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        網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量對輕型地中海貧血患者妊娠期鐵缺乏狀態(tài)的應(yīng)用評價

        2020-03-03 16:44:00馬永能楊渝偉曾覃平萬紅芳
        檢驗(yàn)醫(yī)學(xué) 2020年1期
        關(guān)鍵詞:缺鐵血細(xì)胞結(jié)果顯示

        彭 碧, 馬永能, 楊渝偉, 曾覃平, 蔣 偉, 萬紅芳

        (1.綿陽市第三人民醫(yī)院 四川省精神衛(wèi)生中心檢驗(yàn)科,四川 綿陽 621000;2.綿陽市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科,四川 綿陽 621000;3.綿陽市第三人民醫(yī)院 四川省精神衛(wèi)生中心產(chǎn)科,四川 綿陽 621000)

        地中海貧血(簡稱地貧)是我國南方各省市常見的遺傳性疾病之一,目前尚無有效的治療方法。成年地貧患者絕大多數(shù)為輕型地貧,臨床癥狀輕微或無癥狀,若女性患者處于妊娠期可加重貧血的發(fā)生。地貧患者一般存在鐵過載現(xiàn)象,但地貧孕婦可發(fā)生缺鐵現(xiàn)象[1]。孕期缺鐵可增加妊娠高血壓、胎兒生長受限、早產(chǎn)及產(chǎn)褥感染等的發(fā)生率,嚴(yán)重者還可引起新生兒的缺鐵性貧血(iron deficiency anemia,IDA),導(dǎo)致智力發(fā)育障礙及情感認(rèn)知異常等。因此,地貧孕婦需要及時補(bǔ)鐵,以獲得良好的治療效果和妊娠結(jié)局[2-3]。近年來,網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量(reticulocyte hemoglobin content,Ret-He)作為鐵缺乏早期診斷及療效評估的新指標(biāo)[4-5]受到了廣泛關(guān)注。Ret-He可為孕婦提供更有價值的缺鐵信息[6],但關(guān)于其在地貧患者妊娠期鐵缺乏方面的研究較少。本研究擬探討Ret-He、血清鐵蛋白(serum ferritin,SF)及血細(xì)胞參數(shù)在判斷輕型地貧孕婦鐵缺乏狀態(tài)中的價值。

        1 材料和方法

        1.1 研究對象

        選取2017年1月—2018年4月綿陽市第三人民醫(yī)院產(chǎn)科門診孕12~32周的孕婦311例。其中鐵缺乏孕婦101例(ID組),年齡(28.1±4.7)歲;IDA孕婦55例(IDA組),年齡(28.6±5.8)歲;輕型地貧孕婦49例(輕型地貧孕婦合并缺鐵者24例、未合并缺鐵者25例)(輕型地貧組),年齡(27.9±4.9)歲。另選取同期綿陽市第三人民醫(yī)院健康孕婦106名(健康對照組),年齡(28.3±5.0)歲。所有對象3個月內(nèi)未接受過鐵劑治療,并排除基礎(chǔ)性疾病、腫瘤或其他類型血液病,且均行地貧基因檢測明確診斷。4個組之間年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=0.140,P=0.937)。

        1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

        妊娠期IDA符合中華醫(yī)學(xué)會圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)分會《妊娠期鐵缺乏和缺鐵性貧血診治指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]。妊娠期鐵缺乏診斷標(biāo)準(zhǔn):SF<20 μg/L,血紅蛋白(hemoglobin,Hb)≥110 g/L;妊娠期IDA診斷標(biāo)準(zhǔn):SF<20 μg/L,Hb<110 g/L。輕型地貧診斷標(biāo)準(zhǔn):經(jīng)基因檢測確定有1個或2個α珠蛋白基因缺失或缺陷(包括靜止型和輕型α-地貧)或1個β珠蛋白基因缺失或缺陷(輕型β-地貧)。

        1.3 方法

        1.3.1 全血細(xì)胞計數(shù)及Ret-He測定 采用乙二胺四乙酸抗凝真空采血管采集所有對象清晨空腹靜脈血2 mL,立即顛倒混勻,2 h內(nèi)采用XN-1000全自動血液分析儀(日本Sysmex公司)及配套試劑檢測紅細(xì)胞(red blood cell,RBC)及網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticulocyte,Ret)相關(guān)參數(shù)。RBC參數(shù)包括RBC計數(shù)、Hb、平均紅細(xì)胞體積(mean corpuscular volume,MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)。Ret參數(shù)包括網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對值(reticulocyte absolute value,Ret#)及Ret-He。

        1.3.2 SF測定 采集所有對象空腹靜脈血3 mL,靜置約30 min,1 850×g離心,分離血清,采用UniCel DxI800全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(美國貝克曼庫爾特公司)及其配套試劑測定SF。

