陳 輝
(華中農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院,武漢430070)
當前我國養(yǎng)殖已進入無抗養(yǎng)豬時代,并且在當前非洲豬瘟以及“新冠”疫情背景下造成生豬出欄量大幅下降,因而在養(yǎng)豬生產(chǎn)中尋求一種綠色高效的飼用抗生素可替代物對于養(yǎng)豬效益具有積極意義。丁酸梭菌(Clostridium Butyricum,CB)是以有機酸(乙酸、丁酸等)為主要代謝產(chǎn)物的細菌,為嚴格的厭氧革蘭氏陽性芽孢桿菌,是一種優(yōu)良的新型飼用微生態(tài)制劑[1]。研究表明,CB具有促進生長、改善機體腸道功能、改善機體抗氧化性能、改善機體免疫性能以及抑菌等諸多生物學功能,同時具有減少藥物殘留、耐熱、耐酸、耐受多種抗生素等優(yōu)良生物學特性[2],因此在仔豬、生長育肥豬以及母豬中均有著良好的飼用價值。文章就CB的生物學功能及其在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用現(xiàn)狀展開綜述,并分析其生物學特性,以期為養(yǎng)豬生產(chǎn)中CB的合理運用以及推廣提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)參考,進而有效地推動我國生豬養(yǎng)豬朝著健康綠色高效的發(fā)展方向前進。
CB在形態(tài)上呈現(xiàn)桿狀或彎曲狀,無莢膜,絲狀菌體,為革蘭氏陽性菌(但培養(yǎng)時間較長(24h左右)可轉(zhuǎn)為陰性)[3];當溫度25℃~37℃、pH為4.0~9.8為CB最適生存環(huán)境,但CB在酸性環(huán)境(pH 1.0~5.0)仍可存活,且在高溫環(huán)境(55℃)存活率達100%[4];對抗生素(慶大霉素等)、膽鹽(0.35%)、酸(pH=2或3)、人工胃液以及腸液具有很好的耐受性和遺傳穩(wěn)定性[5,6];這顯示了CB作為潛在飼料抗生素可替代物的潛力。同時,研究也顯示CB對于多種致病菌具有抑制作用,研究證實CB上清培養(yǎng)液分別與鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌和大腸桿菌三種致病菌作用1h后,對致病菌具有明顯的抑制作用(抑菌力均在78%以上)[7];經(jīng)酸馴化后的酪丁酸梭菌(1.0×1011個/mL)對于飼料中玉米赤霉烯酮毒素含量具有顯著的清除效果,其吸附率高達98.5%,有效降低飼料毒素[8]。由此表明,CB具有良好的耐受性、抑菌活性等優(yōu)良生物學特性,這為CB作為抗生素可替代物奠定了堅實的生物學基礎(chǔ)。
大量研究顯示,CB對于動物機體生長(生產(chǎn))性能具有促進作用。仔豬中的研究證實,21日齡斷奶仔豬日糧中添加1000mg/kgCB可顯著提高仔豬平均日采食量(ADFI)以及平均日增重(ADG)(P<0.05),且顯著降低料重比和腹瀉率(P<0.05)[9];在家禽方面,王成森[10]研究表明海蘭褐蛋雞日糧中分別添加5×106、10×106CFU/gCB菌粉,飼喂6周,檢測生長性能指標,與基礎(chǔ)日糧組相比,CB組蛋雞產(chǎn)蛋率、蛋黃顏色、蛋殼厚度均顯著提高(P<0.05),料蛋比和死淘率則顯著降低(P<0.05);鄭超等[11]報道,在380日齡京粉2號蛋雞日糧中添加1×105 CFU/gCB,飼喂12周后可顯著將產(chǎn)蛋率提高了3%、哈氏單位提高了12.2%、料蛋比降低了6.7%(P<0.05);乳鴿中的研究顯示,在1日齡乳鴿日糧中聯(lián)合添加5×109CFU/kg乳酸菌+1×108CFU/kgCB可顯著提高其ADG以及28日齡體重(P<0.05),但與抗生素組(金霉素)相比無顯著差異[12];而鄭愛娟等[13]研究表明,1日齡愛拔益加肉雞日糧中添加2.5×108CFU/kgCB對肉雞21日齡以及42日齡體重、1~21日齡ADG以及料重比無顯著影響;造成差異的原因可能是CB添加劑量不一所致。犢牛中的研究證實,其日糧添加2×108CFU/kgCB可顯著提高其ADG(P<0.05)[14]。綜上顯示,CB對于畜禽生長性能具有良好地促進作用。
