李 俊，黎云清，盧汝梅，韋建華，廖廣鳳，李 兵

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001)

炎癥主要指活體組織對(duì)于各種損害因子所發(fā)生的防御性反應(yīng)，一般表征為紅、熱、腫、痛。大量的研究表明，中草藥的抗炎機(jī)制是主要影響炎癥介質(zhì)的相關(guān)性[1]?？寡最惿飰A一般是環(huán)狀結(jié)構(gòu)，氮原子位于環(huán)內(nèi)，具有與酸成鹽，顯著的生理特點(diǎn)，主要包括苯丙氨酸和酪氨酸系生物堿、萜類生物堿、色氨酸系生物堿、甾體類生物堿、組氨酸系生物堿、鳥(niǎo)氨酸系生物堿、賴氨酸系生物堿。

研究生物堿類具有抗炎活性的化學(xué)成分，為預(yù)防與治療各種相關(guān)炎癥性的疾病，具有十分重要的意義。

1 苯丙氨酸和酪氨酸系生物堿

1.1 苯丙胺類生物堿

He W等[2]研究從麻黃堿中提取的鹽酸麻黃堿(EH)在巨噬細(xì)胞中的抗炎活性，同時(shí)評(píng)價(jià)了EH對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞的功能(DCs)的抗炎與調(diào)節(jié)活性。研究顯示：EH可增加肽聚糖(PGN)刺激的樹(shù)突狀細(xì)胞產(chǎn)生抗炎細(xì)胞因子IL-10，且降低促炎細(xì)胞因子TNF-α與IL-12的產(chǎn)生，抑制金黃色葡萄球菌引起的炎癥細(xì)胞因子過(guò)度表達(dá)，具有一定的抗炎作用。

戴貴東等[3]采用二甲苯誘發(fā)小鼠耳廓腫脹的方法探討偽麻黃堿(Pseudoephedrine )的抗炎作用。結(jié)果顯示，高劑量偽麻黃堿對(duì)小鼠耳廓腫脹度的抑制率為92.7%(P <0.05 )，具有良好的抗炎作用。吳桂榮等[4]通過(guò)二甲苯小鼠抗炎造模實(shí)驗(yàn)觀察得知，大劑量的藥物可顯著性抑制二甲苯誘導(dǎo)的小鼠炎癥(P<0.01)。在100～200 mg·kg-1均不同程度地抑制角叉菜膠所致大鼠炎癥反應(yīng)，提示偽麻黃堿水楊酸鹽對(duì)炎癥具有良好的抑制作用。

賈寧等[5]采用蛋清、羧甲基纖維素與棉球致炎的方法，研究秋水仙堿(colchicine)的抗炎作用。通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法比較腹腔注射和灌胃對(duì)造模大鼠炎癥的影響。結(jié)果顯示，秋水仙堿對(duì)急性和亞急性炎癥具有較好的治療效果。且腹腔注射秋水仙堿可顯著抑制蛋清與羧甲基纖維素誘導(dǎo)的大鼠炎癥反應(yīng)。

李萬(wàn)等[6]采用大鼠角叉菜膠性足趾腫和肉芽腫誘導(dǎo)的炎癥模型，對(duì)益母草堿(Leonurus)進(jìn)行抗炎研究。結(jié)果顯示，益母草堿對(duì)角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠滲出性炎癥與肉芽腫形成的慢性炎癥，均具有顯著的抑制作用(P<0.01)。結(jié)論指出：益母草總生物堿具有顯著的抗炎鎮(zhèn)痛作用。

1.2 異喹啉類生物堿

1.2.1 普通異喹啉類

Qi W等[7]從伏生紫堇屬植物夏天無(wú)(RHIZOMA CORYDALIS DECUMBENTIS)中分離得到生物堿1R,9S,7’S-O-methylegenine(a1)與兩種新的生物堿：1S,9R,7’S-O-methyl egenine(a2)和1S,9S,7’S-O-methylegenine(a3)。研究顯示：a1，a2，a3對(duì)大鼠多形核白細(xì)胞(PMN)釋放β-葡萄糖醛酸酶的抑制率分別為41.3%，35.6%，32.4%。結(jié)論表明，三種化合物均具有潛在的抗炎活性，可望用于開(kāi)發(fā)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎新藥。這與夏天無(wú)中臨床應(yīng)用風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎坐骨神經(jīng)痛密切相關(guān)。

