吳剛

臨床上用于觀察抗凝治療效果、血栓形成的常用指標(biāo)包括Fib、APTT、TT、PT,凝血四項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)對(duì)臨床疾病的診治有重要的參考和指導(dǎo)作用,對(duì)研究凝血機(jī)制有積極的意義［1,2］。保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵是實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化,但在實(shí)際中,受各種因素的影響,比如保存溫度、送檢時(shí)間等,都可能使試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果發(fā)生改變。為探究標(biāo)本放置時(shí)間、離心時(shí)間以及溶血與否對(duì)凝血檢測(cè)結(jié)果的影響,特選取本院180例凝血功能正?；颊叩难簷z測(cè)樣本進(jìn)行研究,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2018年6～12月的180例凝血功能正?；颊叩难簷z測(cè)樣本,所有參與檢測(cè)樣本均為健康血液樣本,并且患者均明確研究目的,簽署知情同意書(shū)。參與研究患者中男90例,女90例；年齡20～30歲,平均年齡(24.1±3.2)歲。

1.2 方法 采用全自動(dòng)血凝儀,對(duì)質(zhì)控用品、試劑等進(jìn)行檢測(cè)。所有參與者保持輕松的狀態(tài),在同等條件下進(jìn)行血液采集,于早餐前空腹采血,每例患者均抽取6份5 ml的血樣。采用109 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝劑,血液和枸櫞酸鈉的比例是9∶1。抽出血液后,將其放入有抗凝劑的真空采血管中。選取3份血樣分別放置1、2和4 h進(jìn)行Fib、APTT、TT、PT水平的檢測(cè)。另外3份血樣進(jìn)行不同離心時(shí)間的實(shí)驗(yàn),分別離心5、10、15 min,離心機(jī)速度均為3000 r/min,獲取上層血漿進(jìn)行檢測(cè)。在離心分離的標(biāo)本中,如果用肉眼可見(jiàn),血漿中有溶血的為溶血標(biāo)本,對(duì)溶血標(biāo)本和未溶血標(biāo)本進(jìn)行區(qū)分,并檢測(cè)其凝血四項(xiàng)指標(biāo)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同放置時(shí)間血液標(biāo)本凝血檢測(cè)結(jié)果比較 放置4 h血液樣本的TT水平(12.31±1.11)s低于放置2 h血液樣本的(14.95±1.20)s與放置1 h血液樣本的(16.79±1.28)s,放置2 h血液樣本的TT水平低于放置1 h血液樣本,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；放置4 h血液樣本的APTT水平(31.56±3.62)s高于放置2 h血液樣本的(26.03±3.45)s與放置1 h血液樣本的(25.23±3.36)s,放置2 h血液樣本的APTT水平高于放置1 h血液樣本,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；放置1、2、4 h血液樣本的PT、Fib水平兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 不同離心時(shí)間血液標(biāo)本凝血檢測(cè)結(jié)果比較 離心5 min血液樣本的PT、APTT水平均低于離心10 min血液樣本和離心15 min血液樣本,離心15 min血液樣本的PT、APTT水平均低于離心10 min血液樣本,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；離心5、10、15 min血液樣本的Fib、TT水平兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

2.3 溶血與未溶血血液標(biāo)本凝血檢測(cè)結(jié)果比較 凝血檢測(cè)后,溶血血液標(biāo)本的PT、Fib、APTT水平均明顯低于未溶血血液標(biāo)本,且TT水平明顯高于未溶血血液標(biāo)本,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表1 不同放置時(shí)間血液標(biāo)本凝血檢測(cè)結(jié)果比較()

表1 不同放置時(shí)間血液標(biāo)本凝血檢測(cè)結(jié)果比較()

注：與放置1 h比較,aP<0.05；與放置2 h比較,bP<0.05

表2 不同離心時(shí)間血液標(biāo)本凝血檢測(cè)結(jié)果比較()

表2 不同離心時(shí)間血液標(biāo)本凝血檢測(cè)結(jié)果比較()

注：與離心5 min比較,aP<0.05；與離心10 min比較,bP<0.05

表3 溶血與未溶血血液標(biāo)本凝血檢測(cè)結(jié)果比較()

表3 溶血與未溶血血液標(biāo)本凝血檢測(cè)結(jié)果比較()

