胡瑞敏 孫輝

【摘 要】目的：探討直抗陽性時(shí)RhD血型鑒定的注意事項(xiàng)，以確保臨床輸血安全。方法：采用酸放散法放散患兒紅細(xì)胞，采用鹽水試管法、微柱凝膠法及微柱凝膠抗人球蛋白法檢測(cè)患兒紅細(xì)胞表面RhD抗原。結(jié)果：該患兒為RhD陽性。結(jié)論：直抗陽性時(shí)需要先放散患者紅細(xì)胞至直抗陰性時(shí)，再做RhD血型鑒定。

【關(guān)鍵詞】Rh血型;? RhD; 直抗陽性

【中圖分類號(hào)】R446.6 【文獻(xiàn)識(shí)別碼】B【文章編號(hào)】1002-8714（2020）01-0026-01

【Abstract】 objective to discuss the precautions for blood group identification of RhD in direct anti-positive reaction， so as to ensure the safety of clinical blood transfusion. Methods the RhD antigen on the surface of erythrocytes was detected by acid dispersing method， saline tube method， microcolumn gel method and microcolumn gel anti-human globulin method. Results the patient was positive for RhD. Conclusion RhD blood group identification should be performed after the erythrocytes of the patient were dispersed to the negative direct resistance.

【Key words】 Rh blood group; RhD. Direct positive resistance

在實(shí)際臨床操作中，我們經(jīng)常發(fā)現(xiàn)很多患者由于各種疾病導(dǎo)致出現(xiàn)自身抗體并致敏自身紅細(xì)胞，而出現(xiàn)患者自身紅細(xì)胞直接抗球蛋白檢測(cè)陽性，干擾我們RhD血型鑒定時(shí)的結(jié)果，導(dǎo)致誤判患者RhD抗原，而延誤用血且有可能耽誤治療[1]。我們運(yùn)用酸放散試驗(yàn)的方法用放散后的紅細(xì)胞做RhD抗原檢測(cè)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

患兒系第三胎第2產(chǎn)胎齡35周，因“重度子癇前期”在我院剖宮產(chǎn)娩出，早產(chǎn)兒貌，刺激反應(yīng)可，哭聲弱，間斷呻吟，呼吸淺促，出生體重1.9kg?？偰懠t素302.5umol/L，間接膽紅素288.9umol/L，總膽汁酸3.0umol/L。出生后數(shù)小時(shí)皮膚黃染，1天內(nèi)經(jīng)皮測(cè)膽紅素為11.8mg/dl。

1.2 試劑與儀器

RhD（IgM）及RhD（IgG）血型定型試劑（均為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號(hào)分別為：20170804、20180213）。BX-1型樣本釋放劑（長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號(hào)：20180627）。RhD新生兒血型定型檢測(cè)卡及抗人球蛋白卡（均購自長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司，批號(hào)分別為：20180904、20180629）。HAMILTON血型儀（瑞士哈美頓博納圖斯）規(guī)格型號(hào)：185015。

1.3 血型血清學(xué)檢查

1.3.1? RhD血型鑒定，使用微住凝膠法和試管法。

1.3.2? 直接、間接抗人球蛋白試驗(yàn)使用微住凝膠法。

1.3.3? 酸放散試驗(yàn)。使用酸放散試劑，按照酸 放 散方法：（1）用生理鹽水洗滌待檢紅細(xì)胞 4 次，去除未結(jié)合的抗體。（2）取 4體積的放散液A 與 1 體積的放散液B 混合均勻。（3）將1m L檢紅細(xì)胞與1m L酸放散液混合均勻，室溫孵育 1～2 min。（4）3 000r/min 離心1 min。（5）立即將酸放散液轉(zhuǎn)移到另一支干凈的試管中，并加入紫紅色中和液調(diào)顏色至水粉色，使pH 值接近中性，離心1 min，取紅細(xì)胞層，配置紅細(xì)胞懸液做直抗試驗(yàn)和RhD血型鑒定試驗(yàn)[2]。

2 結(jié)果

用放散前的紅細(xì)胞懸液做RhD血型鑒定，顯示RhD陰性，直抗陽性，間抗陽性。用酸放散后的紅細(xì)胞配置成懸液做直抗及間抗結(jié)果為陰性，RhD陽性。本標(biāo)本來源的這位新生兒，紅細(xì)胞被IgG包被不是特別緊，所以放散一次就直抗陰性，不排除有紅細(xì)胞被IgG完全包被、包被過緊的標(biāo)本情況，可放散多次，直至直抗試驗(yàn)為陰性再做RhD血型鑒定[3]。

3 討論

有研究表明，直抗陽性在體內(nèi)可能由9種現(xiàn)象所引起，如紅細(xì)胞膜受某些藥物作用而改變，導(dǎo)致免疫球蛋白非特異性的被紅細(xì)胞膜所吸附，抗藥物的抗體與藥物致敏的紅細(xì)胞相結(jié)合等[4]。因此直抗陽性的標(biāo)本在做RhD血型鑒定時(shí)要注意，當(dāng)紅細(xì)胞表面被IgG抗體完全包被住并包被過緊時(shí)，抗D抗體無法與紅細(xì)胞表面的D抗原接觸發(fā)生抗原抗體反應(yīng)時(shí)，RhD血型易造成誤判錯(cuò)判，我們用放散后的紅細(xì)胞懸液做直抗，當(dāng)結(jié)果為陰性時(shí)，紅細(xì)胞不再被IgG包被，用此時(shí)的紅細(xì)胞做成懸液再做RhD血型鑒定試驗(yàn)才是最終判定。

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