徐丹 李晶 肖馳 王儒涵 費晶 鞏平

(石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院腫瘤內科，新疆 石河子 832000)

胃癌(GC)是世界上最常見的惡性腫瘤之一，在所有腫瘤中死亡率占第五位〔1〕，隨著科學技術的發(fā)展，國內外有關GC的最新治療方案逐漸增多，但復發(fā)和轉移仍是影響患者預后的重要因素，也是導致GC患者高死亡率的主要原因〔2〕。因此，研究GC侵襲和轉移的分子機制，將有助于尋求GC診斷和治療的有效靶點。γ突觸核蛋白(SNCG)，也稱為乳腺癌特異性基因(BCSG)1，與α-突觸核蛋白和β-突觸核蛋白一樣，它屬于突觸核蛋白基因家族〔3〕。SNCG蛋白含有127個氨基酸，是一種天然的未折疊蛋白。研究顯示，SNCG在許多腫瘤組織中過表達，并與其臨床病理特征密切相關〔4,5〕。但不同文獻對于SNCG表達對胃腫瘤浸潤深度、淋巴結轉移等的影響研究結論尚不一致，每篇文獻研究病例數(shù)相對較少，且SNCG表達與GC臨床病理特征的Meta分析目前尚無相關報道。本研究Meta分析綜合評價SNCG表達與GC臨床病理特征的相關性。

1 資料與方法

1.1文獻檢索 以PubMed、EmBase、Web of science、Cochrane Library、CNKI、VIP、萬方和CBM作為檢索的主要來源，以γ突觸核蛋白、胃腫瘤等為中文檢索詞，以gamma-Synuclein、Stomach Neoplasms等為英文檢索詞進行檢索，檢索時限為建庫至2019年1月1日。以PubMed檢索為例，詳細的檢索策略如下：#1 Search “Stomach Neoplasms”〔Mesh〕，#2 Search(((((((((((((((((Neoplasm,Stomach〔Title/Abstract〕)OR Stomach Neoplasm〔Title/Abstract〕)OR Neoplasms,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Gastric Neoplasms〔Title/Abstract〕) OR Gastric Neoplasm〔Title/Abstract〕)OR Neoplasm,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Neoplasms,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Cancer of Stomach〔Title/Abstract〕) OR Stomach Cancers〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancer〔Title/Abstract〕) OR Cancer,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Cancers,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancers〔Title/Abstract〕) OR Stomach Cancer〔Title/Abstract〕) OR Cancer,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Cancers,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Cancer of the Stomach〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancer,Familial Diffuse〔Title/Abstract〕，#3 #1 OR #2，#4 Search “gamma-Synuclein”〔Mesh〕，#5 Search((gamma Synuclein〔Title/Abstract〕) OR Persyn〔Title/Abstract〕) OR Synoretin〔Title/Abstract〕，#6 #4 OR #5，#7 #3 AND #6。

1.2納入與排除標準 納入標準：1)國內外公開發(fā)表的論著和學位論文，提供包含SNCG與GC臨床病理特征相關性的原始數(shù)據(jù)；2)所有的病例取材前均未經(jīng)化療、放療及其他可能對SNCG表達有影響的治療，實驗組均為通過病理學或細胞學檢查明確診斷為GC的患者，對照組均為癌旁正常組織或正常組織。3)各文獻所用的實驗方法均為免疫組化法；4)觀察性研究(病例對照或隊列研究)；5)統(tǒng)計方法應用恰當，數(shù)據(jù)質量可靠，有或可計算出OR值及95%CI。排除標準：1)綜述，評論，會議摘要類文章；2)評價指標的界定系數(shù)不符合本文標準；3)重復報告或者資料雷同；4)采用免疫組化法以外的方法進行檢測的文章；5)非人類實驗。

1.3原始文獻篩選和資料提取 篩選文獻由2名研究者按照納入排除標準獨立完成資料提取并交叉核對，如遇意見不合時，則通過討論或參考第3位研究者的意見。數(shù)據(jù)提取主要包括作者研究者姓名、發(fā)表時間、病例組和對照組的數(shù)量、表達陽性數(shù)量等。如果是同一作者或單位的報道，則僅保留病例數(shù)最大、最全的文獻。