CB作為一種活性微生態(tài)制劑,對于腸道菌群平衡以及腸道形態(tài)具有改善作用,進而維持機體腸道微生態(tài)平衡。在改善腸道菌群方面,楊曉偉發(fā)現(xiàn)[9],在21日齡斷奶仔豬日糧中添加1000mg/kgCB可顯著提高其腸道有益菌乳酸菌以及雙歧桿菌數(shù)量(P<0.05),而顯著降低有害菌大腸桿菌數(shù)量(P<0.05);王成森[10]研究證實,海蘭褐蛋雞日糧中分別添加5×106、10×106CFU/gCB菌粉可顯著提高蛋雞盲腸中乳酸菌數(shù)量、顯著降低大腸桿菌數(shù)量(P<0.05);陸江等[15]研究了CB對慢性腎衰竭(CRF)犬腸道菌群的影響,對其灌胃1.0 g/kg BWCB,干預(yù)4周,發(fā)現(xiàn)CB可通過調(diào)節(jié)CRF腸道菌群穩(wěn)態(tài),進而清除血清小分子尿毒素。CB也可通過改善腸道形態(tài)而改善腸道功能,袁文華等[12]研究報道,1日齡乳鴿日糧中聯(lián)合添加5×109CFU/kg乳酸菌+1×108CFU/kgCB可顯著提高絨毛高度及絨毛高度/隱窩深度(V/C)值(P<0.05)、而隱窩深度顯著降低(P<0.05),且空腸、回腸V/C值顯著高于抗生素組;類似的研究證實,1日齡紹興公鴨日糧中聯(lián)合添加800 mg/kg的黃芪多糖+250 mg/kg的丁酸梭菌制劑可顯著降低隱窩深度(P<0.05),且顯著增加V/C值(P<0.05)[16];這提示CB對于機體腸道形態(tài)具有改善作用。由此表明CB通過改善機體腸道菌群平衡以及腸道形態(tài)而有效改善機體腸道功能。
機體在正常情況下氧化自由基與抗氧化系統(tǒng)處于動態(tài)平衡,當機體處于應(yīng)激狀態(tài)時,系統(tǒng)失衡,進而造成機體氧化損傷,而機體抗氧化酶如谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)等酶活性為機體抗氧化性能評價的參考指標。耿正穎等[17]研究表明,斷奶仔豬日糧中添加5×109CFU/kgCB,飼喂28d后,檢測抗氧化酶指標,與基礎(chǔ)日糧組相比,CB組仔豬血清GSH-Px活性、總抗氧化能力(T-AOC)以及超氧化物歧化酶(SOD)活性均顯著增加(P<0.05)。在改善家禽抗氧化性能方面,袁文華等[18]給1日齡肉鴿日糧中添加1×108CFU/kgCB,飼喂28d后發(fā)現(xiàn)肉鴿肝臟中GSH-Px活性以及過氧化氫酶(CAT)活性均顯著提高,且聯(lián)合添加5×109CFU/kg乳酸菌效果更佳;肉雞中的研究證實[19],其日糧添加3×108CFU/kgCB可顯著提高其血清GSH-Px活性以及T-SOD活性(P<0.05);趙文文等[16]在1日齡康紹興公鴨日糧中添加250mg/kgCB,飼喂28d后檢測抗氧化指標,結(jié)果顯示,CB組康紹興公鴨肝臟和血清中T-AOC、T-SOD以及GSH-Px活性均顯著提高(P<0.05);孫玲玲等[20]在1日齡五龍鵝雛鵝日糧聯(lián)合添加250mg/kgCB+250mg/kg枯草芽孢桿菌,與對照組相比,CB組雛鵝血清T-AOC提高12.33%(P<0.05)、GSH-Px活性提高7.69%(P<0.01)。反芻動物犢牛中的研究證實[14],50日齡荷斯坦公犢牛日糧中添加2×108CFU/kgCB,飼喂20d,檢測抗氧化指標,結(jié)果表明,與基礎(chǔ)日糧組相比,CB組血清GSH含量增加(P=0.06),血清MDA含量則極顯著降低(P<0.01)。綜合本段顯示,CB通過改善機體抗氧化相關(guān)酶活性進而有效改善畜禽機體抗氧化性能。
