豐艷平，劉小飛

（湖南環(huán)境生物職業(yè)技術(shù)學(xué)院，衡陽(yáng)421005）

大量研究表明，在早期斷奶仔豬的日糧中添加250mg/kg銅可增加仔豬采食量，提高仔豬生長(zhǎng)性能，抑制腸道病原微生物繁殖、降低斷奶仔豬腹瀉率等。但有關(guān)其促生長(zhǎng)機(jī)制需在其消化生理和小腸微生態(tài)方面做進(jìn)一步研究來(lái)闡明。本研究的目的在于探索高銅對(duì)28日齡斷奶仔豬消化酶活性、日糧養(yǎng)分消化率、消化道結(jié)構(gòu)和盲腸微生物數(shù)量的影響，進(jìn)一步探討高銅對(duì)斷奶仔豬的促生長(zhǎng)機(jī)制，為養(yǎng)豬業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)選取28日齡斷奶的杜長(zhǎng)大三元雜交仔豬144頭，公母各半，同一圈中每頭仔豬盡可能來(lái)自不同的母豬，體重基本一致（P＞0.05），臨床檢查健康，隨機(jī)分為2個(gè)組，每個(gè)組設(shè)4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)18頭?；A(chǔ)日糧為參照NRC（2012）的標(biāo)準(zhǔn)需要配制的全價(jià)飼料，其基礎(chǔ)飼糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。I組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧；Ⅱ組仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧+245mg/kg銅(CuSO4·5H2O，均勻混合于飼料中)。試驗(yàn)期28d。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)豬采取群飼，自由采食，自由飲水，飼養(yǎng)管理有專(zhuān)人負(fù)責(zé)，每次以吃飽后料槽略有余料為度。豬舍為混凝土地面，鋼筋圍欄，通風(fēng)良好，保持豬舍清潔衛(wèi)生。其他管理按豬場(chǎng)常規(guī)方法進(jìn)行。于試驗(yàn)結(jié)束前4d開(kāi)始采用內(nèi)源指示劑法連續(xù)收集仔豬糞便，烘干待測(cè)。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每重復(fù)選1頭接近平均體重的仔豬屠宰，迅速收集胃食糜和胰腺，液氮冷凍，待測(cè)酶活性；從十二指腸、空腸和回腸中段取2～3cm長(zhǎng)的組織樣，置于福爾馬林液中固定；在無(wú)菌條件下從盲腸取內(nèi)容物約2g，裝于1.5mL滅菌離心管待測(cè)。

表1基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 測(cè)試指標(biāo)及方法

1.3.1 消化酶活性的測(cè)定

利用上海雅吉生物科技有限公司試劑盒測(cè)定胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰淀粉酶活性。

1.3.2 日糧養(yǎng)分消化率

測(cè)定飼料及糞樣中的干物質(zhì)、粗蛋白、鈣、磷含量，用4mol/L鹽酸不溶灰分內(nèi)源指示劑法測(cè)定，計(jì)算粗蛋白、鈣和磷的消化率。

1.3.3 小腸黏膜形態(tài)

將取樣的十二指腸、空腸和回腸樣品經(jīng)脫水、浸蠟、包埋、切片等處理，再經(jīng)蘇木精-伊紅染色，然后在光學(xué)顯微鏡下觀察，從組織切片上選取16個(gè)典型視野測(cè)量小腸絨毛高度和隱窩深度的比值(VCR)，取其平均值作為測(cè)定數(shù)據(jù)。

1.3.4 盲腸微生物區(qū)系

采用平板涂布法對(duì)取樣的盲腸內(nèi)容物進(jìn)行大腸桿菌、乳酸桿菌及雙歧桿菌的計(jì)數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS統(tǒng)計(jì)軟件中的ANOVA過(guò)程進(jìn)行方差分析，多重比較采用Duncan法。以P＞0.05為差異不顯著，P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 高銅對(duì)消化酶活性的影響

高銅對(duì)消化酶活性的影響見(jiàn)表2。與對(duì)照組相比，添加250mg/kg的高銅均能改善仔豬胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰淀粉酶活性。其中胃蛋白酶活性提高了19.37%，差異顯著（P<0.05）；胰蛋白酶活性提高了2.67%，但差異不顯著（P＞0.05）；胰淀粉酶活性活性提高了7.88%，差異不顯著（P＞0.05）。

