向彥臻，陳歡，殷佩浩，2a，徐可，2b ，詹月萍，2b

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)上海普陀教學(xué)基地，上海 200062； 2.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院 a.普外科，b.中西醫(yī)結(jié)合腫瘤介入研究所，上海 200062)

結(jié)直腸癌是美國(guó)第三大最常見(jiàn)癌癥[1],也是中國(guó)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。在全球確診的136萬(wàn)例結(jié)直腸癌中,中國(guó)結(jié)直腸癌的新發(fā)病例達(dá)25.3萬(wàn)例，是全球結(jié)直腸癌每年新發(fā)病例數(shù)最多的國(guó)家[2]。對(duì)于結(jié)腸癌患者，即使在早期切除原發(fā)病灶也仍有可能發(fā)生轉(zhuǎn)移,最終導(dǎo)致患者死亡。肝臟是結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移最常見(jiàn)的部位，常經(jīng)門(mén)脈循環(huán)行血源性傳播[3]。

結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的生物學(xué)過(guò)程極為復(fù)雜，是由多因素調(diào)控、多步驟構(gòu)成的過(guò)程，其具體機(jī)制目前仍不明確。肝轉(zhuǎn)移的過(guò)程可分為幾個(gè)連續(xù)步驟。首先，原發(fā)腫瘤灶中的癌細(xì)胞分泌血管生成因子導(dǎo)致血管擴(kuò)張，經(jīng)激活蛋白酶的局部作用，癌細(xì)胞進(jìn)入薄壁靜脈血管和淋巴管，從而進(jìn)入血液循環(huán)，大多數(shù)循環(huán)癌細(xì)胞在此過(guò)程中受到免疫系統(tǒng)和血流剪切力的攻擊而破壞，存活的癌細(xì)胞或團(tuán)塊形成栓塞阻塞遠(yuǎn)處器官毛細(xì)血管床，最終癌細(xì)胞向肝實(shí)質(zhì)外滲并形成微轉(zhuǎn)移灶[4]。

深入研究結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的具體機(jī)制以及探索有效的抗轉(zhuǎn)移治療方法，需要建立人結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型。根據(jù)成瘤機(jī)制，結(jié)直腸癌小鼠造模方法主要分為致癌劑誘發(fā)小鼠成瘤法、基因工程小鼠成瘤法及直接種植腫瘤細(xì)胞或組織成瘤法。致癌劑誘發(fā)法耗時(shí)長(zhǎng)、變異大、組間不易獲得病程及癌塊相似的小鼠。基因工程法成瘤率和轉(zhuǎn)移率低，實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)。故前兩種造模法極少用于結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的造?！，F(xiàn)就結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移常用的直接種植法造模及應(yīng)用情況予以綜述。

1 盲腸種植法

盲腸種植法是開(kāi)腹后將結(jié)直腸癌腫瘤細(xì)胞或組織直接移植于盲腸漿膜下所產(chǎn)生的結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型，此法為原位種植形成的自發(fā)性肝轉(zhuǎn)移模型，能較為客觀地模擬人類(lèi)結(jié)直腸癌細(xì)胞的淋巴道轉(zhuǎn)移和血運(yùn)播散，較好地體現(xiàn)結(jié)直腸癌的生物學(xué)特性。

