馮軒彪， 黃建華 ， 付海玲， 葉逢春， 張水印

（1.江西科技師范大學(xué)，江西南昌330013；2.江西省進賢縣畜牧局，江西進賢331700；3.江西省宜豐縣橋西獸醫(yī)站，江西宜豐336300）

隨著生物制藥及中草藥的不斷發(fā)展， 尋求高效、環(huán)保、低毒副作用的藥物已成為畜牧養(yǎng)殖業(yè)的熱點問題。 馬齒莧（Portulaca oleraceaL．），又名馬莧菜、五行草等，系馬齒莧科馬齒莧屬一年生草本植物。 馬齒莧含有許多生物活性物質(zhì)，如黃酮、α-亞麻酸、維生素等，具有抗病毒、抗細菌、抗氧化、抗腫瘤、降血糖、提高機體免疫力、開發(fā)腦智力等作用（李鳳林等，2012；夏渝林，2007；余慶皋等，2007；王曉波等，2005）。邱妍等（2012）用中草藥灌服小鼠研究中草藥對大腸桿菌的抑制作用， 結(jié)果表明，黃芩、金銀花、馬齒莧、穿心蓮的抑菌作用明顯。周正等（2014）研究表明，馬齒莧多糖可以提高雙歧桿菌和乳酸桿菌數(shù)量， 降低外周血內(nèi)毒素含量，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡，對潰瘍性結(jié)腸炎具有一定的治療作用。本試驗旨在探討馬齒莧對蛋雞產(chǎn)蛋期產(chǎn)蛋性能及腸道大腸桿菌和乳酸桿菌的影響，以改善蛋雞腸道菌群環(huán)境， 提高蛋雞產(chǎn)蛋期的抗病力，達到部分代替抗生素的作用。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 本試驗所用馬齒莧在江西省撫州地區(qū)野生采集，用自來水洗凈，自然晾干并磨成粉狀備用。

1.2 試驗動物及日糧 采用單因子試驗設(shè)計，選擇48 只產(chǎn)蛋高峰期體況良好的東鄉(xiāng)黑雞， 以體重、產(chǎn)蛋數(shù)量基本相同原則分為4 個處理組。分別飼喂添加0%、1%、2%和3%的馬齒莧日糧。 試驗日糧參照蛋雞NRC（1994）和我國地方蛋雞飼養(yǎng)標準（ZBB43005—86），并結(jié)合江西地方雞品種具體情況進行配制， 試驗日糧的主要營養(yǎng)指標力求達到一致，所有試驗日糧為粉狀飼料，其配方及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗在一個東鄉(xiāng)黑雞種雞場進行，實行單只籠養(yǎng)，產(chǎn)蛋高峰期開始試驗，試驗期間每天上午、 下午各測溫度一次， 雞欄舍溫度為19 ～28 ℃，自然光照和通風(fēng)，自由采食，每天上午、下午各打掃一次保持欄舍清潔衛(wèi)生。試驗期為5 月10 日～6 月15 日，共計35 d。

1.4 指標測定與方法

1.4.1 產(chǎn)蛋性能 每天觀察雞群健康狀況和采食、飲水情況，記錄每只雞每天采食量。 從5 月20日開始收集雞蛋直至6 月15 日結(jié)束，每天收集雞蛋進行稱重和計數(shù)。 計算采食量、產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重和料蛋比。

表1 產(chǎn)蛋雞日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4.2 大腸桿菌和乳酸桿菌的檢測 在試驗第20、35 天8：00 收集雞的糞便立即送到實驗室進行大腸桿菌和乳酸桿菌數(shù)量檢測。 （1）樣品稀釋：樣品充分混勻， 精確稱取1 mL 樣品置99 mL 稀釋液（含0.1%瓊脂生理鹽水）中，充分混勻即為原液 （稀釋度為10-2）， 再以10 倍梯度稀釋至第5管，稀釋度分別為10-3、10-4、10-5、10-6。 （2）培養(yǎng)基準備：采用EMB 選擇培養(yǎng)基檢測大腸桿菌（出現(xiàn)黑色有光澤菌落為大腸桿菌菌落）； 采用MRS 選擇培養(yǎng)基檢測乳酸桿菌。 （3）樣品計數(shù)：選擇第3、4、5 管（稀釋度分別為10-4、10-5、10-6）樣品，每個稀釋度用微量移液管取20 μL， 小心滴于選擇培養(yǎng)基上，每塊培養(yǎng)基劃為3 小塊，每小塊滴一個樣品一個稀釋度，每個稀釋度做兩次，計數(shù)時取其平均值。 加好樣后，將培養(yǎng)基置37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h，取出觀察并記錄結(jié)果。 每個樣品有三個稀釋度，選擇菌落數(shù)為2 ～20 個的稀釋度為正確試驗結(jié)果。 （4）結(jié)果計算：計數(shù)結(jié)果=菌落數(shù)×所選擇稀釋度×50（cfu/g）（注：因為每個稀釋度僅取20 μL 計數(shù)，折算為1 mL 樣品時，應(yīng)乘以50 倍）。