        1.3.3 地貧基因診斷 采用跨越斷裂點(diǎn)-聚合酶鏈反應(yīng)(gap-polymerase chain reaction,Gap-PCR)檢測3種常見的缺失型α-地貧基因突變類型;采用反向雜交-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse dot blotpolymerase chain reaction,RDB-PCR)檢測β-地貧17種常見突變類型。地貧基因診斷試劑盒購于潮州凱普生物化學(xué)有限公司,檢測儀器為ETC 811型基因擴(kuò)增儀(蘇州東順興業(yè)科學(xué)儀器公司)。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

        采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。呈正態(tài)分布的計量資料采用s表示,多組間比較采用單因素方差分析,2個組之間比較采用LSD-t檢驗(yàn)。各項(xiàng)指標(biāo)與不同疾病的關(guān)聯(lián)程度采用多項(xiàng)Logistic回歸分析,與患者貧血程度、缺鐵狀態(tài)的相關(guān)性采用多元線性回歸的偏相關(guān)分析,判斷輕型地貧孕婦鐵缺乏的價值采用受試者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲線分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 鐵缺乏組、IDA組、輕型地貧組及健康對照組各項(xiàng)指標(biāo)的比較

        鐵缺乏組、IDA組、輕型地貧組及健康對照組之間各項(xiàng)指標(biāo)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。2個組間比較,除RBC和MCHC在各組兩兩之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)外,其余各指標(biāo)差異表現(xiàn)不盡一致。見表1。

        表1 不同孕婦組SF和主要血細(xì)胞參數(shù)的差異

        2.2 SF和血細(xì)胞參數(shù)與疾病間的關(guān)系

        采用多項(xiàng)Logistic回歸分析SF和各項(xiàng)血細(xì)胞參數(shù)與各疾病的關(guān)聯(lián)程度,剔除引起明顯多重共線性或回歸系數(shù)經(jīng)Wald χ2檢驗(yàn)P>0.10的指標(biāo)。結(jié)果顯示,SF[比值比(odds ratio,OR)=0.563,P<0.001]與鐵缺乏的關(guān)聯(lián)密切;SF(OR=0.688,P=0.001)和Hb(OR=0.441,P<0.001)與IDA的關(guān)聯(lián)密切;Ret-He(OR=0.243,P<0.001)和Hb(OR=0.515,P<0.001)與輕型地貧的關(guān)聯(lián)密切。見表2。

        表2 SF和血細(xì)胞參數(shù)與各疾病組的關(guān)系

        2.3 ID組、IDA組和輕型地貧組SF、Hb和Ret-He與貧血程度、缺鐵狀態(tài)的關(guān)系

        將貧血程度分為正常(Hb≥110 g/L)、輕度(100≤Hb<110 g/L)和中度(70≤Hb<100 g/L),以SF<20 μg/L為缺鐵狀態(tài)。偏相關(guān)分析結(jié)果顯示,IDA組和輕型地貧組Hb與貧血程度相關(guān)[偏相關(guān)系數(shù)(rp)=-0.780,P<0.001],SF與缺鐵狀態(tài)相關(guān)(rp值分別為-0.640、-0.330,P值分別為<0.001、0.001);輕型地貧組Ret-He與貧血程度相關(guān)(rp=-0.516,P=0.002);鐵缺乏組、IDA組和輕型地貧組Ret-He與缺鐵狀態(tài)相關(guān)(rp值分別為-0.269、-0.289、-0.199,P值分別為0.025、0.017、0.036)。

        表3 鐵缺乏組、IDA組和輕型地貧組Hb、SF及Ret-He與貧血程度、缺鐵狀態(tài)的相關(guān)性

        2.4 Ret-He對不同貧血孕婦缺鐵狀態(tài)的診斷性能

        ROC曲線分析結(jié)果顯示,Ret-He判斷鐵缺乏孕婦、IDA孕婦及輕型地貧孕婦缺鐵狀態(tài)的臨界值分別為<27.6 pg、<27.2 pg、<23.3 pg,此時的特異性分別為85.7%、87.2%86.2%,敏感性分別為54.0%、62.2%、88.2%。見圖1和表4。

        圖1 Ret-He判斷鐵缺乏孕婦、IDA孕婦及輕型地貧孕婦缺鐵狀態(tài)的ROC曲線

        表4 Ret-He對不同貧血孕婦組缺鐵狀態(tài)的診斷性能

        3 討論

        地貧是珠蛋白基因缺失或突變所致的單基因遺傳性疾病。因慢性溶血、鐵利用障礙及腸道鐵吸收增加,地貧患者往往處于鐵過載狀態(tài),不容易缺鐵。女性輕型地貧患者一般能順利妊娠和分娩,但由于妊娠期胎兒生長發(fā)育對鐵需求量增加,可發(fā)生缺鐵[1-3],使地貧患者在妊娠期受到病理性和生理性因素的雙重影響,導(dǎo)致貧血進(jìn)一步加重。因此,早期診斷地貧孕婦有無鐵缺乏,對保證胎兒的正常發(fā)育與生長,減少并改善不良妊娠結(jié)局具有重要意義。

