陳 欣 羅 娌 蘭景超 黃文俊 劉 禮廖禮慧 王小蘭 李 碧 楊 智 王成東

(成都大熊貓繁育研究基地，成都，610081)

大熊貓(Ailuropodamelanoleuca)在我國(guó)多年大力保護(hù)和研究的努力下，目前圈養(yǎng)種群數(shù)量已經(jīng)突破500只。隨著產(chǎn)仔率的穩(wěn)步提高，大熊貓產(chǎn)褥期護(hù)理的重要性日漸凸顯，陰道炎是大熊貓產(chǎn)褥期易發(fā)疾病，但霉菌性陰道炎尚屬首次[1]。

霉菌性陰道炎(vulvovaginal candidiasis，VVC)的病原菌是以白色假絲酵母菌為主的酵母菌[2]。白色假絲酵母菌是一種條件致病菌，平時(shí)寄居在陰道內(nèi)，并不致病，當(dāng)全身及陰道局部免疫功能下降時(shí)，白色假絲酵母菌便大量繁殖，導(dǎo)致陰道炎的發(fā)生[3]。

目前關(guān)于大熊貓陰道菌群相關(guān)研究?jī)H限于動(dòng)物正常情況如發(fā)情期間，對(duì)于大熊貓產(chǎn)后發(fā)生霉菌性陰道炎尚未見(jiàn)報(bào)道，現(xiàn)將病例總結(jié)報(bào)道，旨在為該病的診療和預(yù)防提供參考。

1 動(dòng)物臨床發(fā)病及初步治療情況

大熊貓，雌性，7歲，100 kg，初次產(chǎn)仔母獸，產(chǎn)仔后半個(gè)月由于季節(jié)因素更換飼喂竹子品種，其后出現(xiàn)于采食量大幅下降，精神煩躁不安，咩叫多，外陰明顯紅腫增大(圖1)，伴有頻繁抓撓外陰行為。根據(jù)初期臨床癥狀，結(jié)合血液學(xué)檢查結(jié)果初步診斷為外陰陰道炎?？紤]到哺乳期用藥副作用，患病首日先選用口服青霉素類抗生素阿莫西林克拉維酸鉀片劑，同時(shí)外用0.01%高錳酸鉀液沖洗外陰，用藥3 d后病情未見(jiàn)明顯改善。此后又分別于患病3 d后、5 d后、患病7 d后分別進(jìn)行3次麻醉檢查補(bǔ)液治療，外陰及陰道局部處理主要使用生理鹽水、依沙吖啶、0.01%高錳酸鉀、0.5%聚維酮碘溶液反復(fù)沖洗，補(bǔ)液治療的主要治療原則是抗菌消炎、補(bǔ)充體液及能量、糾正電解質(zhì)，但總體病情仍無(wú)明顯改善。在患病7日的治療時(shí)，分別做血液學(xué)檢查、陰道分泌物涂片鏡檢與菌群培養(yǎng)及藥敏實(shí)驗(yàn)。

圖1 臨床癥狀Fig.1 Clinical symptoms

2 實(shí)驗(yàn)室檢查

2.1 血液學(xué)檢查

麻醉檢查治療時(shí)均采集血液樣品進(jìn)行血液學(xué)檢查，結(jié)果見(jiàn)表1。3次血液常規(guī)指標(biāo)檢查中白細(xì)胞總數(shù)均基本正常，中性粒細(xì)胞比率、血紅蛋白、血細(xì)胞比容隨著治療有著從發(fā)病初期降低到后期恢復(fù)升高的過(guò)程，單核細(xì)胞比率隨著治療逐步降低。3次血液生化指標(biāo)檢查中，嚴(yán)重的白球倒置隨著治療逐步改善，血鉀、血鈣、血磷隨著治療有著從發(fā)病初期降低到后期恢復(fù)升高的過(guò)程。

表1 血液學(xué)檢查結(jié)果

Tab.1 The result of CBC and blood chemistry

2.2 陰道分泌物涂片鏡檢與菌群培養(yǎng)及藥敏實(shí)驗(yàn)

2.2.1 病料采集

使用消毒的開(kāi)殖器擴(kuò)張陰道后，用無(wú)菌棉簽置入陰道后穹隆底部，按順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)兩圈后，將采集的陰道分泌物置于無(wú)菌試管中，標(biāo)記送檢[4-5]。