研究顯示,CB對于畜禽機體免疫因子水平以及免疫器官指數(shù)具有改善作用,進而有效調(diào)控畜禽機體免疫性能。斷奶仔豬中的研究顯示,21日齡斷奶仔豬日糧添加1000mg/kgCB可顯著其免疫球蛋白A(IgA)水平、IgG水平以及脾臟指數(shù)(P<0.05)[9]。劉硯涵等[21]發(fā)現(xiàn),1日齡北京鴨日糧中添加200mg/kgCB可顯著提高其血清IgA、IgG、補體C3和補體C4水平(P<0.05),并顯著降低血清IL-6和IL-7含量(P<0.05)。肉雞中的研究證實,1日齡羅斯308肉雞日糧中添加3×108CFU/kgCB可顯著提高其血清IgA和IgG水平(P<0.05)[19];何菊等[22]研究表明,1日齡Cobb500肉雞日糧中添加100g/t或200g/tCB1制劑,飼喂42d后發(fā)現(xiàn),與基礎(chǔ)日糧組相比,CB組肉雞脾臟指數(shù)、法氏囊指數(shù)、氣管黏膜SIgA水平以及腸道黏膜SIgA水平均顯著增加(P<0.05)。袁文華等[23]研究顯示,1日齡肉鴿日糧添加1×108CFU/kgCB可顯著提高其胸腺指數(shù)、血清IgA和IgG水平(P<0.05)。李文茜等[14]研究了CB對斷奶犢牛免疫性能的影響,在其日糧中添加了1×108CFU/kgCB,飼喂20d,結(jié)果顯示CB組犢牛血清IgA、IgM和IgG水平極顯著增加(P<0.05)。水產(chǎn)動物虹鱒中的研究顯示,在其日糧中添加7.35×109CFU/kgCB可顯著提高其血清殺菌能力、補體C3水平(P<0.05),顯著降低其累積死亡率(P<0.05),對其具有良好的免疫保護率[24]。由此表明,CB通過改善畜禽機體免疫因子水平以及免疫器官指數(shù)而有效改善其免疫性能。
CB作為益生菌制劑,對多種致病菌具有良好的抑制作用。何光勝等[25]研究顯示,將CB分別與大腸桿菌K88以及金黃色葡萄球菌培養(yǎng)24h后,發(fā)現(xiàn)細菌數(shù)量較單獨培養(yǎng)相比下降了兩個數(shù)量級,這提示CB對兩種細菌具有明顯的抑制作用。王倩等[7]研究證實,將CB培養(yǎng)上清液分別與鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌和大腸桿菌三種致病菌作用1h后,對致病菌具有明顯的抑制作用(抑菌力均在78%以上)。謝麗靜等[26]研究表明,CB對大腸桿菌以及沙門氏菌等9種常見致病菌均具有良好的抑制能力。賈麗楠等[27]發(fā)現(xiàn)CB發(fā)酵液對5種常見的腸道致病菌(大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌等)均具有良好的抑菌效果,研究發(fā)現(xiàn)是CB通過發(fā)酵所產(chǎn)生的有機酸和多肽等物質(zhì)而發(fā)揮抑菌作用。由此表明CB具有良好的抑菌能力,對多種致病菌具有抑制作用。
CB對于仔豬的生長性能、免疫性能、腸道功能以及抗氧化功能等方面具有積極意義。楊曉偉[9]研究表明,21日齡斷奶仔豬日糧添加1000mg/kgCB可有效改善其生長性能、免疫性能、腸道功能以及抗氧化性能。王海亮等[28]在斷奶仔豬日糧中添加1×105CFU/gCB,發(fā)現(xiàn)仔豬ADG以及ADFI顯著提高(P<0.05),而料重比顯著降低(P<0.05)。孫健等[29]研究表明,給斷奶仔豬飼喂1×108CFU/kgCB28d,結(jié)果顯示仔豬料重比以及糞便中乳桿菌科微生物的比例均顯著降低(P<0.05)。鄭有秀等[30]研究證實,22~55日齡斷奶仔豬日糧添加250mg/kg或500mg/kgCB,飼喂30d,結(jié)果表明仔豬空腸絨毛高度、腸絨毛高度/隱窩深度、血清IgA和IgG水平均顯著提高(P<0.05),而腹瀉率顯著降低(P<0.05)。耿正穎等[17]發(fā)現(xiàn),斷奶仔豬日糧添加5×108CFU/kgCB可提高血清GSH-Px活性(P<0.05)、T-AOC(P<0.05)以及IL-4含量(P<0.01),降低腫瘤壞死因子-α水平(P<0.05)和IL-6水平(P<0.01),但對仔豬生長性能無顯著影響。CB也可聯(lián)合其他添加劑而用于仔豬,尹會方等[31]研究表明,21日齡斷奶仔豬日糧中聯(lián)合添加4×108CFU/kgCB+4×108CFU/kg地衣芽孢桿菌,飼喂30d,檢測指標,與基礎(chǔ)日糧組相比,聯(lián)合CB組仔豬末重、ADG、血清SOD、血清GSH-Px、T-SOC、IgA以及和IgG水平均顯著提高(P<0.05),而FCR顯著降低(P<0.05)。楊玲等[32]報道,將CB復(fù)合益生菌以100%的比例替代抗生素可顯著降低腹瀉率(P<0.05)、極顯著降低沙門氏菌、產(chǎn)氣莢膜菌以及大腸桿菌數(shù)量(P<0.01),且CB組仔豬生長性能與抗生素組相當,但腹瀉率降低,這提示CB可作為完全替代抗生素的潛在飼料添加劑。綜合本段表明CB對于仔豬生長性能、免疫性能、腸道功能以及抗氧化性能等方面均有積極的飼用價值