Yan W等[8]從延胡索中分離得到紫堇生物堿(CA)，通過(guò)代謝組學(xué)結(jié)合體內(nèi)外相關(guān)研究分析，探討CA的抗炎作用及可能的機(jī)制。采用后足皮下注射福爾馬林誘導(dǎo)小鼠的急性炎癥反應(yīng)，通過(guò)檢測(cè)足腫脹指數(shù)評(píng)價(jià)CA的抗炎作用，同時(shí)在體外檢測(cè)相關(guān)的靶基因iNOS、NF-κB、TNF-α。結(jié)果顯示，CA對(duì)小鼠的足腫脹具有顯著的抗炎作用，抑制了NF-κB，TNF-α 的表達(dá)。臨床上可能成為替代阿司匹林的新型抗炎藥物，為CA的臨床應(yīng)用和抗炎新藥的開(kāi)發(fā)提供了理論依據(jù)。

1.2.2 嗎啡烷型生物堿

李鑫等[9]采用角叉菜膠模型來(lái)評(píng)價(jià)青藤堿(Sinomenine)的抗炎作用。結(jié)果表明：青藤堿中各劑量均能顯著降低角叉菜膠所致炎大鼠足組織TNF-α 與IL-1β 含量；在200～400 mg·kg-1可顯著降低PEG2含量；400 mg·kg-1時(shí)可顯著降低5-HT含量(P<0.05，P<0.01)。發(fā)現(xiàn)青藤堿具有良好的抗炎作用，其機(jī)制可能與抑制促炎因子TNF-α，IL-1β，PEG2和5-HT有關(guān)。

李曉娟等[10]選擇具有正常巨噬細(xì)胞顯著特征的7J74巨噬細(xì)胞株進(jìn)行體外培養(yǎng)，觀察藥物青藤堿對(duì)于細(xì)胞株增殖、腫瘤壞死因子-α信使核糖核酸(TNF-α MRNA)以及NO合成等多靶點(diǎn)表達(dá)的影響。結(jié)果顯示，青藤堿在1 mmol/L對(duì)細(xì)胞株的增殖具有顯著的抑制，在1 mmol·L-1對(duì)TNF-a蛋白合成具有顯著的抑制作用，抑制率為93.64%；在500～1000 μmol·L-1可抑制LPS刺激下NO的合成。結(jié)論證實(shí)，青藤堿的抗炎作用明顯，且其主要作用靶點(diǎn)可能集中在蛋白質(zhì)的合成水平。

葉仙蓉等[11]通過(guò)修飾青藤堿中的C環(huán)衍生了7種化合物，通過(guò)巴豆油誘導(dǎo)小鼠耳腫脹和大鼠角叉菜膠足腫脹法篩選抗炎活性。結(jié)果顯示：化合物7 β-甲氧基-二氫-青藤堿(a4)和化合物6,7-雙羥基-7,8-二氫-青藤堿(a5)對(duì)小鼠腫脹抑制率分別為0.82和1.18，均表現(xiàn)出良好的抗炎活性。

圖1 異喹啉類生物堿新化合物結(jié)構(gòu)

1.2.3 小檗堿和原小檗堿類生物堿

小檗堿(Berberine)是從中藥黃連、黃柏和三顆針等小檗科植物中提取的異喹啉類生物堿，且文獻(xiàn)中對(duì)于小檗堿的抗炎機(jī)制報(bào)道較多。李宇馨等[12]通過(guò)觀察小檗堿對(duì)小鼠甲醛誘導(dǎo)的足腫脹炎癥組織中前列腺素(PGE2)的影響，研究小檗堿的抗炎作用。以吲哚美辛為陽(yáng)性組，小檗堿低中高量給藥比較差異。結(jié)果顯示，吲哚美辛組及小檗堿中、高劑量組PGE2含量較低，均能顯著降低炎癥組織中PGE2的含量，結(jié)論指示，小檗堿的抗炎機(jī)制可能與減少炎癥組織中的PGE2含量有關(guān)。

