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        紅掌無(wú)菌系建立及培養(yǎng)技術(shù)

        2020-01-25 16:16:49任武婷
        西北園藝·蔬菜 2020年6期
        關(guān)鍵詞:紅掌外植體光照

        任武婷

        紅掌又稱安祖花、花燭等,屬天南星科花燭屬多年生常綠草本植物,性喜溫?zé)岫酀穸峙潘己玫沫h(huán)境,怕干旱和強(qiáng)光暴曬。紅掌也是溫室名貴花卉之一,由于其花色艷麗,花期持久,一年四季紅花綠葉,既能作為盆栽,又能作為切花。隨著人們生活水平的提高,紅掌的需求量也在加大。短期內(nèi)要滿足紅掌的市場(chǎng)需求,用分株方法繁殖時(shí)間太長(zhǎng),用播種繁殖易產(chǎn)生變異,不利于大規(guī)模生產(chǎn),只有利用組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù),才能滿足人們對(duì)紅掌的大量需求。

        1 ? 準(zhǔn)備階段

        首先制定出詳細(xì)的培養(yǎng)方案,準(zhǔn)備試驗(yàn)所需的工具器具,制備適宜的培養(yǎng)基,并經(jīng)高溫高壓滅菌備用,然后根據(jù)方案配制出試驗(yàn)用的化學(xué)消毒劑。

        2 ? 外植體采集與消毒

        2.1 ? 外植體采集 ? 選擇在晴天的中午9:00—10:00采集外植體,以溫室里的“紅國(guó)王”品種的健壯無(wú)病蟲(chóng)害的植株上剛長(zhǎng)出1~3天的新葉為宜(葉片半卷曲)。

        2.2 ? 外植體清洗消毒 ? 用自來(lái)水將采集回的葉片沖洗干凈,再用洗潔精清洗,在流水下沖洗2小時(shí),然后放到無(wú)菌操作臺(tái)上進(jìn)行消毒。①先用75%酒精消毒30秒,然后用無(wú)菌水沖洗1次,再用0.1%HgCl2浸泡10~15分鐘,浸泡時(shí)用玻璃棒輕輕攪動(dòng),使外植體與消毒劑充分接觸,最后用無(wú)菌水沖洗5次。當(dāng)消毒時(shí)間為10分鐘時(shí),污染率下降至6%,消毒效果較理想。消毒時(shí)間為15分鐘時(shí),污染率更低,為3%。綜合考慮選擇消毒15分鐘。

        3 ? 接種和培養(yǎng)

        3.1 ? 接種 ? 接種整個(gè)過(guò)程均需無(wú)菌操作,先將消毒好的葉片放到高溫滅菌過(guò)的濾紙上,吸干葉片表面的水分,然后用刀片把葉片沿主脈切開(kāi),切掉葉片邊緣藥物侵蝕部分,將剩余部分切成1 cm×1 cm的小方塊,再放到培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷誘導(dǎo)。1/2 MS+0.5 mg/L BA+0.2 mg/L 2,4-D,瓊脂4.7 g/L,糖30 g/L,pH=5.8,比較適合作誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基。每瓶放1個(gè)外植體,瓶身標(biāo)注培養(yǎng)基名稱、品種代碼、接種日期、接種員代號(hào),每天檢查是否有感染,并及時(shí)清理。

        3.2 ? 培養(yǎng) ? 接種完畢送到培養(yǎng)室去培養(yǎng),對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)來(lái)說(shuō),暗培養(yǎng)比較合適。濕度50%,溫度23~32 ℃,20~26天后葉片開(kāi)始膨大,等葉片邊緣出現(xiàn)黃色顆粒狀愈傷組織時(shí),轉(zhuǎn)為光照培養(yǎng),光照強(qiáng)度800~1 500 lx,每天用光照12小時(shí),35~50天后葉片邊緣愈傷組織由淡黃色轉(zhuǎn)變?yōu)槟G色。

        4 ? 芽誘導(dǎo)

        將誘導(dǎo)出的愈傷組織接種到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中。1/2 MS+1.0 mg/L BA+0.3 mg/L IBA,瓊脂4.7 ? g/L,糖30 g/L,pH=5.8,適合作芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基。

        5 ? 芽增殖培養(yǎng)

        將長(zhǎng)出的叢芽(1~3個(gè)芽)分別接種到如下增殖培養(yǎng)基中:MS+0.5 mg/L BA+0.2 mg/L IBA,瓊脂4.7 g/L,糖30 g/L,pH=5.8。每天光照時(shí)間12~14小時(shí),光照強(qiáng)度2 000 lx左右,溫度20~25 ℃。增殖率高,苗無(wú)畸形和玻璃化現(xiàn)象,30天可以進(jìn)行繼代。在增殖過(guò)程中選取最優(yōu)質(zhì)的大苗,淘汰弱苗,9~10次增殖率最高,隨著繼代次數(shù)的增加,增殖率下降。

        6 ? 生根培養(yǎng)

        選擇健壯且?guī)в?片葉子的芽,轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基(1/2 MS+1.0 mg/L IBA +0.5 mg/L IAA +2 g/L碳粉)中進(jìn)行培養(yǎng)。光照2 500~ ? ? ?3 000 lx,每天光照時(shí)間為12小時(shí),溫度25 ℃,濕度50%。培養(yǎng)15天就可以長(zhǎng)出3條根,根長(zhǎng)0.2~0.5 cm,培養(yǎng)30天根長(zhǎng)1~1.5 cm,就可以移入溫室馴化煉苗。

        7 ? 馴化及出瓶移載

        從培養(yǎng)室把瓶苗移到溫室苗床上后馴化2周,對(duì)瓶苗適當(dāng)遮陰,白天溫度25~27 ℃,晚間溫度21~23 ℃,濕度60%~70%。出瓶前一天打開(kāi)瓶蓋,使瓶?jī)?nèi)濕度接近溫室濕度,出瓶時(shí)注意不要弄傷葉片和根,先把苗用純凈水清洗干凈,再放到10%多菌靈溶液中消毒1分鐘,然后再將苗栽到配好的泥炭基質(zhì)中,苗移栽后用噴壺澆水,定期噴施殺菌劑(甲基菌硫靈和多菌靈)防止病蟲(chóng)危害。

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