。

4.2 維生素

飼料中添加維生素可以很好維護(hù)肝臟功能。如VC 參與各種物質(zhì)代謝，特別是其作為羥化酶的輔酶必須物質(zhì)。如VC 作為脯氨酸和賴氨酸羥化酶的輔酶，催化羥脯氨酸和羥賴氨酸的形成，而脯氨酸和賴氨酸是結(jié)締組織、上皮組織、骨組織中的膠原蛋白的重要組成成分，VC 不足，可導(dǎo)致毛細(xì)血管脆性大大提高，骨骼發(fā)育畸形，傷口愈合難等，嚴(yán)重不足時(shí)可導(dǎo)致壞血病。而動(dòng)物體內(nèi)膽固醇轉(zhuǎn)變?yōu)槟懰岬倪^(guò)程中必需經(jīng)有VC 參與的羥化反應(yīng)，才能使膽固醇以膽酸鹽的形式排出體外。VC 還可以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力及應(yīng)激反應(yīng)，大量研究表明飼料中添加150～200mg/kg水平的VC 能提高加州鱸的生長(zhǎng)等相關(guān)各項(xiàng)生理機(jī)能，增強(qiáng)抗病力，提高飼料利用效率及魚(yú)體存活率。而VA、VD、VE 等是肉食性魚(yú)類(lèi)的必須維生素，以加州鱸生長(zhǎng)性能、鈣磷代謝、血清和肝臟抗氧化能力以及抗感染能力等作指標(biāo)，對(duì)飼料中維生素A 水平的最適需求量為2600～3550 IU /kg，VD3的 最適需求量為1370～1340 IU/kg，VE 最適需求量為400IU/kg 以上。

4.3 益生菌

飼料中添加酵母粉、乳酸菌等益生菌，能夠維護(hù)肝臟機(jī)能。酵母菌、乳酸菌等能將食物中的大分子蛋白質(zhì)，部分降解為小分子肽和游離氨基酸，還可以分泌乳酸，產(chǎn)生多種消化酶，促進(jìn)魚(yú)體胃腸的消化吸化，減輕肝臟負(fù)擔(dān)。酵母水解物除小肽、游離氨基酸及豐富的B 族維生素外，還有大量的甘露聚糖、葡聚糖和核苷酸等益生物質(zhì)，能夠顯著提高肝臟活性，特別是肝臟中的轉(zhuǎn)氨酶活性。乳酸菌能產(chǎn)生B 族維生素，包括葉酸、膽酸、生物素、維生素B6和維生素K 等，提供肝臟活動(dòng)的輔酶，促進(jìn)肝臟中的物質(zhì)同化作用。研究發(fā)現(xiàn)，隨著酵母等蛋白含量升高，加州鱸生長(zhǎng)加快，但水體中總氨氮水平顯著升高，會(huì)影響肝臟健康，一般以葡聚糖和甘露聚糖為指標(biāo)，其最適需求量分別為600～900 和400～600 mg/kg。此外還需注意益生菌不能與具有抗菌作用的添加物一起使用。

4.4 其它活性物質(zhì)

飼料中還可以添加膽汁酸、氨基酸、酶類(lèi)等活性物質(zhì)。膽汁酸是膽汁的主要成分，是動(dòng)物機(jī)體在進(jìn)行降解膽固醇的途徑中的降解產(chǎn)物（固醇類(lèi)物質(zhì)），能夠?qū)⒅竞椭?lèi)物質(zhì)乳化為油水混合狀態(tài)，進(jìn)而利于脂肪酶與脂類(lèi)物質(zhì)的作用，促進(jìn)脂肪的消化代謝，不過(guò)膽汁酸蓄積在肝臟和血液中，可引起肝壞死和機(jī)體系統(tǒng)與器官的損傷。一般來(lái)說(shuō)，膽汁酸在加州鱸飼料中的推薦劑量為250～300mg/kg。飼料中半胱氨酸鹽酸鹽能顯著提高加州鱸的特定生長(zhǎng)率、攝食率及腸道胃蛋白酶和胰蛋白酶活性，其添加量為620～680mg/kg。還需要注意的是，膽汁酸等有機(jī)物的含量和種類(lèi)具有生物物種差異性，產(chǎn)生功效的物質(zhì)也不相同，在添加時(shí)除注意添加劑量，還要注意選擇適合加州鱸需要的產(chǎn)品種類(lèi)。

此外，為了防止加州鱸飼料原料的氧化產(chǎn)生危害，需添加外源性的抗氧化劑，一般添加硒元素，特別是有機(jī)硒，但高水平的硒會(huì)對(duì)肝細(xì)胞有一定毒性。在綜合生長(zhǎng)性能、血漿生化指標(biāo)、組織抗氧化指標(biāo)及肝臟組織結(jié)構(gòu)等指標(biāo)，當(dāng)飼料硒本底含量為0.76 mg/kg 時(shí)，加州鱸硒元素最高推薦劑量為0.5 mg/kg（總硒含量為1.29 mg/kg）。魚(yú)粉、磷蝦粉等動(dòng)物蛋白質(zhì)原料中硒元素水平高，因此在加州鱸飼料中使用魚(yú)粉時(shí)要綜合考慮原料來(lái)源中各有效成分的含量。

參考文獻(xiàn)：（略）