與腫瘤組織移植法相比，細(xì)胞注射法流程簡(jiǎn)便、操作易行，且更為常用，建模成功的關(guān)鍵在于所選腫瘤細(xì)胞的侵襲能力和腫瘤細(xì)胞的數(shù)量。為證明微RNA(microRNA，miR)-192的表達(dá)能抑制體內(nèi)結(jié)直腸癌細(xì)胞向肝轉(zhuǎn)移，Geng等[5]將綠色熒光蛋白標(biāo)記的表達(dá)miR-192的2×106個(gè)HCT116細(xì)胞直接注射到4～5周裸鼠的盲腸。4～5周處死裸鼠，切除盲腸及肝臟進(jìn)行評(píng)估發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組肝轉(zhuǎn)移發(fā)生率為53%，而miR-192表達(dá)組肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生率低至8%。Limani等[6]將MC-38結(jié)腸癌細(xì)胞注射至C57B1/6小鼠的盲腸壁，用肌醇三焦磷酸酯和FOLFOX(葉酸、氟尿嘧啶、奧沙利鉑)處理小鼠，6周后評(píng)估小鼠肝轉(zhuǎn)移指標(biāo)，結(jié)果顯示，肌醇三焦磷酸酯較FOLFOX抗結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移作用更明顯。為證實(shí)在肝轉(zhuǎn)移和源于遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌細(xì)胞系中miR-885-5P的表達(dá)上調(diào)，Lam等[7]將1×106個(gè)HCT116細(xì)胞原位注射于6～8周的NOD/SCID小鼠的盲腸壁，觀察腫瘤轉(zhuǎn)移及miR-885-5P的表達(dá)情況。細(xì)胞注射雖然相對(duì)簡(jiǎn)便，但接種后的腫瘤細(xì)胞易從漿膜中漏出。Zhang 等[8]在建模時(shí)做了進(jìn)一步改善，將含有2×106個(gè)結(jié)腸癌細(xì)胞的10～15 mL磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline，PBS)用33號(hào)微注射器注入野生型C57BL/6和白細(xì)胞介素-33(interleukin-33，IL-33)敲除小鼠的盲腸漿膜下，注射部位用組織膠密封、70%的乙醇和PBS清洗，以防止?jié)B漏。6周后處死小鼠，收集并評(píng)估自發(fā)性肝轉(zhuǎn)移腫瘤組織。結(jié)果表明，在結(jié)腸癌細(xì)胞中IL-33的表達(dá)增加了腫瘤的發(fā)生和肝轉(zhuǎn)移。

腫瘤組織移植是將結(jié)直腸癌細(xì)胞先注射于動(dòng)物皮下或其他部位，待形成腫瘤塊后再移植到盲腸的方法。由于此法與臨床結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的突破方式和時(shí)間更為接近，因而認(rèn)為其形成肝轉(zhuǎn)移的可信度更高。但此種方式的手術(shù)要求高、過(guò)程復(fù)雜，且耗時(shí)較長(zhǎng)。Tao等[9]將2×107個(gè)HCT116細(xì)胞注射至裸鼠的右腋窩，3周后用無(wú)菌技術(shù)切除腫瘤并切至1～2 mm3大小，將切下的腫瘤塊移植至48只裸鼠的盲腸中，7 d后隨機(jī)分為4組給藥，即對(duì)照組、胃腸安組、5-氟尿嘧啶組、胃腸安+5-氟尿嘧啶組，7周后處死裸鼠并收集原位腫瘤、肝轉(zhuǎn)移瘤及腫瘤鄰近組織，檢查結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，胃腸安+5-氟尿嘧啶組和胃腸安組肝轉(zhuǎn)移更少。Agarwal等[10]將非靶向短發(fā)夾RNA(short hairpin RNA,shRNA)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt) shRNA2或Akt2 shRNA2轉(zhuǎn)染的綠色熒光標(biāo)記的7×106個(gè)GEO細(xì)胞注射到雄性裸鼠的背側(cè)皮下,形成異種移植物后切除腫瘤并切成1 mm3的碎片，將兩塊碎片植入另一只裸鼠的盲腸。采用×7倍放大和顯微外科技術(shù)，用8-0尼龍縫合線將異種移植物縫入漿膜下兩個(gè)不同位置。由于手術(shù)的復(fù)雜性，術(shù)后每組25只小鼠只有17～22只存活，9周后處死小鼠評(píng)估肝轉(zhuǎn)移，結(jié)果表明，Akt2缺失抑制體內(nèi)結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移。Yang等[11]將2×106個(gè)Lovo-Luc細(xì)胞懸浮于F12K培養(yǎng)基中，再將0.2 mL懸浮液皮下接種于BALB/c裸鼠的右前肢。當(dāng)腫瘤生長(zhǎng)到約1 cm3時(shí)取出皮下腫瘤浸入含有青霉素和鏈霉素的F12K培養(yǎng)基中，腫瘤組織切塊備用。另取裸鼠，在盲腸血供充足處插入備用腫瘤塊，無(wú)菌紗布吸取周?chē)后w，腫瘤表面涂上適量的醫(yī)用OB膠，確保腫瘤擴(kuò)散至盲腸壁，靜置45 s膠凝固后回納盲腸并關(guān)腹，術(shù)后7 d開(kāi)始接受藥物處理3周，最后評(píng)估裸鼠肝轉(zhuǎn)移情況。