郝鈺等[13]通過(guò)研究小檗堿對(duì)白細(xì)胞介素-1(IL-1)、腫瘤壞死因子(TNF)誘導(dǎo)的多形核白細(xì)胞(PMN)與血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附及粘附分子表達(dá)的影響，探討小檗堿抗炎作用及其機(jī)制。結(jié)果顯示，小檗堿與IL-1或TNF共同處理HUVEC，可抑制IL-1和TNF激活的內(nèi)皮細(xì)胞與PMN的粘附。小檗堿與TNF共同處理PMN，能抑制TNF誘導(dǎo)的PMN與HUVEC的粘附增強(qiáng)。結(jié)論指出，小檗堿可通過(guò)抑制炎癥發(fā)生時(shí)PMN與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附而抑制炎癥反應(yīng)。

研究[14]通過(guò)比較小檗堿和小檗紅堿在葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎模型的治療作用，探討其潛在的作用機(jī)制。通過(guò)宏觀評(píng)分、炎癥標(biāo)志物和炎癥細(xì)胞因子生成來(lái)評(píng)估二者在DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎中的保護(hù)作用及機(jī)制。結(jié)果顯示小檗紅堿(20 mg·kg-1)與小檗堿(50 mg·kg-1)及陽(yáng)性對(duì)照柳氮磺胺吡啶(200 mg·kg-1)相比，可顯著降低疾病活動(dòng)指數(shù)。結(jié)論指出，小檗紅堿治療可明顯改善DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸病變，減輕炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、抑制髓過(guò)氧化物酶(MPO)和細(xì)胞炎性因子(TNF-α)，具有良好的抗?jié)冃越Y(jié)腸炎的效果，可望代替小檗堿進(jìn)行臨床上抗炎藥物的應(yīng)用。

黃藤堿是一類可作為治療腸炎、胃炎、慢性子宮內(nèi)膜炎等各種炎癥的藥物，具有強(qiáng)的抗炎活性。Baoqi Yan等[15]研究黃藤堿(Palmatine)對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的山羊子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞(g EECs)炎癥影響及其作用機(jī)制，采用ELISA，qRT-PCR和Western blotting檢測(cè)培養(yǎng)液中炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生。結(jié)果表明黃藤堿可抑制腫瘤壞死因子(TNF-α)，白細(xì)胞介素(IL-1β，IL-6)，一氧化氮(NO)等細(xì)胞因子的釋放，同時(shí)黃藤堿能促進(jìn)前列腺素E2(PGE2)和IL-10的分泌，且顯著下調(diào)LPS誘導(dǎo)EECs中Toll樣受體4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)等的表達(dá)。結(jié)論指出，黃藤堿可顯著減少LPS誘導(dǎo)的山羊子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)。

1.2.4 雙芐基異喹啉類生物堿

姚茹[16]通過(guò)建立脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的RAW 264.7巨噬細(xì)胞及其LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷和佛波酯(TPA)誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹的炎癥模型，研究蓮心堿的抗炎活性與機(jī)制。采用Griess檢測(cè)NO的濃度，利用ELISA檢測(cè)前列腺素2(PGE2)的濃度和促炎性細(xì)胞因子的水平；免疫印跡法檢測(cè)NF-κB和MAPKs 炎性信號(hào)通路、PCR檢測(cè)炎性基因環(huán)氧化酶-2(COX-2)和誘導(dǎo)性NO和酶(iNOS)mRNA的表達(dá)。結(jié)果顯示，可下調(diào)炎性基因中iNOS與COX-2中mRNA表達(dá)。進(jìn)一步動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明蓮心堿可改善LPS誘導(dǎo)的小鼠炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，且顯著降低促炎性細(xì)胞因子TNF-α、IL-6與IL-1β的含量。該研究從分子機(jī)制與動(dòng)物水平上證明了蓮心堿的抗炎活性。

張樂(lè)之等[17]通過(guò)膜腔注射角叉菜膠致小鼠胸膜炎模型，分別測(cè)定炎癥白細(xì)胞cAMP濃度、磷酸二酯酶(PDE)活性及胞質(zhì)內(nèi)游離鈣的濃度等，研究粉防己堿(tetrandrine)的抗炎作用。結(jié)論指出，粉防己堿主要通過(guò)降低炎癥白細(xì)胞Ca2+的濃度而抑制PDE的活性，進(jìn)而增加cAMP的炎癥白細(xì)胞濃度而抑制炎性細(xì)胞的釋放，這可能是粉防己堿重要的抗炎作用機(jī)制之一。

