汪洪濤

(江蘇經(jīng)貿職業(yè)技術學院 健康學院，江蘇 南京 211168)

綠原酸存在于高等植物和蕨類植物之中,來源廣泛。研究表明，綠原酸具有抗菌、抗病毒、保肝、降血脂、降血壓、清除自由基等生理功能，目前被廣泛應用于食品、醫(yī)藥保健、日用化工品等領域。

1 綠原酸概述

1.1 綠原酸的定義

綠原酸是酚類化合物，是由奎尼酸和咖啡酸縮合而成的，是植物在有氧呼吸過程中經(jīng)莽草酸途徑形成的苯丙素類化合物。

1.2 綠原酸的發(fā)現(xiàn)和命名

1897年外國的兩名科學家研究發(fā)現(xiàn)向日葵籽中含有一種物質，可以導致向日葵籽蛋白變黑。1909年德國科學家經(jīng)過多次實驗，向人們證明了此化合物就是綠原酸。1947年Nelson等通過研究首次確定綠原酸是一種由咖啡酸和奎尼酸形成的酯。

1.3 綠原酸的理化性質

綠原酸的半水合物是白色針狀結晶體或微黃色針狀結晶體，在110 ℃的狀態(tài)下會轉變成無水物，會和稀鹽酸發(fā)生反應并產(chǎn)生咖啡酸；25 ℃時，在水中的溶解度大約為4%，易溶于極性溶劑如甲醇、乙醇和丙酮，微溶于乙酸乙酯，難溶于氯仿、乙醚、苯等有機溶劑。綠原酸的分子量是354.30，分子式是C16H18O9。很多水果中都含有多種綠原酸活性成分，如蘋果、桃子等，其發(fā)生的褐變主要是酶促褐變。另外，綠原酸還是粗咖啡產(chǎn)生苦味的主要原因。

1.4 綠原酸的分布狀況

綠原酸廣泛存在于高等雙子葉植物和蕨類植物中。綠原酸是金銀花、杜仲的主要活性成分之一。金銀花中綠原酸含量最高的當屬大花毛忍冬花，最高可達11.14%，其次是紅腺忍冬花，最高達7.1%。杜仲葉中綠原酸的含量受時期影響，如5月份含量最低，6月份含量最高?？ㄗ咽蔷G原酸的主要來源之一，在向日葵籽仁中，細胞蛋白質顆粒和糊粉層是綠原酸主要分散的兩個位點。

2 綠原酸的檢測方法

2.1 紫外分光光度法

不同類型物質的吸收光譜不一樣，每條特定的吸收光譜曲線對應著某種物質，因此可以根據(jù)相應的吸收光譜確定物質的含量及其吸光度水平。李坤等人將由紫外分光光度法和液相色譜法得到的檢測結果進行比較，并建立了一種簡單、快捷且可直接檢測綠原酸含量的方法。

2.2 高效液相色譜法

高效液相色譜法是分離綠原酸最常用的方法之一，分離效果明顯，線性關系良好，檢測限低，回收率和精密度高，重現(xiàn)性好。白梅等人通過此方法檢測出杜仲葉中綠原酸的含量。該方法的優(yōu)點是能準確可靠地進行測定，并能有效控制物質的含量，缺點是影響因素較多，難以控制，且成本較高。

2.3 毛細管電泳檢測法

毛細管電泳檢測法具有分析快速、檢測限低、重現(xiàn)性好、柱效高、無污染等優(yōu)點，在中藥復方成分分析中具有獨特優(yōu)勢。因此，越來越多的研究人員開始使用這種方法測定綠原酸含量。欒姝等人采用高效毛細管電泳法測定出茵陳中的綠原酸含量。外國科學家對此方法進行了改進，且改進后的電極提高了高效毛細管電泳儀的效率和分辨率。