2.2.2 陰道分泌物涂片鏡檢

取陰道分泌物經(jīng)10%氫氧化鉀浸泡后，用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察，結(jié)果見(jiàn)表2，其中陰道中的有益菌乳酸桿菌很少，表明陰道內(nèi)已出現(xiàn)菌群紊亂。

表2 陰道分泌物涂片鏡檢結(jié)果

Tab.2 The microscopy result of vaginal discharge

2.2.3 陰道分泌物菌群培養(yǎng)及藥敏實(shí)驗(yàn)

取陰道分泌物進(jìn)行菌群培養(yǎng)及藥敏實(shí)驗(yàn)，相關(guān)操作按照全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第五版進(jìn)行[4-5]。結(jié)果見(jiàn)表3、表4，陰道分泌物培養(yǎng)出白色假絲酵母菌，相關(guān)藥敏實(shí)驗(yàn)顯示其對(duì)咪唑類藥物和三唑類藥物均敏感。

表3 陰道分泌物菌群培養(yǎng)結(jié)果

Tab.3 The bacteria culture result of vaginal discharge

表4 白色假絲酵母菌藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Tab.4 The drug susceptibility result of VVC

3 診斷

根據(jù)臨床癥狀、前期治療情況，結(jié)合陰道分泌物的涂片鏡檢、菌群培養(yǎng)及血液學(xué)檢查結(jié)果，確診為霉菌性陰道炎。

4 確診后治療

4.1 臨床用藥

確診為霉菌性陰道炎后，首先考慮給予抗真菌藥物，但結(jié)合到母獸康復(fù)后需繼續(xù)給幼崽哺乳，若給母獸口服或肌注抗真菌藥物，其乳汁在較長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)存在較大藥物代謝產(chǎn)物產(chǎn)生不良反應(yīng)可能性，故選用副作用較小的咪唑類藥物克霉唑外用作為主藥[2]。

因此于動(dòng)物患病9 d后，再次對(duì)其開(kāi)展麻醉補(bǔ)液與治療。首先，把外陰局部清洗干凈，使用生理鹽水對(duì)陰道進(jìn)行清洗；然后再使用0.5%聚維酮碘溶液重復(fù)3次對(duì)陰道進(jìn)行沖洗，每次沖洗后將陰道口堵住保持10 min以延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間；之后用碳酸氫鈉溶液沖洗陰道，以堿化陰道pH酸堿度；最后使用消毒的開(kāi)殖器擴(kuò)張陰道將克霉唑片(0.5 g×2 tablets)放置于陰道穹窿底部。補(bǔ)液治療的主要原則仍為抗菌消炎、補(bǔ)充體液及能量、糾正電解質(zhì)。

4.2 環(huán)境消毒與飼養(yǎng)管理

對(duì)飼養(yǎng)該大熊貓的獸舍進(jìn)行徹底的消毒，室內(nèi)的地面、墻面均采用火焰槍與消毒液交叉消毒，并用空氣消毒機(jī)對(duì)室內(nèi)消毒；動(dòng)物的用具經(jīng)消毒液浸泡消毒，同時(shí)確保獸舍干燥，控制環(huán)境溫度不超過(guò)25 ℃為宜。飼養(yǎng)管理方面，首先安排專人照顧患病大熊貓，對(duì)患病動(dòng)物進(jìn)行隔離飼養(yǎng)管理，防止交叉感染；其次調(diào)配食物的種類與類型，保證食物易消化與營(yíng)養(yǎng)豐富[1]。

5 轉(zhuǎn)歸

經(jīng)過(guò)明確病因后的針對(duì)性治療后，該大熊貓?jiān)?4 h后外陰紅腫程度明顯減弱，開(kāi)始恢復(fù)食欲，煩躁抓撓外陰的行為明顯減少。之后又于患病12 d再次進(jìn)行鞏固性治療，治療方案與上次相同；該大熊貓于此次治療24 h后，外陰完全恢復(fù)正常，無(wú)煩躁、抓撓外陰等行為，精神和食欲恢復(fù)正常。

