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        阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c叉尾的毒性試驗

        2020-03-03 08:39:16盧香玲,屈新家
        科學(xué)養(yǎng)魚 2020年1期

        阿苯達(dá)唑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中主要用于防治淡水魚類體表寄生的指環(huán)蟲、三代蟲、黏孢子蟲及海水魚類寄生的雙鱗盤吸蟲、貝尼登蟲等。甲苯咪唑主要用于治療魚類指環(huán)蟲、三代蟲等單殖類吸蟲。從防治對象不難看出它們均屬于抗蠕蟲藥物,但甲苯咪唑在說明書中明確規(guī)定了斑點叉尾、大口鲇禁用,而阿苯達(dá)唑卻未標(biāo)注對斑點叉尾、大口鲇禁用的相關(guān)內(nèi)容。本文就阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c叉尾是否敏感進(jìn)行深入的研究與試驗,試驗過程分為實驗室小試與池塘網(wǎng)箱試驗。

        一、實驗室材料與方法

        1.試驗材料

        (1)試驗器材:玻璃水族缸共3個,大小相同,規(guī)格1.2米×0.6米×0.5米,編號分別為BHL-001、BHL-002、BHL-003,分別用于阿苯達(dá)唑溶液的藥敏試驗;溫度計、電子天平、增氧機、pH試紙、測氧瓶、滴定管、移液管、錐形瓶、吸耳球、燒杯、玻璃棒等。

        (2)試驗魚種:由山西黃河魚病研究所生態(tài)養(yǎng)殖場提供,經(jīng)本所技術(shù)員鑒定無病無傷、規(guī)格整齊的健康斑點叉尾魚種,體長20~23厘米,平均體長21.5厘米,平均體重220克/尾,共30尾。

        (3)藥品來源:阿苯達(dá)唑(98%原粉)由山西乾泰動物藥業(yè)有限公司提供,冰醋酸購置于運城市新興化工試劑商店。

        (4)阿苯達(dá)唑溶液配制:用電子天平稱取10.2克阿苯達(dá)唑,溶解于89.8克的冰醋酸中,并用玻璃棒不斷攪拌,待粉末狀藥劑完全溶解后制成規(guī)格100∶10的阿苯達(dá)唑溶液。

        2.藥敏試驗前準(zhǔn)備工作

        (1)水族缸注水:分別在BHL-001、BHL-002、BHL-003水族缸內(nèi)注入經(jīng)曝氣后的自來水240升,打開增氧泵。

        (2)投放魚種前的水質(zhì)監(jiān)測:水溫28~32℃、溶氧5.0毫克/升、pH≥7.5,3個水族缸內(nèi)水的理化指標(biāo)基本相同,符合養(yǎng)魚標(biāo)準(zhǔn)。

        (3)投放魚種:5小時后分別在水族缸中放入備好的斑點叉尾魚種各10尾,暫養(yǎng)3日,暫養(yǎng)期間進(jìn)行日常管理但不投喂,并以充分曝氣的自來水為水源。

        3.藥敏預(yù)備試驗

        (1)試驗場所:于2019年7月在山西黃河魚病研究所實驗室進(jìn)行,目檢3個水族缸內(nèi)魚種基本正常,未見異?,F(xiàn)象。

        (2)試驗藥物濃度:阿苯達(dá)唑溶液按0.05、0.1、0.15毫克/升進(jìn)行藥敏試驗。藥物稀釋前按240升水計算出每個水族缸內(nèi)的準(zhǔn)確劑量。

        (3)藥物稀釋與備用:用吸管吸取阿苯達(dá)唑溶液12、24、36毫克分別放入3個大小同等的燒杯內(nèi),加入200倍的水充分將藥物稀釋,準(zhǔn)備使用。

        4.藥敏正式試驗

        (1)藥物施用:用備好的藥液均勻灑入3個水族缸內(nèi),其中阿苯達(dá)唑溶液施入BHL-001、BHL-002、BHL-003,藥液劑量分別為12、24、36毫克。

        (2)藥敏試期管理:試驗開始后,前12小時每2小時觀察1次,記錄試驗魚的表現(xiàn)和中毒癥狀及水溫、溶氧、pH等指標(biāo),并于12、24、48、72、96小時分別記錄試驗魚的死亡數(shù),試驗期間不投餌,及時清除排泄物和死亡個體。在藥敏試驗期間嚴(yán)格保證試驗水的溶解氧,防止試驗魚缺氧死亡。每隔6小時測定溶氧1次,需保證水族缸內(nèi)溶氧≥5毫克/升,避免缺氧死亡。