3 綠原酸的提取方法

3.1 水提法

綠原酸是極性較強的有機酸，易溶于乙醇和水，可以把水作為提取綠原酸的溶劑。王雪梅等人將金銀花作為研究原料，優(yōu)化綠原酸的提取和濃縮條件，結果表明最佳提取條件為料液比1∶12，提取時間1 h，提取次數(shù)3次，pH值2～3。此工藝操作簡單方便，投資少，提純率高，能降低研究成本。

3.2 酶提取法

植物細胞壁是植物細胞外圍存在的厚壁，用于保持某種形式的細胞并增強細胞的機械強度。合適的纖維素酶和果膠酶可以破壞細胞壁的結構，使細胞壁中的活性成分溶解生物活性。武宇芳等人對采用水提法和酶解法提取沙棘葉中綠原酸的情況進行了比較，發(fā)現(xiàn)酶解效果優(yōu)于水提法，提純率高，但酶活性容易受反應物影響，且成本高。

3.3 溶劑提取法

溶劑提取法是一種將溶劑加入固體材料以萃取活性成分的方法。從金銀花中提取綠原酸通常采用水萃取、醇萃取和水醇混合溶劑萃取等方法，其中水提制備的水提物中綠原酸含量相對較低。董麗華等采用水提法提取綠原酸，將金銀花中的粗粉濃縮形成金銀水浸出液，并在一定程度上加入乙醇且使其含量達到75%，使其他雜質不溶于乙醇沉淀，只讓綠原酸存在于乙醇中。許東穎等人研究了綠原酸的提取工藝，用一定比例的乙醇和水的混合溶劑浸泡金銀花。

3.4 超聲波提取法

超聲波提取法是利用超聲波具有的機械效應、空化效應和熱效應，通過提高介質分子的運動速度和介質的穿透力來提取有效成分。提取綠原酸不允許高溫、強光和長時間加熱。超聲波提取法不僅可以克服綠原酸的不穩(wěn)定性，還能利用所有物理過程提取綠原酸。袁飛的研究表明,影響綠原酸提取的因素是溶劑、提取時間和料液比；最佳提取工藝為60%乙醇，料液比1∶30，提取時間45 min，遠紅外微波1 min，所得綠原酸含量較高。

4 綠原酸的生物活性

4.1 抑制透明脂酸酶和葡萄糖-6-磷酸酶活性

透明脂酸酶是裂解粘多糖的酶之一，可以催化透明脂酸的分解。透明脂酸由乙酰氨基葡萄糖和葡萄糖醛酸組成，具有治愈創(chuàng)傷、使皮膚濕潤健康、潤滑關節(jié)、防止炎癥等功能。研究發(fā)現(xiàn)，綠原酸和奎尼酸具有較強的抑制透明脂酸激活的作用。葡萄糖-6-磷酸酶體系在體內平衡血糖調節(jié)中發(fā)揮著重要的作用。近年來，綠原酸已被確定為大鼠肝微粒體中第一種新型的葡萄糖-6-磷酸轉移酶特異性抑制劑。

4.2 抗氧化活性和清除體內自由基

綠原酸具有高于咖啡酸、對羥基苯甲酸、阿魏酸、丁香酸等的抗氧化能力。綠原酸含有一定量的醇類基團，它所形成的氫自由基具有抗氧化能力，能夠保護組織免受氧化作用傷害、消除超氧陰離子和羥自由基的活性。王業(yè)秋等人研究表明，綠原酸具有抗凋亡作用。綠原酸既可以增強內皮細胞對有害物質的抵抗力和耐受性，從而保護內皮細胞，也能抑制低密度脂蛋白的氧化。綠原酸在有效清除體內自由基、維持人體細胞的正常結構和功能、預防腫瘤發(fā)生及延緩衰老等方面起著重要作用。