從蝙蝠葛中分離得到的主要活性成分蝙蝠葛堿(Dauricine)已經(jīng)廣泛用于臨床應(yīng)用，但對(duì)于重癥肺炎的作用尚不清楚。Hui Li等[18]研究蝙蝠葛堿對(duì)重癥肺炎的治療作用及其作用機(jī)制。采用H5N1和肺炎鏈球菌(D39)合并誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生嚴(yán)重肺炎。分別通過(guò)ELISA和qRT-PCR法檢測(cè)蝙蝠葛堿逆轉(zhuǎn)TNF-a、IL-6和IL-1b的蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，蝙蝠葛堿可顯著降低TNF-a、IL-6和IL-1b的蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)、并減弱肺組織學(xué)的改變，提示蝙蝠葛堿能明顯抑制肺組織和細(xì)胞中細(xì)胞因子的水平。結(jié)論指出，蝙蝠葛堿對(duì)重癥肺炎具有一定的治療作用。

1.3 芐基苯乙胺類生物堿

研究發(fā)現(xiàn)石蒜堿(Lycorine)劑量依賴性的抑制脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞中的硝酸氧化物合成(iNOS)和環(huán)氧合酶-2(COX-2)蛋白水平[19]。且石蒜堿對(duì)LPS處理的RAW264.7細(xì)胞釋放NO，PGE2，TNF-α和IL-6具有顯著的抑制作用。結(jié)果顯示，石蒜堿可抑制LPS誘導(dǎo)的促炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生并增加LPS誘導(dǎo)后小鼠的存活率，發(fā)揮著一定的抗炎作用。

2 萜類生物堿

2.1 單萜類生物堿

通過(guò)研究龍膽堿(GE)對(duì)Freund’s完全佐劑(FCA)誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)炎的影響[20]，采用FCA誘導(dǎo)大鼠關(guān)節(jié)炎癥模型，雙氯芬酸鈉(DS)和法舒地爾作為陽(yáng)性對(duì)照，并測(cè)定了足后爪的體積，同時(shí)進(jìn)行免疫蛋白印跡分析。結(jié)果顯示，GE對(duì)后爪的腫脹有明顯的抑制作用，炎癥細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-6(IL-6)，白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達(dá)顯著降低，有助于治療急性和慢性關(guān)節(jié)炎癥，有望成為臨床上潛在的抗關(guān)節(jié)炎藥物。

2.2 倍半萜類生物堿

Chang G等[21]從雷公藤根中分離出5種新的倍半萜吡啶類生物堿，通過(guò)測(cè)定LPS誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7產(chǎn)生的NO，評(píng)價(jià)所有化合物的抗炎活性。研究發(fā)現(xiàn)：化合物triptersinine S(b1)、9＇-O-Acetyl-7-deacetoxy-7-oxowilfortrine(b2)對(duì)巨噬細(xì)胞釋放NO具有顯著的抑制作用，特別是b2，被鑒定為最有前途的候選物，用于進(jìn)一步科學(xué)研究它們作為抗炎劑的潛在用途。

有學(xué)者從雷公藤莖中分離到兩個(gè)新的倍半萜吡啶生物堿[22]，即dimacroreg-elines A和dimacroregelines B(b3)。這兩種化合物的結(jié)構(gòu)通過(guò)廣泛的1D和2D NMR光譜分析，采用單因素方差分析化合物對(duì)人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞(MH7A)細(xì)胞增殖的抑制作用。研究表明，b3在20 μM濃度下對(duì)人類類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞增殖有抑制作用，具有一定的抗炎作用。

Zhi-Fei W等[23]研究石杉?jí)A甲(Huperzine-A)對(duì)大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞腦缺血模型的保護(hù)作用。結(jié)果顯示，石杉?jí)A甲除了抑制乙酰膽堿(AChE)活性外，還抑制了轉(zhuǎn)錄因子核因子κB的核轉(zhuǎn)位，降低了促炎細(xì)胞因子的過(guò)度表達(dá)。這些結(jié)果證實(shí)了石杉?jí)A甲對(duì)局灶性腦缺血的保護(hù)作用與膽堿能抗炎通道有關(guān)，且其重要的機(jī)制可能是石杉?jí)A甲抑制AChE的活性。