1.4文獻質量評價 對納入研究的方法學質量進行紐卡斯爾-渥太華量表(NOS)量表評分，評價內容主要包括3個方面：選擇、可比性和暴露。每個研究的評價得分為0～9分，由2位評價員按照上述標準獨立進行，遇意見不合者，則經(jīng)過討論解決或參考第三者意見。

1.5統(tǒng)計學方法 使用Review Manager 5.3進行Meta分析，對于SNCG的表達及與GC臨床病理特征的相關性，計算OR值及95%CI作為分析統(tǒng)計量，采用χ2檢驗對資料進行異質性檢驗，如P≥0.05，I2≤50%，則各研究間統(tǒng)計學異質性較小，可采用固定效應模型；若P<0.05，I2>50%，則認為研究間存在異質性，則選用隨機效應模型，并采用逐一排除研究的方法進行敏感性分析。此外，當Meta分析納入文獻≥10個時使用漏斗圖來判斷是否存在發(fā)表偏倚〔6〕。

2 結 果

2.1文獻篩選過程 根據(jù)關鍵詞初步檢索出文獻104篇，根據(jù)文獻題目與摘要剔除重復文獻35篇，進而剔除非人類實驗、綜述類、會議類及不相關的文題及摘要共計53篇，余下文獻通過閱讀全文后排除內容重復、檢測方法為非免疫組化法的文獻11篇，最終根據(jù)納入和排除標準選取出符合要求的5篇文獻〔7～11〕。根據(jù)《PRISMA聲明》文獻篩選流程圖如圖1。

圖1 薈萃分析中選擇研究的流程

2.2納入研究的基本特征 標準與排除標準納入5篇研究文獻。納入文獻中4個研究〔8～11〕分析SNCG在GC和正常胃黏膜組中的表達相關關系，共395例腫瘤組織，185例正常胃黏膜組。見表1。

表1 薈萃分析中包含的研究特征

2.3Meta分析結果

2.3.1SNCG表達在GC和正常胃黏膜組中的表達水平分析 4個文獻〔8～11〕納入資料中GC組SNCG陽性表達256例，正常胃黏膜組SNCG陽性表達31例。對入選研究的結果進行異質性檢驗，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=12.52，df=3，P=0.006)；I2=76%，研究間異質性較大。采用隨機效應模型合并數(shù)據(jù)。結果顯示，兩組間差異有統(tǒng)計學意義(OR=18.47，95%CI：4.20～81.12，P=0.000 1)，表明SNCG在GC中高表達，見圖2。

圖2 SNCG表達在GC和正常胃黏膜組中的表達陽性率比較

2.3.2SNCG表達與GC年齡的相關性分析 按照60歲年齡分組標準納入2個研究〔7，11〕。其中年齡組<60歲156例，≥60歲162例，研究間無統(tǒng)計學異質性(P=0.85，I2=0%)，故采用固定效應模型合并數(shù)據(jù)，結果顯示，兩組間SNCG表達比較差異無統(tǒng)計學意義(OR=0.77，95%CI：0.48～1.24，P=0.28)。見圖3。

圖3 SNCG表達與GC患者年齡的相關性

2.3.3SNCG表達與GC患者浸潤深度的相關性 根據(jù)國際腫瘤TNM分期為標準：GC以腫瘤侵犯至固有肌層及以內即T1和T2作為淺浸潤組；腫瘤穿透漿膜下結締組織及以外即T3和T4作為深浸潤組。共有4篇文獻〔7～9，11〕納入本項Meta分析，其中淺層浸潤組(T1+T2)133例，深層浸潤組(T3+T4)332例，研究間異質性檢驗，無統(tǒng)計學異質性(χ2=5.8，P=0.12，I2=48%)，故采用固定效應模型進行Meta分析，SNCG表達差異有統(tǒng)計學意義(OR=0.25，95%CI為0.16～0.40，P<0.000 01)。見圖4。

2.3.4SNCG表達與GC患者分化程度的相關性 共有4篇文獻〔7～9，11〕納入本項Meta分析。其中高中分化有212例，低分化、印戒及黏液細胞癌有253例，異質性分析顯示，無統(tǒng)計學異質性(χ2=5.94，P=0.11，I2=49)，故采用固定效應模型進行分析。結果顯示，兩組SNCG表達差異無統(tǒng)計學意義(OR=0.79，95%CI為0.53～1.18，P=0.25)，故SNCG表達與GC的分化程度無相關性。見圖5。