4.3 抑制和殺滅多種致病菌和病毒

在研究大腸桿菌和金黃色葡萄球菌時，研究者發(fā)現(xiàn)綠原酸和它的鋅配合物均具有抑制作用。綠原酸對引起牙齦炎的桿菌、引起齲齒的變性鏈球菌等也顯示出很強的抗菌活性?？Х人峋哂兄寡?、利膽、抑制單純皰疹病毒的作用，它是綠原酸最終水解的產(chǎn)物。董俊興等人研究發(fā)現(xiàn)綠原酸類化合物對病毒有良好的抑制作用，可以治療相關疾病。Karar等人通過實驗證明綠原酸及其衍生物能夠抑制酶活性，具有抗病毒活性的作用。

4.4 保肝利膽

綠原酸不僅具有降血糖、改善血液流動情況等功效，還能夠減少肝臟線粒體中自由基的數(shù)量，從而抑制肝脂質過氧化。報道顯示，綠原酸不僅能促進膽汁分泌，還能顯著增加總膽汁酸濃度，有效保護肝臟。在臨床上，綠原酸對肝膽疾病具有顯著的治療效果。腎功能與肝臟密切相關，綠原酸可通過抑制腎小球細胞的特異性生長而改善腎功能。另外，綠原酸還有利尿作用。婁紅祥等人從金銀花的水溶性部分得到綠原酸四乙酰化合物，研究表明其對小鼠因四氯化碳引起的肝損傷有保護作用。

4.5 保護心血管

綠原酸作為一種自由基清除劑和抗氧化劑，可以保護心血管系統(tǒng)。常翠青等人的研究顯示，綠原酸能對人的內皮細胞損傷起保護作用。綠原酸可以通過消除抗脂質過氧化和自由基來保護血管內皮細胞，從而預防動脈粥樣硬化和高血壓等。

5 綠原酸的應用開發(fā)現(xiàn)狀

5.1 綠原酸在食品行業(yè)的開發(fā)應用

綠原酸是一種新型天然抗氧化劑，被廣泛應用于食品行業(yè)。為了延長肉類的保質期，通常會在肉中加入少量綠原酸，以提高肉的抗氧化穩(wěn)定性。由于綠原酸具有增加香味和護色的作用，因此常被用作食品和水果保鮮劑，如用于魚片保鮮。綠原酸也可以用來防止飲料腐敗變質，還可以作為良好的食品添加劑，用于制作具有保健功效的食品或飲料。

5.2 綠原酸在醫(yī)藥保健行業(yè)的開發(fā)應用

在衛(wèi)生部藥品標準涵蓋的170種中成藥中，具有解毒、抗菌、抗炎作用的大多以綠原酸為主要成分。目前綠原酸已被用作銀黃制劑和雙黃連制劑生產(chǎn)中質量控制的重要指標之一。綠原酸在多酚類物質中被稱為“第七類營養(yǎng)素”，被廣泛應用于醫(yī)療保健行業(yè)。從植物中提取綠原酸將會作為第二類新藥開發(fā)。綠原酸也是一種重要的化學試劑，被廣泛應用于生化分析和化學工業(yè)。

5.3 綠原酸在日用化工行業(yè)的開發(fā)應用

綠原酸能有效去除活性氧等自由基，可以保護膠原蛋白免受傷害，能將紫外線對人體皮膚的傷害降到最低，因此被廣泛應用在美白、潤膚、防曬和護發(fā)等日用化工領域。綠原酸類物質具有促進新陳代謝、防止衰退的作用。日本使用綠原酸的抗氧化特性開發(fā)了抗衰老護膚品。綠原酸類物質能夠減少紫外線對人體皮膚的傷害，可以抑制酶的活性，消除皮膚細胞中存在的活性氧成分，達到美容的效果。含有綠原酸類物質的化妝品能有效冷卻血液，祛除血瘀，消除痘痘和雀斑的影響，同時也能激活細胞內的酶，維持表皮細胞的生理活性，促進細胞代謝，滋養(yǎng)皮膚，美白肌膚。