        臨床上對于鐵缺乏的篩查主要依賴常規(guī)血細(xì)胞參數(shù)和鐵代謝指標(biāo)。骨髓鐵染色雖然是鐵缺乏的金標(biāo)準(zhǔn),但屬創(chuàng)傷性檢查,不宜作為妊娠期的常規(guī)篩查手段;傳統(tǒng)的血細(xì)胞參數(shù)如MCV、MCH,在鐵缺乏早期未表現(xiàn)貧血或剛發(fā)生貧血時變化不明顯[8]。有研究結(jié)果表明,孕婦的MCV和MCH會隨孕周的增加而先升后降,導(dǎo)致其對妊娠期鐵缺乏或IDA的檢測敏感性下降[9]。本研究結(jié)果顯示,僅輕型地貧組MCV和MCH明顯降低,鐵缺乏組和IDA組與健康對照組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),與文獻(xiàn)報道一致[10]。SF檢測是臨床上廣泛用于替代骨髓鐵染色診斷鐵缺乏的“金標(biāo)準(zhǔn)”,目前中華醫(yī)學(xué)會圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)分會《妊娠期鐵缺乏和缺鐵性貧血診治指南》[7]推薦將SF<20 μg/L作為妊娠期鐵缺乏的判斷標(biāo)準(zhǔn)。然而,SF極易受炎癥影響,特別是孕早期、孕晚期,由于炎性因子生理性升高,使孕婦SF水平升高,可能導(dǎo)致孕婦體內(nèi)鐵儲備被高估。Ret-He是通過激光流式細(xì)胞技術(shù)測定單個Ret所獲得的新參數(shù),與外周血Hb濃度具有很好的相關(guān)性,可直接反映新生RBC中Hb的合成水平[11],且不受炎癥、分娩等急性時相反應(yīng)的影響。因此,Ret-He較SF更穩(wěn)定,對鐵缺乏的診斷可能更加早期和敏感[5]。

        本研究結(jié)果顯示,在眾多指標(biāo)中僅Hb、Ret-He和/或SF與鐵缺乏、IDA和輕型地貧孕婦密切相關(guān)。在IDA孕婦和輕型地貧孕婦中,SF與缺鐵狀態(tài)相關(guān)。在鐵缺乏、IDA和輕型地貧孕婦中,Ret-He與缺鐵狀態(tài)相關(guān)。因此,對于鐵缺乏孕婦而言,僅Ret-He與缺鐵狀態(tài)相關(guān),且ROC曲線分析顯示其對鐵缺乏孕婦缺鐵狀態(tài)有診斷價值,與國內(nèi)學(xué)者提出的“Ret-He對妊娠期婦女早期缺鐵診斷較優(yōu)”的報道基本一致[12],但敏感性和特異性有較大差異。究其原因,陳哲周等[12]根據(jù)Hb和SF水平將孕婦劃分為ID組和IDA組,并未排除地貧非貧血孕婦,因此不能排除抽樣誤差導(dǎo)致的差異。

        由于Ret-He是Ret體積與Ret Hb濃度的乘積,細(xì)胞體積的減低可導(dǎo)致Ret-He降低。本研究結(jié)果顯示,輕型地貧孕婦的Ret-He明顯低于鐵缺乏和IDA孕婦(P<0.01)。究其原因,由于一部分孕婦合并鐵缺乏,可能加重了MCV的減小,從而導(dǎo)致Ret-He降低更加明顯。眾多研究結(jié)果顯示,在不同人群中,Ret-He診斷鐵缺乏的臨界值和診斷效率不盡相同[8,13-14]。本研究結(jié)果顯示,相對于鐵缺乏或IDA孕婦,Ret-He對輕型地貧孕婦缺鐵狀態(tài)的診斷效能更加突出。在不同組別的孕婦中,Ret-He判斷缺鐵狀態(tài)的臨界值各不相同(鐵缺乏組<27.6 pg,IDA組<27.2 pg,輕型地貧組<23.3 pg),但對3個組缺鐵狀態(tài)的診斷特異性相當(dāng)(鐵缺乏組85.7%,IDA組87.2%,輕型地貧組86.2%),而診斷敏感性輕型地貧組為88.2%,高于鐵缺乏組(43.7%)和IDA組(62.2%)。由于Ret-He對輕型地貧孕婦鐵缺乏的判斷臨界值遠(yuǎn)低于IDA孕婦,因此產(chǎn)科醫(yī)生對不同孕婦群體鐵缺乏還需進(jìn)行甄別。

        由于無法采用骨髓鐵染色這一“金標(biāo)準(zhǔn)”來判斷孕婦鐵缺乏,因此孕婦缺鐵狀態(tài)以中華醫(yī)學(xué)會圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)分會《妊娠期鐵缺乏和缺鐵性貧血診治指南》[7]推薦的SF<20 μg/L來判斷,這比普通人群診斷IDA的診斷標(biāo)準(zhǔn)(SF<12 μg/L)高[15],可能會高估孕婦真實(shí)的缺鐵狀態(tài),導(dǎo)致Ret-He的診斷效能受一定影響。但就本研究結(jié)果來看,Ret-He不僅可用于輕型地貧與IDA或鐵缺乏孕婦的鑒別診斷,而且對輕型地貧孕婦鐵缺乏具有很好的篩查價值。

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