2 脾臟種植法

經(jīng)脾臟建立結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型是最常用的方式，可分為脾臟保留法和去脾法。雖與盲腸種植法相比，其不能客觀模擬結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的宏觀過(guò)程,但脾臟種植法可用于篩選高轉(zhuǎn)移傾向的惡性結(jié)直腸癌細(xì)胞、研究腫瘤免疫療法、開(kāi)發(fā)抗轉(zhuǎn)移藥物等。

保脾法是一種易于實(shí)施且重復(fù)性好的用于建立結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型的方法。脾臟是機(jī)體的免疫器官，腫瘤細(xì)胞經(jīng)過(guò)脾臟免疫細(xì)胞后轉(zhuǎn)移至肝臟更符合體內(nèi)腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程。此法注射腫瘤細(xì)胞時(shí)需謹(jǐn)防細(xì)胞溢出而造成腹膜內(nèi)腫瘤。Zhou等[12]將1×106個(gè)SW480或SW620細(xì)胞懸浮在50 μL PBS中，注入脾遠(yuǎn)端，6周后處死小鼠，切除脾臟和肝臟，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，酸離子通道2過(guò)表達(dá)促進(jìn)SW480細(xì)胞的肝轉(zhuǎn)移，其敲除將減少SW620細(xì)胞的肝臟轉(zhuǎn)移。Zhang等[13]將5×105個(gè)HCT116細(xì)胞注射至BALB/c裸鼠脾臟后，分別用小檗堿和0.9%氯化鈉(對(duì)照組)灌腸4周，實(shí)驗(yàn)結(jié)束處死裸鼠，收集裸鼠肝臟發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，小檗堿組肝轉(zhuǎn)移灶的體積明顯較小、數(shù)量較少。

脾臟切除法所建模型可以避免保脾法形成的脾臟原位腫瘤對(duì)小鼠的影響，能較好地模擬結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移血行轉(zhuǎn)移過(guò)程，形成的肝轉(zhuǎn)移灶集中而明顯。但切除脾臟易致實(shí)驗(yàn)小鼠死亡，因此此法對(duì)實(shí)驗(yàn)要求較高。Shimizu等[14]麻醉小鼠后，在靠近脾臟左側(cè)處行0.5 cm切口，用27 G針頭將含有2.0×106個(gè)CMT-93結(jié)直腸癌細(xì)胞的200 μL PBS分別緩慢注射至野生型和血管緊張素Ⅱ亞型受體1α敲除小鼠的脾臟，5 min后取脾關(guān)腹，2周后處死小鼠，取出肝臟，與野生型相比，血管緊張素Ⅱ亞型受體1α敲除小鼠肝臟的重量及肝轉(zhuǎn)移率明顯降低。Zhang等[15]為獲得體內(nèi)高轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌細(xì)胞，將含有1×105個(gè)MC38細(xì)胞的100 μL PBS注射至C57BL/6小鼠脾臟，5 min后去脾，3周后獲得肝轉(zhuǎn)移瘤，用膠原酶處理獲得肝轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞，從而提取出單個(gè)無(wú)菌細(xì)胞，選出的細(xì)胞再用G418(400 μg/mL)處理至少1周后再次注射至小鼠脾臟，重復(fù)9個(gè)循環(huán)以獲得高侵襲性的MC38-LM10細(xì)胞。Tohme等[16]建立缺血再灌注模型，在再灌注時(shí)，用27 G針頭將 5×104個(gè)MC38細(xì)胞注射至小鼠脾臟，與此同時(shí)小鼠接受聚環(huán)氧乙烷或聚乙二醇處理，腫瘤細(xì)胞注射10 min后去脾，評(píng)估聚環(huán)氧乙烷是否能抑制肝轉(zhuǎn)移灶的生長(zhǎng)。結(jié)果顯示，聚環(huán)氧乙烷能減少肝缺血再灌注后新肝轉(zhuǎn)移瘤的形成。