1.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析 用SPSS 10.0 統(tǒng)計軟件對可量化生產(chǎn)性能指標數(shù)據(jù)進行單因素方差分析和兩兩比較的q 檢驗（Newman-Keuls 法） 或t檢驗，結(jié)果用“平均值±標準差”表示，各分析指標的差異顯著性以P ＜0.05 表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 馬齒莧對產(chǎn)蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響 由表2可知，與對照組相比，日糧中添加2%和3%馬齒莧組產(chǎn)蛋數(shù)分別提高49.5%和67.7%（P ＜0.05），添加1%、2%和3%馬齒莧組產(chǎn)蛋率分別提高15.4%、23.1%、26.9%（P ＜0.05）， 添加1%、2%和3%馬齒莧組料蛋比分別降低16.6%、17.4%、17.6%（P ＜0.05），各組平均蛋重差異不顯著。 飼糧中添加馬齒莧可顯著提高產(chǎn)蛋性能， 但對采食量無顯著影響。

表2 馬齒莧對蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

2.2 馬齒莧對蛋雞大腸桿菌和乳酸桿菌的影響由表3 可知，與對照組相比，添加3%馬齒莧組大腸桿菌數(shù)量降低57.8%（P ＜0.05），乳酸桿菌高于對照組一倍，差異顯著（P ＜0.05），且乳酸桿菌與大腸桿菌比值比對照組提高了39%（P ＞0.05）；添加1%馬齒莧組腸道中大腸桿菌數(shù)量降低，添加2%馬齒莧組乳酸桿菌的數(shù)量增加， 但差異均不顯著（P ＞0.05）。 因此，一定水平的馬齒莧能優(yōu)化腸道中菌群數(shù)量并有效提高蛋雞腸道中的乳酸桿菌數(shù)并降低大腸桿菌數(shù)。

表3 馬齒莧對蛋雞大腸桿菌和乳酸桿菌的影響

3 討論

近年來，許多研究表明，在飼料中添加馬齒莧及其提取物能改變動物腸道中菌群關(guān)系， 增強其抗病力，并顯著改善其生產(chǎn)性能。王瑞云（1999）報道，每天給每只蛋雞添加0.05 kg 鮮馬齒莧，試驗組產(chǎn)蛋率、 種蛋受精率及受精蛋孵化率較對照組均顯著提高（P ＜0.05），試驗組較對照組飼料報酬極顯著提高（P ＜0.01）。陳國妮等（2015）研究表明，馬齒莧黃酮類化合物對大腸桿菌、 金黃色葡萄球菌、酵母菌等均有一定的抑制作用，其濃度越高，抑菌圈直徑越大，抑菌效果越明顯；其中對大腸桿菌和酵母菌有較強的抑制作用， 最低抑菌濃度均為0.313 mg/mL，對金黃色葡萄球菌的抑制作用最強，最低抑菌濃度為0.156 mg/mL。本試驗結(jié)果表明，日糧中添加一定水平的馬齒莧能夠顯著提高蛋雞的產(chǎn)蛋性能， 其原因可能是馬齒莧含有豐富的多糖、黃酮、α-亞麻酸和維生素等活性物質(zhì)，可以改變卵巢的活性，促使更多卵泡的發(fā)育，產(chǎn)出更多的雞蛋，從而達到降低料蛋比。

通過檢測糞中乳酸桿菌和大腸桿菌的數(shù)量可以間接推斷蛋雞腸道中這兩種菌的數(shù)量關(guān)系。 馬齒莧能優(yōu)化蛋雞腸道中菌群， 能使乳酸桿菌占據(jù)更多的黏附位點形成更大的優(yōu)勢菌群， 并通過調(diào)節(jié)腸道內(nèi)的微生態(tài)平衡從而抑制大腸桿菌生長。

4 結(jié)論

本試驗結(jié)果表明， 在產(chǎn)蛋雞日糧中添加適宜的馬齒莧能提高產(chǎn)蛋雞的產(chǎn)蛋性能， 并能優(yōu)化蛋雞腸道中乳酸桿菌和大腸桿菌數(shù)量， 提高蛋雞的抗病能力。