表2高銅對(duì)消化酶活性的影響

2.2 高銅對(duì)日糧養(yǎng)分消化率的影響

高銅對(duì)日糧養(yǎng)分消化率的影響見(jiàn)表3。與對(duì)照組相比，添加250mg/kg的高銅能改善日糧養(yǎng)分消化率，表現(xiàn)在：試驗(yàn)組日糧中粗蛋白消化率提高了3.23%，但差異不顯著（P＞0.05）；日糧中鈣消化率提高了10.24%，差異極顯著（P<0.01）；日糧中磷消化率提高了7.04%，差異顯著（P<0.05）。

表3高銅對(duì)日糧養(yǎng)分消化率的影響

2.3 高銅對(duì)腸黏膜形態(tài)的影響

高銅對(duì)腸黏膜形態(tài)的影響見(jiàn)表4。與對(duì)照組相比，添加250mg/kg的高銅均能不同程度改善回腸、空腸和十二指腸絨毛高度，并降低了這三段腸道的隱窩深度；均增加了回腸和空腸絨毛高度與隱窩深度之比（P<0.05）。

2.4 高銅對(duì)盲腸微生物數(shù)量的影響

高銅對(duì)盲腸微生物數(shù)量的影響見(jiàn)表5。與對(duì)照組相比，添加250mg/kg高銅的試驗(yàn)組盲腸大腸桿菌的數(shù)量降低了3.03%、雙歧桿菌的數(shù)量降低了3.50%、乳酸桿菌的數(shù)量降低了1.47%，但差異均不顯著（P＞0.05）。

3 分析與討論

研究和生產(chǎn)實(shí)踐均已證實(shí)，在斷奶仔豬日糧中添加250mg/kg高劑量的銅能促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)。這與高銅日糧能提高仔豬采食量有關(guān)，也與高銅日糧能改善斷奶仔豬消化生理和盲腸微生物數(shù)量有關(guān)，主要體現(xiàn)在以下幾方面：

表4高銅對(duì)腸黏膜形態(tài)的影響

表5高銅對(duì)盲腸微生物數(shù)量的影響 單位：CFU/g

3.1本研究通過(guò)對(duì)食糜消化酶活性的分析發(fā)現(xiàn)，高銅能提高胰蛋白酶和胰淀粉酶活性，并能顯著提高胃蛋白酶活性，從而提高了仔豬的消化能力和對(duì)飼料的利用率，這可能是在飼料中添加高銅能促進(jìn)生長(zhǎng)的原因之一。

3.2本研究表明，在斷奶仔豬日糧中添加高銅有提高日糧粗蛋白消化率、極顯著提高鈣消化率和顯著提高磷消化率的效應(yīng)。該結(jié)果與前人的研究結(jié)果基本一致。

3.3高銅均能不同程度改善仔豬消化道的組織結(jié)構(gòu)，提高了回腸、空腸和十二指腸絨毛高度和降低了這三段腸道的隱窩深度，顯著增加了回腸和空腸絨毛高度與隱窩深度之比。

3.4高銅能降低斷奶仔豬腹瀉率常被歸功于其腸道的抗微生物效應(yīng)，但本研究表明，高銅日糧雖能降低盲腸大腸桿菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量，但差異均不顯著。

4 結(jié)論

消化酶活性和消化道組織結(jié)構(gòu)的完整性是影響仔豬增重及提高日糧養(yǎng)分消化率的重要因素。本研究高銅對(duì)消化酶活性和消化道組織結(jié)構(gòu)的影響結(jié)果與對(duì)生產(chǎn)性能影響結(jié)果一致，高銅促生長(zhǎng)作用是其對(duì)消化生理和盲腸微生物數(shù)量等綜合作用的結(jié)果。但高銅促生長(zhǎng)的原因還有待今后進(jìn)一步研究。

大量研究也表明，長(zhǎng)期使用高銅日糧可對(duì)豬的肝臟等器官造成實(shí)質(zhì)性損害；而且當(dāng)日糧中銅含量增加到250mg/kg時(shí)，其排泄量增加了7.9倍，將引起土壤的銅污染，導(dǎo)致土壤的肥力降低；此外，土壤的銅污染將間接引起植物中銅的含量升高，而植物的變化又會(huì)影響整個(gè)食物鏈。因此，對(duì)高銅的應(yīng)用應(yīng)揚(yáng)長(zhǎng)避短、合理利用。大量研究也表明，豬的體重不同，對(duì)添加高銅的反應(yīng)不一，體重越小的豬促生長(zhǎng)效果越顯著，隨著體重的增加效果明顯下降。因此，生產(chǎn)中可考慮在早期斷奶仔豬日糧中短期應(yīng)用高銅日糧，既可促生長(zhǎng)提高經(jīng)濟(jì)效益，又不會(huì)對(duì)豬內(nèi)臟器官造成實(shí)質(zhì)性損害，對(duì)環(huán)境的污染也不嚴(yán)重。