考慮到保脾法所形成的肝轉(zhuǎn)移瘤不佳及切脾法對(duì)動(dòng)物自身免疫系統(tǒng)的破壞，在某些實(shí)驗(yàn)中常運(yùn)用脾臟半切除法，此法可兼顧保脾法和切脾法的優(yōu)點(diǎn)，又能減少兩者對(duì)小鼠的傷害。Rahbari等[17]為模擬結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移，將脾臟分成兩個(gè)部分，將1×105個(gè)CT26細(xì)胞注射到遠(yuǎn)端脾尾部，然后切除注射的脾半球，其余半球保持在原來(lái)位置。為評(píng)估腫瘤負(fù)荷，他們將小鼠隨機(jī)分組，并在出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的肝轉(zhuǎn)移瘤后(注射后8～12 d)開(kāi)始治療。Chen等[18]將小鼠分為SW620-血管內(nèi)皮樣蛋白1組和SW620-對(duì)照組，麻醉后暴露脾臟，脾臟分為兩半后分別被夾住，將2×106個(gè)結(jié)直腸癌細(xì)胞經(jīng)其中一個(gè)半脾的血管注入，經(jīng)PBS沖洗后切斷引流半脾的脾血管，并切除注入腫瘤細(xì)胞的半脾，逐層關(guān)腹，監(jiān)測(cè)肝轉(zhuǎn)移情況，2個(gè)月后對(duì)肝轉(zhuǎn)移瘤進(jìn)行組織學(xué)分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SW620-血管內(nèi)皮樣蛋白1組的肝轉(zhuǎn)移率低于SW620-對(duì)照組。

3 肝臟直接種植法

肝臟直接種植法是將結(jié)直腸癌細(xì)胞或瘤塊直接接種到肝臟所形成的結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移灶。肝臟直接種植法雖不能客觀模擬腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、侵襲及轉(zhuǎn)移的全過(guò)程，但成瘤率高，且成瘤速度快，更適合于晚期結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的研究。