注：與溶血比較,aP<0.05

3 討論

凝血檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性受多方面因素的影響,比如樣本的存儲(chǔ)時(shí)間、試劑的使用、操作規(guī)范等,標(biāo)本溶血是最常見(jiàn)的一種因素。本次研究顯示,放置4 h血液樣本的TT水平(12.31±1.11)s低于放置2 h血液樣本的(14.95±1.20)s與放置1 h血液樣本的(16.79±1.28)s,放置2 h血液樣本的TT水平低于放置1 h血液樣本,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；放置4 h血液樣本的APTT水平(31.56±3.62)s高于放置2 h血液樣本的(26.03±3.45)s與放置1 h血液樣本的(25.23±3.36)s,放置2 h血液樣本的APTT水平高于放置1 h血液樣本,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；放置1、2、4 h血液樣本的PT、Fib水平兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。離心5 min血液樣本的PT、APTT水平均低于離心10 min血液樣本和離心15 min血液樣本,離心15 min血液樣本的PT、APTT水平均低于離心10 min血液樣本,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；離心5、10、15 min血液樣本的Fib、TT水平兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。凝血檢測(cè)后,溶血血液標(biāo)本的PT、Fib、APTT水平均明顯低于未溶血血液標(biāo)本,且TT水平明顯高于未溶血血液標(biāo)本,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。反映了不同放置時(shí)間、離心時(shí)間以及溶血與否都會(huì)改變凝血檢測(cè)結(jié)果,標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),TT會(huì)縮短,APTT會(huì)延長(zhǎng)。離心時(shí)間過(guò)短,PT、APTT會(huì)縮短。出現(xiàn)溶血問(wèn)題的標(biāo)本,PT、Fib、APTT會(huì)縮短,TT會(huì)延長(zhǎng)。在血液采集過(guò)程中,要注重保證質(zhì)量,準(zhǔn)確標(biāo)寫(xiě)患者的姓名和編號(hào),并使患者處于空腹?fàn)顟B(tài),以及心情放松的平靜狀態(tài),減少對(duì)標(biāo)本質(zhì)量的影響。最好在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)采血,或者血液采集后及時(shí)送到實(shí)驗(yàn)室,在運(yùn)送的過(guò)程中,防止日光直射,防止劇烈的震動(dòng),并且要避免有異物進(jìn)入［3-5］。還要注意運(yùn)送的溫度,防止對(duì)血小板的損傷。最好在1 h內(nèi)分離血漿,全血貯存在4～10℃不能>2 h。富含血小板血漿在室溫22～24℃,可以存放2 h。如果在檢測(cè)前發(fā)現(xiàn)溶血,需要重新采集。

標(biāo)本的放置時(shí)間、離心時(shí)間和是否溶血都會(huì)影響凝血的檢測(cè)結(jié)果。儀器設(shè)備的使用與運(yùn)行、操作水平、采集水平、試劑的選擇等,都是相關(guān)因素。其中任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問(wèn)題,都會(huì)對(duì)檢驗(yàn)的質(zhì)量產(chǎn)生影響。因此,在檢驗(yàn)過(guò)程中需要注意,專業(yè)處理樣本,合理選擇抗凝劑種類(lèi)和劑量,有效控制樣本量然后離心操作［6-8］。離心要合理選擇離心時(shí)間和離心機(jī)速度,盡量避開(kāi)白細(xì)胞的血漿層,或者脂質(zhì),然后吸取血清。在采集血液樣本前,需要告知患者注意事項(xiàng)。采集樣本時(shí),患者要保持平靜。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)采血,避免進(jìn)入異物、陽(yáng)光直射、震動(dòng)劇烈等。做好隔離消毒措施。規(guī)范操作,防止血液標(biāo)本出現(xiàn)異物污染、過(guò)度震蕩等。避免出現(xiàn)溶血,加強(qiáng)各環(huán)節(jié)的處理和保存。標(biāo)本在存放時(shí),在室溫下保存。4～10℃全血貯存≤2 h。避免溫度過(guò)度,縮短APTT和 TT。離心在室溫20～25℃下。在室溫 22～24℃中,可以存放2 h富含血小板血漿［9,10］。如果檢測(cè)前,發(fā)現(xiàn)有血塊、溶血,需要立刻停止檢測(cè),重新采集,標(biāo)本采集與離心中,注意預(yù)防溶血。

綜上所述,不同的放置時(shí)間、離心時(shí)間和是否溶血,都會(huì)對(duì)凝血檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。因此要注意操作的規(guī)范性,把握合適的時(shí)間,確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。