林 花,楊 清

(1.吉林大學第一醫(yī)院 檢驗科，吉林 長春130021;2.吉林大學第一醫(yī)院二部 輸血科，吉林 長春130031)

孤獨癥又稱自閉癥或孤獨性障礙(autistic disorder，AD)，以男性多見，起病于嬰幼兒期，主要表現(xiàn)為不同程度的言語發(fā)育障礙、人際交往障礙、興趣狹窄和行為方式刻板等。其發(fā)病機制不清，尚無有效的治療方法，預后較差。隨著患病率的升高，CA逐漸成為兒童精神病學、特殊教育學等領域備受關注的焦點。近年報道其發(fā)病率有增高的趨勢，據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院精神健康研究所的數(shù)據(jù)，美國CA患病率在1‰-2‰。

國內(nèi)未見CA的全國流調(diào)數(shù)據(jù)，僅部分地區(qū)作了相關報道， 2010年報道，廣東CA患病率為0.67%，深圳地區(qū)高達1.32%[1]。近年來國內(nèi)外學者對其遺傳、神經(jīng)心理、腦器質(zhì)性改變、孕產(chǎn)期疾病、生化等單因素或多個因素進行了大量研究[2]。當前認為CA是一種多生物因素引起的大腦廣泛發(fā)育障礙性疾病。目前關于CA的實驗方面的報道較少，本文旨在通過檢測CA患者血清α-SYN、BDNF和Glu含量變化，探討它們在CA發(fā)病機制中的作用。

1 資料與方法

1.1 研究對象選擇2016年9月至2018年3月我院兒童神經(jīng)康復中心和門診經(jīng)美國WPS培訓的發(fā)育行為兒科醫(yī)生診斷的CA患者45例，其中男性38例，女性7例，平均年齡(3.68±1.35)歲。診斷符合《美國精神障礙診斷與統(tǒng)計手冊》第五版(DSM-5)的診斷標準[3]。對照組20例為本院同期健康體檢兒童，男性18例，女性3例，平均年齡(3.65±1.28)歲。所有患兒6個月內(nèi)未進行任何藥物治療。

1.2 方法所有研究對象均為清晨空腹采取靜脈血3 ml，離心后取上清液，標本放置-80℃保存待測?；純罕O(jiān)護人簽署知情同意。采用ELISA法和日立835-50型氨基酸自動分析儀檢測45例CA患者和20例健康對照組血清α-SYN、BDNF和Glu含量。試劑由美國Invitrogengon公司和上海斯信生物科技有限公司提供，嚴格按說明書操作。

2 結果

CA組BDNF和Glu水平明顯高于對照組(P<0.01)，α-SYN水平與對照組比較無明顯差異(P>0.05)，見表1。

表1 45例CA患者和20例對照組血清α-SYN、BDNF和Glu水平

注：*與對照組比較P<0.01

3 討論

1943年Kanne首次報告自閉癥，這組11例患者除強迫性興趣和行為刻板外，還表現(xiàn)為群居相互接觸和溝通的嚴重缺陷。雖然CA的病因還不完全清楚，但目前的研究表明，某些危險因素可能同CA的發(fā)病相關。近年來大量臨床資料報道表明，CA患者存在氧化應激的失調(diào)，如氧化應激生物標記物分泌增加，體內(nèi)內(nèi)源性抗氧化能力減少，能量代謝失調(diào)，線粒體功能障礙[5]。據(jù)報道與CA患者年齡相匹配的正常對照組相比，CA組的紅細胞硫巴比酸氏反應較對照組高2倍，血清類脂過氧化物和尿異前列腺素顯著增高，其大腦皮質(zhì)區(qū)域有較多脂褐素沉積，血清內(nèi)源性和外源性抗氧化能力降低，有機毒素和重金屬含量較高[6]。 α-SYN是一種存在于神經(jīng)元細胞質(zhì)的突觸前蛋白，分布于大腦皮質(zhì)、基底神經(jīng)節(jié)和小腦等處，可能與神經(jīng)元發(fā)育、形成、突觸功能維護及抗凋亡作用有關。但是以氧化磷酸化、硝化及泛素化形式存在的α-SYN積聚體過度沉積，可導致泛素-蛋白酶系統(tǒng)(UPS)降解障礙，對神經(jīng)細胞產(chǎn)生毒性，同時UPS功能障礙可引起細胞內(nèi)蛋白降解障礙、聚集，導致胞漿內(nèi)Lewy body小體形成及多巴胺能神經(jīng)元變性壞死及凋亡[7,8]。本實驗結果顯示，CA患者血清α-SYN水平與對照組比較無顯著差異，說明CA患者可能不存在氧化應激或其他因素造成的α-SYN過度沉積以及由此而引發(fā)的UPS功能障礙，提示α-SYN可能與CA的發(fā)生機制沒有相關性。Glu是中樞神經(jīng)內(nèi)最重要的興奮性遞質(zhì)，Glu及其受體參與了突觸的發(fā)生、延伸及突觸可塑性作為基礎的學習、記憶等過程的諸多方面。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，Glu能神經(jīng)遞質(zhì)異常，可引起神經(jīng)毒性，在許多神經(jīng)、精神疾病的產(chǎn)生或發(fā)展中發(fā)揮重要病理作用[9]。研究證實，Glu的神經(jīng)的性作用不僅與Glu的濃度有關，而且與其作用的時間有關，Glu具有自身播散性，可進一步觸發(fā)神經(jīng)元的Glu釋放，也可通過其受體而發(fā)揮神經(jīng)毒性作用[10]。研究證實，CA是發(fā)育過程中興奮性與抑制性神經(jīng)遞質(zhì)表達失衡和興奮性與抑制性突觸失衡所致。γ-氨基丁酸(GABA)作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)中重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，CA患者合成GABA 的Glu脫羧酶水平下降，其Glu能神經(jīng)遞質(zhì)水平升高[11]。BDNF主要是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)表達，其中海馬和皮質(zhì)的含量最高神經(jīng)營養(yǎng)因子。它具有增加突觸可塑性，進而影響長時程增強，是學習過程和記憶形成過程的基礎。以及促進神經(jīng)發(fā)生尤其對海馬的神經(jīng)的發(fā)育分化與生長再生具有維持和促進作用[12]。郭淑娟等[13]通過孤獨癥模型進行研究，結果顯示仔鼠顳葉皮層的BDNF表達可能參與AD的發(fā)病過程，并提出BDNF高表達可能是一種保護反應。本實驗結果顯示，CA組BDNF和Glu水平明顯高于對照組。CA病人可能存在Glu表達失衡，高水平的Glu對神經(jīng)具有毒性作用，進而帶來持續(xù)的神經(jīng)損害，提示CA可能是一種高Glu疾病。增高BDNF可能是一種反應性神經(jīng)保護作用，但也可能受某些因素的影響。綜上所述，CA患者α-SYN水平與對照組無明顯差異，可能與CA疾病無關聯(lián)性，而BDNF和Glu與CA疾病密切相關，可能在CA的發(fā)生、發(fā)展機制中起重要作用。