2.3 二萜類生物堿

朱凡等[24]采用乙醇注射法制備烏頭堿質(zhì)體，并用二甲苯誘發(fā)的耳腫脹法誘導(dǎo)炎癥模型研究其抗炎作用。結(jié)果表明，烏頭堿醇質(zhì)體對(duì)二甲苯致炎的抑制率大于30%，其對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹有顯著的抑制作用，臨床上可用于風(fēng)濕與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疾病的治療。王鵬等[25]采用大鼠角叉菜膠致足腫脹與小鼠甲醛致痛模型，考察紫杉醇脂質(zhì)體的抗炎鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果顯示各給藥組均可明顯抑制致炎足趾的腫脹程度(P<0.05)，且小鼠舔足次數(shù)也明顯降低(P<0.05)。結(jié)論顯示，紫杉醇脂質(zhì)體凝膠劑量在(1.5～6 mg·kg-1)內(nèi)，可有效降低模型大鼠足趾腫脹程度，指出紫杉醇脂質(zhì)體具有明顯的鎮(zhèn)痛抗炎作用，同時(shí)也為臨床應(yīng)用抗炎藥新劑型提供途徑。

通過(guò)對(duì)C18-和C19-二萜類生物堿的抗炎鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行探討[26]。從烏頭根中分離出三種C19-二萜類生物堿，0.1～10 mg·kg-1給藥皮下注射劑量范圍內(nèi)，顯示出良好的活性，抑制率為77.8%～94.1%。研究顯示8-O-deacetyl-8-O-ethylcrassicauline A(b4)和8-O-ethylyunaconitine(b5)兩種化學(xué)成分的抗炎鎮(zhèn)痛效果最佳。

Duan XY等[27]從大頭烏頭中分離得到兩個(gè)新的C20二萜生物堿Bulyayina A (b6)和Bulyayina B。研究了二者對(duì)LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞NO的影響。生物活性試驗(yàn)表明b6對(duì)脂多糖(LPS)激活的RAW264.7巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO具有顯著的抑制作用，體外用藥100 μg·mL-1時(shí)抑制率為74.60%。研究指出，b6具有良好的抗炎活性。

Ruihua G等[28]從烏頭(Aconitum iochanicum)中分離得到兩個(gè)新的C19二萜生物堿，分別為7,8-epoxy-franchetine(b7)和N(19)-en-austroconitine A(b8)。研究表明，兩種新化合物(40 μmol·L-1)對(duì)LPS激活的RAW264.7巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO分別顯示為27.3%和29.2%的抑制率，具有一定的抗炎活性。

圖2 萜類生物堿新化合物結(jié)構(gòu)

3 色氨酸系生物堿

3.1 色胺吲哚類

Yuan S M等[29]研究吳茱萸堿(Evodiamine)對(duì)轉(zhuǎn)基因小鼠模型中阿爾茨海默病的影響。使用ELISA檢測(cè)腦組織中IL-1β，IL-6和TNF-α 的表達(dá)水平，使用Western印跡測(cè)定COX-2蛋白的表達(dá)。結(jié)果證實(shí)吳茱萸堿可顯著降低參與阿爾茨海默病炎癥反應(yīng)的IL-1β，IL-6，TNF-α 和COX-2的表達(dá)，改善阿爾茨海默病轉(zhuǎn)基因模型的認(rèn)知能力。

滕之穎等[30]采用AOM建立炎癥相關(guān)性結(jié)腸癌小鼠模型，采用DSS誘導(dǎo)持續(xù)炎癥反應(yīng)，比較小鼠結(jié)直腸癌長(zhǎng)度，腫瘤數(shù)目與大小，通過(guò)免疫組化法檢測(cè)COX-2和PCNA的表達(dá)。探討吳茱萸堿對(duì)結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)直腸癌的預(yù)防作用。結(jié)論顯示，吳茱萸堿可減弱組織炎癥的水平與細(xì)胞之間的異常增殖，有效改善模型小鼠脫肛，便血等癥狀，增加模型小鼠的存活率，腫瘤細(xì)胞數(shù)量顯著減少，指出吳茱萸堿具有抑制炎癥相關(guān)性結(jié)腸癌反應(yīng)的作用。