6 討論

6.1 大熊貓產(chǎn)后陰道炎治療藥物選擇的針對(duì)性

大熊貓產(chǎn)后陰道炎以往在大熊貓圈養(yǎng)種群中也時(shí)有發(fā)生，但是基本在通過(guò)外陰陰道清洗殺菌、抗菌消炎等治療手段得以痊愈。本次發(fā)病的臨床癥狀與以往發(fā)生的陰道炎基本類似，治療初期經(jīng)驗(yàn)性選用抗細(xì)菌感染治療未取到預(yù)期效果，后期通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢查確診病原后，篩選敏感性抗真菌藥物用于治療，取得滿意療效[6]。這表明在發(fā)病之初即刻做陰道分泌物涂片鏡檢、細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)，對(duì)大熊貓產(chǎn)后陰道炎的藥物選擇極具指導(dǎo)意義。

6.2 大熊貓產(chǎn)后霉菌性陰道炎治療特點(diǎn)

由于陰道其具有自身內(nèi)環(huán)境特點(diǎn)，治療用藥必須審慎。治療初期使用高錳酸鉀溶液沖洗陰道，利用其強(qiáng)氧化性具有較強(qiáng)的消毒殺菌作用的特點(diǎn)，但是同時(shí)也會(huì)殺死大量陰道桿菌，造成陰道內(nèi)環(huán)境被破壞，可能導(dǎo)致病情進(jìn)一步發(fā)展。確診為霉菌性陰道炎后，由于為白色假絲酵母菌引起的感染，白色假絲酵母菌其本身具有喜酸惡堿的特性，給予碳酸氫鈉液沖洗陰道，改變陰道pH酸堿度，有利于更好提高藥物臨床用藥的效果[7]。此外，臨床研究上發(fā)現(xiàn)白色假絲酵母菌對(duì)聚維酮碘存在一定的耐藥性，但這些可以通過(guò)適當(dāng)提高作用濃度和延長(zhǎng)作用時(shí)間來(lái)得以彌補(bǔ)[8]?？梢?jiàn)，制定科學(xué)的治療方案，特殊時(shí)期、合理審慎用藥，對(duì)大熊貓產(chǎn)后霉菌性陰道炎臨床療效好壞極為關(guān)鍵。

6.3 大熊貓產(chǎn)后霉菌性陰道炎發(fā)病時(shí)間特點(diǎn)

正常情況下大熊貓陰道和子宮頸口處于閉合狀態(tài)，外界病原微生物極難進(jìn)入，且陰道本身處于酸性環(huán)境，大部分病原微生物也難以在這種環(huán)境下生長(zhǎng)繁殖。此外陰道黏膜上皮還分布有吞噬能力較強(qiáng)的白細(xì)胞，這也對(duì)病原微生物起著抑制作用[1]。但是當(dāng)大熊貓生產(chǎn)后有抓搔和頻繁舔外陰的行為習(xí)慣，這客觀上為病原微生物提供了可乘之機(jī)，同時(shí)由于產(chǎn)后母獸花費(fèi)大量精力哺育幼仔，無(wú)法正常進(jìn)食與休息，可能導(dǎo)致母獸免疫力下降，這時(shí)就極易感染發(fā)病。

6.4 大熊貓產(chǎn)后霉菌性陰道炎發(fā)病可能因素與預(yù)防

這是首例臨床上報(bào)道作為條件致病菌的白色假絲酵母菌導(dǎo)致大熊貓發(fā)生霉菌性陰道炎，以往大熊貓產(chǎn)后陰道炎主要以細(xì)菌感染為主。以前大熊貓真菌感染引起的發(fā)病多見(jiàn)于大熊貓幼崽患真菌性皮膚病[9-11]。結(jié)合從馬曉平等[12]、雷蕾等[13]、胡國(guó)全等[14]分別關(guān)于大熊貓陰道菌群的相關(guān)報(bào)道研究，一方面提示隨著臨床上廣譜抗菌藥和免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用，真菌感染發(fā)生的可能性日益增大，臨床用藥時(shí)要全面權(quán)衡利弊后審慎選擇；另一方面作為條件致病菌，特別是當(dāng)在動(dòng)物機(jī)體處于免疫力低下?tīng)顟B(tài)時(shí)，動(dòng)物的環(huán)境消毒和飼養(yǎng)管理極為重要，通過(guò)加強(qiáng)產(chǎn)后的大熊貓飼養(yǎng)管理，保持獸舍干燥，嚴(yán)格消毒，控制好環(huán)境溫濕度，保證哺乳期母獸的合理營(yíng)養(yǎng)供給，提高其自身免疫力也是預(yù)防該病的關(guān)鍵。