2.3.5SNCG表達與GC患者有無淋巴結轉移的相關性分析 共有5篇文獻〔7～11〕納入本項Meta分析。其中無淋巴結轉移的有173例，有淋巴結轉移的有312例，GC內部存在統(tǒng)計學異質性(χ2=11.94，P=0.008，I2=75%)，故采用隨機效應模型進行Meta分析。結果顯示，兩組SNCG表達差異有統(tǒng)計學意義(OR=0.19，95%CI為0.07～0.51，P=0.000 9)，故SNCG表達與GC患者有無淋巴結轉移相關。見圖6。

2.3.6SNCG表達與GC患者臨床分期的相關性研究 共有2篇文獻〔7，9〕納入本項Meta分析。其中臨床Ⅰ～Ⅱ期有49例，臨床Ⅲ～Ⅳ 期有101例，內部無統(tǒng)計學異質性(χ2=0.00，P=0.99，I2=0%)，故采用固定效應模型進行Meta分析，GC兩組SNCG表達差異有統(tǒng)計學意義(OR=0.03，95%CI為0.01～0.08，P<0.000 01)。見圖7。

圖4 SNCG表達與GC患者浸潤深度的相關性

圖5 SNCG表達與GC患者分化程度的相關性

圖6 SNCG表達與GC患者有無淋巴結轉移的相關性

圖7 SNCG表達與GC患者臨床分期的相關性

2.4納入研究的偏倚評估及敏感性分析 所有納入文獻采用逐一排除的方法進行敏感性分析，任一納入的研究被排除后在相應的效應模型中數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析結果與原來的相同，OR值相似，說明納入文獻穩(wěn)定性較好。

3 討 論

SNCG主要分布于神經(jīng)系統(tǒng)。SNCG最早發(fā)現(xiàn)于人乳腺癌cDNA文庫，已在乳腺癌中證實其具有促進乳腺癌浸潤和轉移的作用〔12〕。近來在膽管癌、卵巢癌和結直腸癌等惡性腫瘤中也發(fā)現(xiàn)SNCG的異常高表達，在晚期腫瘤中表達尤其升高，提示其在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中喪失了原先的組織特異性，有望成為一個有效的腫瘤標志物。因此，高表達的SNCG是一種潛在的癌基因，是引發(fā)腫瘤的重要原因之一。目前國內外資料均顯示，過表達的SNCG不僅參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，還與腫瘤的侵襲、轉移和預后密切相關〔7～14〕。本研究提示SNCG過表達對GC淋巴結轉移有促進作用。Hibi等〔15〕通過體內研究表明，SNCG與胰腺癌患者的神經(jīng)周圍侵襲及其他主要侵襲參數(shù)(包括腫瘤大小、血管侵犯、淋巴結轉移和UICC分期)顯著相關，此外，使用人胰腺癌細胞系進行神經(jīng)侵襲和原位移植的小鼠模型中的SNCG基因沉默與神經(jīng)侵襲及肝和淋巴結轉移(胰腺癌細胞的主要歸巢器官)的顯著減少相關，與本研究結果一致。而2008年董勇〔16〕在乳腺癌的研究提示，雌激素受體(ER)及SNCG狀況與新輔助化療療效相關，通過多因素Logistic回歸進一步闡明SNCG與乳腺癌新輔助化療敏感性之間有著顯著聯(lián)系。所以，以SNCG為靶點的靶向治療可能在胃腫瘤綜合治療中取得一定突破。

除了Stata、SPSS等Meta分析常用軟件外，Revman5.3軟件作為Cochrane系統(tǒng)評價的標準化軟件，特點包括操作簡單，可對錄入的計數(shù)資料、計量資料等不同類型數(shù)據(jù)進行Meta分析，并以森林圖的形式展示〔17〕。關于SNCG表達與GC臨床病理關系的這5篇文獻采用Revman5.3軟件，各文獻代表性良好。本研究的局限性在于雖然納入研究的方法為免疫組化法，但是該方法涉及的抗體來源、生產(chǎn)廠家、稀釋濃度及評定標準并非完全一致，也有可能影響Meta分析的結果，因此需要高質量的證據(jù)來完善該結果。

綜上，本研究結果顯示，過表達的SNCG與GC的浸潤深度，臨床分期，淋巴結轉移相關，此結果將可能為GC的早期診斷、預后評估及分子靶向治療奠定基礎。