陳美安，林春花，張欣影

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001)

蘭香草為馬鞭草科蕕屬植物蘭香草[Caryopterisincana(Thunb.)Miq.]的全草或帶根全草，別名婆絨花、石母草、段菊等[1]，在我國(guó)主要分布于廣西、廣東、江蘇、安徽、浙江、福建、江西、湖北、湖南等地[2]，具有疏風(fēng)解表，祛寒除濕，散瘀止痛等功效，可用于治療風(fēng)寒感冒、百日咳、慢性支氣管炎、肝炎、胃腸炎、皮膚瘙癢、胃痛、腹痛、跌打腫痛、風(fēng)濕痹痛、外傷出血、產(chǎn)后淤血及瘡癤痛腫等，在民間一般作為草藥使用[3-4]?，F(xiàn)代藥理研究表明，蘭香草具有抗菌、止血、鎮(zhèn)咳、祛痰等作用[4-6]。目前國(guó)內(nèi)外針對(duì)蘭香草的相關(guān)研究甚少，而其化學(xué)成分也鮮有報(bào)道。中藥化學(xué)成分的系統(tǒng)預(yù)實(shí)驗(yàn)即是采用定性實(shí)驗(yàn)及薄層層析等方法，對(duì)中藥中各類化學(xué)成分進(jìn)行比較全面的檢查，然后進(jìn)行綜合分析，以初步判斷含有的化學(xué)成分類型。因此，本文對(duì)蘭香草的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)預(yù)實(shí)驗(yàn)，以明確其可能含有的化學(xué)成分，為蘭香草活性成分的深入研究奠定基礎(chǔ)，并為蘭香草的開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 藥 材

蘭香草，采自廣西宜州，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室的朱意麟實(shí)驗(yàn)師鑒定為馬鞭草科蕕屬植物蘭香草Caryopterisincana(Thunb.) Miq.的干燥全草，陰干，粉碎成粗粉，備用。

1.2 試 劑

95%乙醇(分析純)，成都市科隆化學(xué)品有限公司；石油醚(分析純，60～90 ℃)，成都市科隆化學(xué)品有限公司；其余試劑，包括茚三酮試劑、雙縮脲試劑、Molisch試劑、Fehling試劑、氯化鈉明膠試劑、1% FeCl3試劑、溴甲酚綠試劑、鹽酸-鎂粉試劑、三氯化鋁試劑、乙酸鎂試劑、異羥肟酸鐵試劑、耦合試劑、3,5-二硝基苯甲酸實(shí)驗(yàn)、亞硝?；F氰化鈉試劑、堿性苦味酸試劑、碘化鉍鉀試劑、硅鎢酸試劑、碘化汞鉀試劑等均為自制。

1.3 主要儀器

AJ150電子分析天平，瑞士梅特勒；HWS-24型電熱恒溫水浴鍋，上海齊欣科學(xué)儀器有限公司；UV_1780型紫外分光光度計(jì)，島津(蘇州)有限公司；優(yōu)普純水儀，四川優(yōu)普超純科技有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品溶液的制備

2.1.1 水提取液的制備

取蘭香草藥材粗粉10 g，置于具塞三角錐型瓶中，加水100 mL，冷浸24 h，濾過(guò)，取10 mL濾液為冷水提取液，做氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)的檢查。剩余藥渣在60 ℃水浴鍋上加熱 0.5 h，過(guò)濾，得熱水提取液，做糖、多糖、苷類、皂苷、鞣質(zhì)、有機(jī)酸等檢查。

2.1.2 乙醇提取液的制備

取蘭香草藥材粗粉10 g，加95%乙醇100 mL，加熱回流 1 h，過(guò)濾，濾液分成兩份，一份作為乙醇提取液，做黃酮、蒽醌、酚、香豆素、內(nèi)酯、萜類、強(qiáng)心苷、甾體等檢查；另一份將乙醇液濃縮至無(wú)醇味，加5% HCl溶解，過(guò)濾，得酸水溶液，做生物堿檢查。