Zhongyan Z等[31]通過(guò)探討吳茱萸堿可能的抗?jié)冏饔眉捌渥饔脵C(jī)制，結(jié)果顯示：給藥組與模型組比較，胃粘膜病變明顯減輕。吳茱萸堿預(yù)處理可降低血清中前列腺素E2(PGE2)、白細(xì)胞介素6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF)的含量。且可顯著提高血清谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)的含量。吳茱萸組對(duì)Rho、胞漿和核NF-KBP65等的蛋白具有明顯的抑制作用。結(jié)論表明吳茱萸堿抗小鼠胃潰瘍機(jī)制可能與通過(guò)Rh/NF-κB途徑改善抗氧化劑和抗炎狀態(tài)有關(guān)。

研究學(xué)者從蝙蝠葛莖提取物中分離得到兩個(gè)新的吲哚生物堿衍生物nauclealise A (c1)，3,14-dihydro-19-O-ethylangustoline (c2)和其他六種已知吲哚生物堿[32]。研究結(jié)果顯示所有分離物對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的NO均有顯著的抑制作用，尤其是c1的抗炎活性最強(qiáng)，具有一定的臨床療效，可作為抗炎藥物的候選化合物。研究從山茱萸的莖葉中分離到一個(gè)新的吲哚生物堿[33]，即17-O-methyl-19-(Z)-naucline (c3)。實(shí)驗(yàn)證明c3在體外對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO具有顯著的抑制作用，且發(fā)現(xiàn)該抑制作用相當(dāng)強(qiáng)(IC50值為8.8 μg·mL-1)。結(jié)論指出該生物堿具有良好的抗炎活性，為我國(guó)抗炎藥臨床應(yīng)用提供新的途徑。

3.2 單萜吲哚類

張則強(qiáng)等[34]研究馬錢(qián)子堿(Strychnine)對(duì)Freund’s完全佐劑所誘導(dǎo)的大鼠免疫性關(guān)節(jié)炎原發(fā)性與繼發(fā)性的影響。計(jì)算致炎前后足跖的腫脹度，結(jié)果顯示，在馬錢(qián)子堿大(16 mg·kg-1)、中(8 mg·kg-1)劑量組對(duì)大鼠佐劑關(guān)節(jié)炎原發(fā)性炎癥病變均有明顯的抑制作用。指出馬錢(qián)子堿具有良好的抑制免疫性關(guān)節(jié)炎原發(fā)與繼發(fā)性變態(tài)反應(yīng)的作用。

李磊等[35]利用二甲苯致小鼠耳殼腫脹的造模方法，研究不同pH對(duì)馬錢(qián)子堿經(jīng)皮吸收速率、油水分配系數(shù)以及抗炎效應(yīng)的影響。結(jié)果顯示，馬錢(qián)子堿在pH=9緩沖液中的經(jīng)皮吸收速率與油水分配系數(shù)均顯著提高，且對(duì)小鼠耳殼腫脹抑制率也明顯增強(qiáng)，且確定抗炎作用的有效劑量為30 mg·kg-1。為臨床應(yīng)用抗炎藥提供新的保障。

通過(guò)探討士的寧(strychnine)對(duì)小鼠空心海綿移植血管生成模型中與相關(guān)的炎癥性血管生成和促炎細(xì)胞因子的顆粒化等關(guān)鍵成分的影響[36]。測(cè)定了血管生成，巨噬細(xì)胞累積相關(guān)炎性與纖維原性細(xì)胞因子等指標(biāo)。結(jié)果顯示，士的寧可減弱了血管組織的主要成分，腫瘤壞死因子(TNF-α)水平和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)等指標(biāo)。結(jié)論指出：士的寧對(duì)炎癥血管具有一定的作用效果。

通過(guò)采用體內(nèi)的抗炎試驗(yàn)對(duì)小鼠角叉菜膠誘導(dǎo)的胸膜炎模型細(xì)胞遷移和滲出進(jìn)行評(píng)估，發(fā)現(xiàn)提取物在400 mg·kg-1劑量下顯示出最佳的抗炎活性[37]。并鑒定出lyaloside ，(E)-O-(6′)-cinnamoyl-4-hydroxy-3,5-dimethoxy-lyaloside，strictosamide，pauridianthoside，vallesiachotamine lactone，E-vallesiachotamine和Z-vallesiachotamine等七種單萜吲哚生物堿。