肝臟直接種植法中的細(xì)胞注射法具有簡(jiǎn)單易行、重復(fù)性好的特點(diǎn)。Sun等[19]為證明胰島素誘導(dǎo)基因2與結(jié)腸癌晚期的關(guān)系，在小鼠肝臟右下葉注射胰島素誘導(dǎo)基因2 shRNA或熒光素酶shRNA轉(zhuǎn)染穩(wěn)定的HT29細(xì)胞,在第28天處死小鼠后計(jì)算肝左葉的轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，穩(wěn)定的胰島素誘導(dǎo)基因2 shRNA 轉(zhuǎn)染HT29細(xì)胞可顯著抑制非移植肝葉中肝腫瘤結(jié)節(jié)的形成。細(xì)胞注射法中非常關(guān)鍵的一點(diǎn)是防止腫瘤細(xì)胞外滲，F(xiàn)ries等[20]對(duì)此做了進(jìn)一步改善，沿腹中線打開(kāi)腹壁后，用27 G針頭的結(jié)核菌素注射器將含有5×105個(gè)結(jié)腸癌細(xì)胞的懸液注射到左肝葉。為了防止腫瘤細(xì)胞溢出和出血，壓迫注射部位5 min，隨后關(guān)腹。Chou等[21]證明，Scellin在肝轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌細(xì)胞系中特異性表達(dá)，將結(jié)腸癌細(xì)胞對(duì)照組和Scellin敲除的結(jié)腸癌細(xì)胞組分別與基質(zhì)凝膠混合，向5周齡的雄性BALB/c裸鼠肝內(nèi)注射(1×105個(gè)/50 μL)，監(jiān)測(cè)腫瘤生長(zhǎng)，8周后處死小鼠并檢測(cè)肝轉(zhuǎn)移瘤的生長(zhǎng)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Scellin的敲除增加了結(jié)腸癌的遷移和侵襲。Vasquez等[22]將5×105個(gè)MC38細(xì)胞注射到6～8周的C57BL/6雄鼠的肝左葉，建立結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型，用兩種不同劑量的編碼α干擾素的腺相關(guān)病毒(adeno-associated virus encoding interferon α，AAV-IFNα)處理小鼠: 1×1010AAV-IFNα、5×1011AAV-IFNα、AAV-熒光素，21 d后測(cè)量腫瘤體積發(fā)現(xiàn)，AAV-熒光素組和低劑量AVV-IFNα組小鼠出現(xiàn)了腫瘤，而接受最高劑量的AVV-IFNα小鼠未出現(xiàn)腫瘤。

在部分實(shí)驗(yàn)中，考慮到肝轉(zhuǎn)移建模的成功率及針對(duì)性研究，往往會(huì)將腫瘤細(xì)胞先注射于小鼠各部位形成腫瘤塊后，再將腫瘤塊植入研究小鼠的肝臟。Murakami等[23]將5×105個(gè)綠色熒光蛋白標(biāo)記的HT29細(xì)胞注射至小鼠脾臟上、下極，3周后獲得肝轉(zhuǎn)移瘤，將形成的腫瘤塊切至8 mm3小塊備用，另取裸鼠暴露其肝臟左葉，將切下的備用腫瘤碎片3 mm3植入肝臟左葉，回納肝左葉并關(guān)腹，從而獲得原位肝轉(zhuǎn)移模型。Hiroshima等[24]將5×105個(gè)綠色熒光蛋白標(biāo)記的HT-29細(xì)胞在無(wú)血清介質(zhì)中清洗2遍后注射到4～5周的胸腺裸鼠脾臟，4周形成多葉肝轉(zhuǎn)移灶后處死裸鼠，獲得結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移腫塊，另取裸鼠在其肝臟左葉下植入3 mm3先前切下的腫瘤碎片，3周形成單側(cè)轉(zhuǎn)移腫瘤。Sánchez-Velázquez等[25]用轉(zhuǎn)移性較差的KM12C人結(jié)腸癌細(xì)胞株皮下植入供體裸鼠體內(nèi)生長(zhǎng)，之后取出形成的腫瘤并切割至2 mm3大小的腫瘤碎片備用，將備用腫瘤碎片植入另一只裸鼠的肝包膜內(nèi)側(cè)并縫合，15 d后結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移瘤長(zhǎng)到適合手術(shù)大小，對(duì)裸鼠施以不同電壓(2 000 V/cm、1 000 V/cm)的不可逆電泳化，以確定高電泳不可逆化處理裸鼠是否能延長(zhǎng)生存期，以及腫瘤組織學(xué)是否發(fā)生改變。