2.1.3 石油醚提取液的制備

取蘭香草藥材粗粉1 g，置于具塞三角錐形瓶中，加石油醚10 mL，冷浸3 h，過(guò)濾，濾液即為石油醚提取液，做油脂、揮發(fā)油檢查。

2.2 化學(xué)成分預(yù)實(shí)驗(yàn)[7-10]

采用化學(xué)反應(yīng)鑒別法對(duì)蘭香草藥材進(jìn)行化學(xué)成分預(yù)試，結(jié)果如表1～表2所示，蘭香草中可能含有氨基酸、糖、多糖、苷類、皂苷、鞣質(zhì)、有機(jī)酸、黃酮類、蒽醌類、酚類、香豆素類、甾體類、三萜類、生物堿、揮發(fā)油等化學(xué)成分。

2.2.1 蘭香草水提取液預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表1 水提取液預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

注：“ + ”示有此反應(yīng)；“ -”示無(wú)此反應(yīng)。

2.2.2 蘭香草乙醇提取液預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 乙醇提取液預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

續(xù)表2

香豆素與內(nèi)酯異羥肟酸鐵實(shí)驗(yàn)紫紅色+偶合反應(yīng)紫色+熒光實(shí)驗(yàn)無(wú)熒光-強(qiáng)心苷3,5-二硝基苯甲酸實(shí)驗(yàn)無(wú)明顯顏色變化-亞硝酰鐵氰化鈉試液無(wú)明顯顏色變化-堿性苦味酸實(shí)驗(yàn)無(wú)明顯顏色變化-甾體或三萜類醋酐-濃硫酸實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生黃→紅→紫→藍(lán)→綠→污綠等顏色變化,最后褪色+氯仿-濃硫酸實(shí)驗(yàn)氯仿層呈青色,濃硫酸層顯綠色熒光+生物堿碘化汞鉀試劑淡黃綠色沉淀+碘化鉍鉀試劑淡黃綠色沉淀+硅鎢酸試劑淡黃綠色沉淀+

注：“ + ”示有此反應(yīng)； “ -”示無(wú)此反應(yīng)。

2.2.3 蘭香草石油醚提取液預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

油斑實(shí)驗(yàn)：將樣品石油醚提取液滴在濾紙上，濾紙上有油斑，此油斑加熱后消失，提示樣品可能含有揮發(fā)油。

3 結(jié) 論

中草藥中所含有的化學(xué)成分是相當(dāng)復(fù)雜的，本文通過(guò)系統(tǒng)性化學(xué)成分預(yù)實(shí)驗(yàn)，初步確定了蘭香草藥材中可能含有氨基酸、糖、多糖、苷類、皂苷、鞣質(zhì)、有機(jī)酸、黃酮類、蒽醌類、酚類、香豆素類、甾體類、三萜類、生物堿、揮發(fā)油等多種化學(xué)成分，為蘭香草進(jìn)一步活性成分的提取、分離、純化以及藥理活性研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

本實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)便、可行，結(jié)果可靠。在操作過(guò)程中，① 為了減少實(shí)驗(yàn)的誤差，每個(gè)鑒別實(shí)驗(yàn)均平行做3份，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確；② 檢測(cè)時(shí)，樣品溶液的濃度應(yīng)達(dá)到各反應(yīng)的靈敏度；③ 水提取液和乙醇提取液顏色較深，有些反應(yīng)現(xiàn)象不明顯，影響到判斷效果，這時(shí)可以考慮適當(dāng)稀釋，或者進(jìn)一步提純；④ 某些鑒別反應(yīng)是幾種不同類型的化學(xué)成分所共有的反應(yīng)，又有些結(jié)果由于各化學(xué)成分之間可能會(huì)產(chǎn)生相互干擾使得結(jié)果不夠明顯甚至不正確，這時(shí)最好同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)。