4 賴氨酸系生物堿

4.1 喹諾里西啶類生物堿

喹諾里西啶類生物堿的數(shù)量多，目前臨床上對(duì)于該類生物堿的研究多集中于苦參堿類生物堿。主要是苦參堿(matrine)、氧化苦參堿(oxymatrine)、槐果堿(sophocarpine)、槐胺堿(sophoramine)及其槐定堿(sophoridine)等。研究顯示[38]苦參堿類生物堿具有非甾體類激素樣抗炎與抗過(guò)敏效應(yīng)，臨床上報(bào)道可用于治療濕疹、急性腎炎及鼻炎等。焦霞等[39]通過(guò)建立小鼠的哮喘模型，觀察氧化苦參堿對(duì)于造模小鼠肺組織病理與細(xì)胞總數(shù)的影響。并檢測(cè)肺組織中細(xì)胞間粘附分子(ICAM-1)mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果顯示：氧化苦參堿可顯著抑制小鼠肺組織ICAM-1mRNA表達(dá)(P<0.05)，明顯減弱氣道變應(yīng)性炎癥。結(jié)論指出，苦參堿抗炎反應(yīng)是其能夠治療哮喘疾病的主要機(jī)制。

Jiang L等[40]研究氧化苦參堿治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的作用，研究氧化苦參堿是否降低促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生與增殖。研究發(fā)現(xiàn)，氧化苦參堿可顯著降低IL-6，IL-8的表達(dá)與增殖。結(jié)論指出，氧化苦參堿對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎具有一定的抑制作用，可能作為未來(lái)治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的新藥應(yīng)用。

黃秀梅等[41]通過(guò)研究苦參堿、槐定堿等6種生物堿對(duì)于炎癥介質(zhì)白三烯C4與白三烯B4的影響，探討其抗炎作用機(jī)制。以鼠腹腔白細(xì)胞為材料，采用HPLC法測(cè)定LTC4與LTB4的水平。結(jié)果顯示，槐定堿僅對(duì)LTB4的生物合成具有顯著的抑制作用；苦參堿，氧化苦參堿等其他五種生物堿對(duì)LTB4和LTB3均有明顯抑制作用，均具有一定的抗炎活性。

Shuai-Shuai G等[42]探討苦參堿(MT)對(duì)VCR引起的中樞神經(jīng)病理性疼痛的影響。采用VCR給藥誘導(dǎo)小鼠痛性神經(jīng)病變模型，研究苦參堿在炎癥和氧化應(yīng)激中可能機(jī)制。結(jié)果顯示，苦參堿對(duì)VCR誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激與炎癥介質(zhì)(MPO、TNF-A、IL-6和IL-10)均有明顯抑制作用。結(jié)論指出：苦參堿可改善VCR誘導(dǎo)的疼痛性神經(jīng)病變，其機(jī)制主要?dú)w因于苦參堿氧化應(yīng)激減少和抗炎性作用的神經(jīng)保護(hù)作用。

4.2 蒎啶類生物堿

國(guó)內(nèi)外對(duì)于蒎啶類生物堿的抗腫瘤活性研究較多，對(duì)其抗炎作用研究卻很少。Hai-Long Z等[43]采用不同的色譜方法，從決明子的根中分離得到{4-[(1E)-3-hydroxyprop-1-en-1-yl]-2-methoxyphenoxy}piperidin-2-one(d)和其他類型等11種化合物，對(duì)分離的化合物進(jìn)行體外抗炎活性篩選。結(jié)果表明，化合物d對(duì)RAW264.7細(xì)胞產(chǎn)生NO具有顯著的抑制作用，具有一定的抗炎活性。

圖4 蒎啶類生物堿新化合物結(jié)構(gòu)

5 鳥(niǎo)氨酸系生物堿

主要為吡咯烷類生物堿，王方等[44]通過(guò)二甲苯致小鼠耳腫脹法與棉球誘導(dǎo)大鼠肉芽腫實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ脱芯克K堿(Stachydrine)的抗炎作用。通過(guò)檢測(cè)角叉菜膠致大鼠胸膜炎性滲出液中蛋白質(zhì)和白細(xì)胞(WBC)數(shù)、腫瘤壞死因子 α(TNF-α)、白細(xì)胞介素(IL-1)前列腺數(shù)2(PGE2)及其NO的含量，研究水蘇堿抗炎相關(guān)機(jī)制。結(jié)果顯示，12～21.12 mg·kg-1劑量下水蘇堿可顯著降低模型大鼠炎癥部位各炎癥介質(zhì)指標(biāo)的含量。