4 門(mén)靜脈種植法

門(mén)靜脈種植法是經(jīng)門(mén)靜脈系統(tǒng)注射結(jié)直腸癌細(xì)胞，經(jīng)過(guò)血行轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟而形成的結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移腫瘤的方法。雖此法不能客觀模擬轉(zhuǎn)移瘤轉(zhuǎn)移的臨床特征，但門(mén)靜脈易顯露，操作較容易，腫瘤形成速度快，形成率高，是較好的研究晚期結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移的方法。Kee等[26]為研究CXC趨化因子配體16對(duì)大腸癌肝轉(zhuǎn)移的影響，在C57BL/6小鼠門(mén)靜脈注射了SL4(對(duì)照組)和SL4CXC趨化因子配體16(細(xì)胞組，7.5×104個(gè)細(xì)胞/200 μL PBS)，17 d后處死小鼠并評(píng)估肝轉(zhuǎn)移情況，結(jié)果顯示，腫瘤源性CXC趨化因子配體16的表達(dá)抑制了肝轉(zhuǎn)移。Hashimoto等[27]通過(guò)門(mén)靜脈將結(jié)腸癌細(xì)胞注射到12周的NOD/Jic雄性小鼠肝臟，分別在4組小鼠的門(mén)靜脈中植入SW480干擾細(xì)胞、SW480 Sh-Prune(h-prune敲低的SW480)、HCT116對(duì)照細(xì)胞和HCT116 Prune(h-prune表達(dá)的HCT116)細(xì)胞。每周通過(guò)體內(nèi)成像記錄腫瘤的生長(zhǎng)情況，4周后評(píng)估肝轉(zhuǎn)移情況。結(jié)果提示，h-prune與腫瘤侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)。

Wu等[28]為確定asporin在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移中的作用，將數(shù)量相等的RKO/NC、RKO/sh1-asporin、HT-29/Vector和HT-29/asporin細(xì)胞注入BALB/c裸鼠的門(mén)靜脈，6周后取出肝臟進(jìn)行分析，結(jié)果顯示,與HT-29/Vector組相比，HT-29/asporin細(xì)胞組肝轉(zhuǎn)移明顯增加，而與RKO/NC相比，RKO/sh1-asporin組的肝轉(zhuǎn)移瘤明顯減少。Bocuk等[29]暴露C57BL/6NCrl雄鼠門(mén)靜脈，用30 G針頭向門(mén)靜脈內(nèi)注射10 μL含有1×107個(gè)CMT-93細(xì)胞的PBS緩沖液，4周后處死小鼠并取出肝臟分析轉(zhuǎn)移情況。Becker等[30]認(rèn)為，肝臟核磁共振能預(yù)測(cè)小鼠結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移，在麻醉小鼠腹部行3 cm切口暴露門(mén)靜脈，將1×105個(gè)MC38細(xì)胞注入8只雄鼠的門(mén)靜脈內(nèi)，另取2只雄鼠注射緩沖溶液作為對(duì)照，注射后的第4、8、12、16和20天采用 T2加權(quán)自旋回波序列行小型動(dòng)物磁共振成像,20 d后磁共振成像顯示出現(xiàn)腫瘤。Tauriello等[31]在BALB/c nu/nu小鼠7周時(shí)，使用30G注射器向門(mén)靜脈內(nèi)直接注射100 μL結(jié)腸癌腫瘤細(xì)胞懸浮液以構(gòu)造結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移模型。

5 小 結(jié)

結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的過(guò)程十分復(fù)雜，小鼠建模方式的選擇需根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求及實(shí)驗(yàn)條件決定。除上述4種常用建模方式外，皮下種植法、尾靜脈種植法、腋窩種植法及腹膜種植法等也是常用的結(jié)直腸癌小鼠造模方式，但這些方法因難以表現(xiàn)出惡性結(jié)直腸癌細(xì)胞向肝臟浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的特性，而不易構(gòu)建出結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型。目前，尚未有一種小鼠模型能與人類(lèi)結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生發(fā)展完全契合，因此需致力于構(gòu)建新的更便捷、更貼近人類(lèi)腫瘤發(fā)展進(jìn)程的動(dòng)物模型，為揭示結(jié)直腸癌發(fā)病、轉(zhuǎn)移機(jī)制及探索治療措施提供有效手段。