CB在生長育肥豬中的應(yīng)用主要集中在改善生長性能、免疫性能等方面。孫華等[33]研究了日糧添加CB對育肥豬前期生長性能的影響,在25kg左右保育豬日糧中添加2.5×108CFU/kgCB對其生長性能具有改善作用,而添加劑量為0.5×108CFU/kgCB時對于飼料轉(zhuǎn)化率具有改善作用。張秀江等[34]研究顯示,生長豬日糧添加0.02%CB可使生長豬ADG提高7.5%、料肉比降低2.2%、經(jīng)濟效益提高0.6%。有研究顯示,4月齡育肥豬日糧添加0.1%酪寶(CB≥5.0×107cfu/g,嗜酸乳桿菌≥5.0×107cfu/g)可顯著降低其背膘厚(P<0.05),對于生長性能、剪切力等肉質(zhì)指標均有改善的趨勢[35]。關(guān)青龍[36]在生長育肥豬(44±2.4kg)日糧中添加了2×104CFU/gCB菌粉,結(jié)果顯示日糧添加CB對生長性能無明顯影響,但CB組糞便乳酸菌數(shù)量、血清IgG、GSH-Px活性、T-SOD活性均顯著增加,而糞便大腸桿菌數(shù)量顯著降低,提示CB對生長育肥豬腸道功能、免疫功能以及抗氧化功能具有改善作用。何婷等[37]研究顯示,杜長大去勢公豬日糧添加100mg/kgCB顯著降低了蛋氨酸的全腸道表觀消化率(P<0.05)、血清中順式-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸含量則顯著增加,且CB與蛋白水平存在明顯互作。
CB在母豬中的應(yīng)用主要在改善其繁殖性能方面。李嚴[38]給妊娠90日齡母豬日糧添加0.2%CB,飼喂至21日斷奶,結(jié)果顯示,與基礎(chǔ)日糧組相比,仔豬平均出生間隔降低(P<0.01)、產(chǎn)程降低(P<0.05)、斷奶窩重以及窩增重有增加趨勢(P=0.07)、母豬分娩當天血清MDA水平以及14日齡仔豬血清MDA水平降低(P<0.05)、21日齡哺乳仔豬T-AOC增加(P<0.01)、母豬常乳IgM水平增加(P<0.05),同時改善了母豬腸道菌群,提示CB通過改善母豬免疫性能、抗氧化性能以及腸道功能而有效改善其繁殖性能。趙雷等[39]研究了CB對母豬繁殖性能的影響,在妊娠長大以及大長母豬日糧中添加CB(試驗前2周添加0.2%CB復(fù)合制劑,2周后添加0.1%CB,飼喂至產(chǎn)后21d),與對照組相比,CB組母豬采食量、產(chǎn)活仔數(shù)、初生體重以及仔豬21日齡體重均顯著增加(P<0.05),而死胎率均顯著降低(P<0.05)。表明CB對于母豬繁殖性能具有改善作用,但相關(guān)應(yīng)用研究報道較少。
綜合全文,在當前無抗養(yǎng)豬背景下,CB具有諸多生物學功能以及優(yōu)良的生物學特性,作為一種潛在的優(yōu)良飼用抗生素可替代物,近年在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用發(fā)揮了積極的飼用價值,在一定程度上對于養(yǎng)豬生產(chǎn)的效益起到了積極作用。但值得指出的是,盡管近年有關(guān)CB的應(yīng)用研究報道較多,但其作用機制尚不完全明確,仍需進一步深入研究,提示今后CB的作用機制將會是一個研究熱點[40];其次有關(guān)CB的應(yīng)用研究主要集中在仔豬中,在生長育肥豬以及母豬中的報道較少,而CB具有改善腸道健康、抗氧化以及調(diào)控脂肪代謝等生物學活性,對于母豬繁殖性能的改善、豬肉品質(zhì)的改善等方面均具有良好的飼用潛力,這提示今后需進一步擴大CB在生長育肥豬以及母豬生產(chǎn)方面應(yīng)用的研究??偠灾珻B作為一種新型微生態(tài)制劑(潛在的飼用抗生素可替代物)在養(yǎng)豬生產(chǎn)中發(fā)揮著積極作用,對于實現(xiàn)綠色高效養(yǎng)豬具有促進意義!