6 組氨酸系生物堿

主要為咪唑類生物堿，以研究小葉毛茛草葉中咪唑類生物堿epiisopiloturine(e)的抗傷害與抗炎活性為目的[45]。通過(guò)檢測(cè)髓過(guò)氧化物酶(MPO)活性、腫瘤壞死因子(TNF)-α和白細(xì)胞介素(IL-1β)水平。使用1種誘導(dǎo)爪水腫和腹膜炎的藥物評(píng)價(jià)e的抗炎活性。結(jié)果顯示，給藥0.1～1 mg·kg-1均可顯著減輕角叉菜膠誘導(dǎo)的爪水腫(p<0.05)。結(jié)論指出，該生物堿具有良好的抗炎作用。

圖5 組氨酸系生物堿新化合物結(jié)構(gòu)

7 甾體類生物堿

國(guó)外學(xué)者等[46]從藜蘆中提取分離一種特征性新生物堿jervine(f)，并研究其抗炎和抗氧化的作用。通過(guò)CAR誘導(dǎo)大鼠足爪水腫炎癥模型，在給藥后5 h后測(cè)量足部的體積，并估計(jì)了大鼠血清中GPx，SOD，GR，MPO，CAT酶活性和上清液的GSH，LPO水平以及TNF-α和IL-1β等炎癥生物標(biāo)志物。結(jié)果顯示：jervine在角叉菜膠誘導(dǎo)的足爪水腫中抑制率為50.4%～73.5%。通過(guò)CAR注射增加的炎癥生物標(biāo)志物如TNF-α，IL-1β 和MPO也得到了明顯的抑制。結(jié)論指出，該化合物具有一定的抗炎作用。

圖5 甾體類生物堿新化合物結(jié)構(gòu)

8 其他類型生物堿

Yu Z等[47]從植物中中分離到hemerominor A-H(g1-g8)等8種新的γ-內(nèi)酰胺類生物堿。通過(guò)RAW264.7巨噬細(xì)胞上清液中的亞硝酸鹽濃度測(cè)定NO的量，采用MTT還原評(píng)估細(xì)胞活力，結(jié)論證明所有化合物均對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞中LPS誘導(dǎo)的NO產(chǎn)生抑制作用，具有一定的抗炎作用，為抗炎新藥開(kāi)發(fā)的開(kāi)發(fā)提供新的途徑和方法。

圖6 γ-內(nèi)酰胺類生物堿新化合物結(jié)構(gòu)

9 結(jié) 語(yǔ)

目前，生物堿類抗炎藥在臨床上起著十分重要的作用，從1805年從阿片中分離出嗎啡單體化合物到紫杉醇、麻黃素等一系列抗炎藥的開(kāi)發(fā)，越來(lái)越多的生物堿類抗炎藥物被發(fā)現(xiàn)，且具有較強(qiáng)的活性。通過(guò)對(duì)天然藥物進(jìn)行深入化學(xué)與藥理活性的篩選，進(jìn)行體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)化合物的抗炎活性及其作用機(jī)制是目前的重要方向。伴隨炎癥作用機(jī)制的不斷深入研究，臨床治療藥物也在不斷的被發(fā)現(xiàn)，但由于生物堿天然藥物成分結(jié)構(gòu)的多樣性與復(fù)雜性，仍然有許多天然藥物在細(xì)胞與分子水平的作用靶點(diǎn)還不清楚，已有的部分抗炎藥物更多的是針對(duì)單靶點(diǎn)的藥物，且在應(yīng)用過(guò)程中有很多不良反應(yīng)涌現(xiàn)。因此，目前的對(duì)于抗炎藥物的研究還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。對(duì)于抗炎類生物堿類成分的研究是一個(gè)值得高度重視的資源。研究中草藥的生物堿類抗炎成分是當(dāng)今科研領(lǐng)域新藥開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn)，同時(shí)也是中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究最具前景的領(lǐng)域。