        (3)試驗魚死亡的判斷:試驗魚在中毒后鰓蓋停止活動,用玻璃棒或小鑷子輕輕刺激試驗魚尾柄部位,5分鐘內(nèi)仍無反應(yīng)即可確定為個體死亡。

        5.毒性試驗結(jié)果分析

        表1 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c叉尾的毒性試驗

        表1 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c叉尾的毒性試驗

        注:試驗魚數(shù)均為10尾。

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        6.實驗室小試小結(jié)

        二、池塘現(xiàn)場試驗

        1.試驗前準(zhǔn)備

        (1)試驗場所:陜西省合陽縣黃河灘涂兩個粗養(yǎng)四大家魚池塘,塘內(nèi)有鰱魚、鯉魚、草魚及鳙魚,池塘分別為5畝水面,水深1米,池塘代號為HG-001、HG-002。

        (2)池塘水源:水源為地下井水,池水pH≥7.5、溶氧≥5.0毫克/升、水溫32℃,鏡檢以綠藻為主,少量隱藻,未檢到有害物質(zhì),兩個池塘的水質(zhì)指標(biāo)基本相同。

        (3)網(wǎng)箱設(shè)置:分別在兩個池塘中央各放置1個5米×5米×1米的網(wǎng)箱。

        2.正式試驗

        (1)藥物濃度與試驗劑量:試用藥物為10%阿苯達(dá)唑溶液,兩個池塘的用藥劑量分別為0.1、0.15毫克/升,即HG-001用333.5克,HG-002用500.25克。

        (2)藥物施用:將備好的藥液加入適量的池水充分溶解,均勻全池潑灑,打開增氧機兩小時,以確保藥物的均勻度。

        (3)死亡鑒定:魚兒停止活動、身體僵硬、漂浮水面為死亡依據(jù),并將死魚及時撈出。

        3.池塘網(wǎng)箱試驗結(jié)果

        試驗塘HG-001、HG-002分別從12時開始施入不同劑量的阿苯達(dá)唑溶液,18時觀察兩個試驗塘吃食均正常,未發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象。第2天6時兩個試驗塘吃食良好,也未發(fā)現(xiàn)其他不良癥狀,12時觀察HG-001吃食正常,HG-002吃食緩慢,吃食數(shù)量減少,未有不正?,F(xiàn)象;18時HG-001吃食良好,HG-002完全停食,有個別魚出現(xiàn)上下竄動和側(cè)游不良癥狀。第3天6時HG-001吃食良好,HG-002死亡18尾,飄出水面,還有部分魚上下竄動和側(cè)游等不良癥狀;12時HG-001吃食緩慢,吃食數(shù)量減少,無其他異常行為,HG-002死亡7尾;18時,HG-001完全停食,有部分魚狂游,但未見死亡,HG-002撈出死魚15尾。第4天6時HG-001撈出死魚13尾,HG-002撈出死魚17尾;12時HG-001撈出死魚9尾,HG-002撈出死魚9尾;18時,HG-001撈出死魚8尾,HG-002撈出死魚14尾。第5天6時HG-001撈出死魚11尾,HG-002撈出死魚20尾,全部死亡,死亡率100%;12時HG-001撈出死魚6尾;18時,HG-001撈出死魚8尾。第6天6時HG-001撈出死魚24尾,12時HG-001撈出死魚9尾,18時HG-001撈出死魚12尾,全部死亡,死亡率100%。不同劑量阿苯達(dá)唑溶液對斑點叉尾的致死率詳見表2。

        表2 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c叉尾池塘網(wǎng)箱試驗記錄

        表2 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c叉尾池塘網(wǎng)箱試驗記錄

        注:吃食正常用“++”表示,吃食減少用“+”表示,停食用“-”表示,活動正常用“√”表示,活動異常用“×”表示。

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        4.池塘試驗小結(jié)

        三、總結(jié)

        無論實驗室小試還是池塘網(wǎng)箱試驗,都證實了阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c叉尾有毒。我們根據(jù)藥物作用的四大過程(吸收、分布、代謝、排泄),可判斷阿苯達(dá)唑利用內(nèi)服或外潑的方法會對斑點叉尾產(chǎn)生相同的毒性。但國標(biāo)水產(chǎn)藥典產(chǎn)品中6%的阿苯達(dá)唑粉在使用說明書中未注明對斑點叉尾禁用或慎用的相關(guān)信息,因此提醒大家阿苯噠唑在斑點叉尾養(yǎng)殖中應(yīng)慎用或禁用。

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